MATERIALS AND METHODSAnimal collect

MATERIALS AND METHODS
Animal collection and maintenance
Two different clones ofthe sea anemone Haliplanella luciae were removed from rocks or small oyster clumps near the Florida State University Marine Laboratory, Turkey Point, Florida. A third H. luciae clone was collected by L. L. Minasian at the mouth of the Indian River in Delaware. Monoclonal H. luciae stock cultures were established following frequent fission events, beginning with isolated individuals of each H. luciae clone. Stock culture anemones were kept in culture dishes filled with natural sea water (28—30%o),which was changed daily and held at 17—19°C. The sea anemones were fed to repletion twice weekly with freshly hatched Artemia nauplii according to the methods of Minasian and Mariscal (1979). Specimens of the sea anemone Diadumene gracillima (which can have catch tentacles) were collected from oyster clumps near the FSU Marine Lab. Unlike H. luciae, D. gracillima seldom reproduces asexually. Thus, experimental D. gracillima were not monoclonal. Diadumene gracillima was maintained in culture dishes filled with sea water by the methods described above for H. luciae stock cultures.
Induced catch tentacle development
Three different biclonal, intraspecific cultures were established using the three H. luciae clones. Forty-eight organisms, twenty-four of each clone, were placed in
508 G. M. WATSONAND R. N. MARISCAL
70 mm diameter culture dishes filled with sea water to a height of 10 mm (40 ml) in order to crowd the anemones and insure frequent tentacle contacts throughout the culture. In addition, a single interspecific anemone culture was established using twenty-four monoclonal H. luciae mixed with an equal number of D. gracillima in a culture dish filled with 40 ml of sea water. In order to control against possible effects of crowding on catch tentacle development, a control culture of forty-eight monoclonal H. luciae was established in a culture dish as before. The procedures described above were intended to stimulate the development of catch tentacles in H. luciae. Anemone cultures were screened at approximately one week intervals for developing catch tentacles, mature catch tentacles, and regressing catch tentacles.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
เก็บรวบรวมสัตว์และการบำรุงรักษา
ที่แตกต่างกันสองโคลน ofthe ทะเลดอกไม้ทะเล luciae Haliplanella ถูกถอดออกจากหินหรือกอหอยนางรมเล็ก ๆ ใกล้กับมหาวิทยาลัยแห่งรัฐฟลอริดาทะเลห้องปฏิบัติการ, ตุรกี Point บน สามเอช luciae โคลนถูกเก็บรวบรวมโดย LL Minasian ที่ปากของแม่น้ำอินเดียในเดลาแวร์ โมโนโคลนอลเอช luciae หุ้นวัฒนธรรมที่เป็นที่ยอมรับต่อไปนี้เหตุการณ์ที่เกิดขึ้นบ่อยฟิชชันเริ่มต้นด้วยบุคคลที่แยกของแต่ละ H. luciae โคลน ดอกไม้ทะเลวัฒนธรรมหุ้นถูกเก็บไว้ในอาหารวัฒนธรรมที่เต็มไปด้วยน้ำทะเลธรรมชาติ (28€ "30% o) ซึ่งได้รับการเปลี่ยนแปลงทุกวันและจัดขึ้นที่ 17A €" 19° C ทะเลดอกไม้ทะเลเป็นอาหารอุดมสมบูรณ์สองสัปดาห์กับอาร์ทีเมียฟักสดอาร์ทีตามวิธีการของ Minasian และ Mariscal (1979) ตัวอย่างของทะเลดอกไม้ทะเล Diadumene gracillima (ซึ่งจะมีหนวดจับ) ที่ถูกเก็บรวบรวมจากดงหอยนางรมใกล้เฮ้ยทะเล Lab ซึ่งแตกต่างจากเอช luciae, D. gracillima ไม่ค่อยพันธุ์เซ็ก ดังนั้น gracillima D. ทดลองไม่ monoclonal Diadumene gracillima ถูกเก็บรักษาไว้ในอาหารวัฒนธรรมที่เต็มไปด้วยน้ำทะเลโดยวิธีการที่อธิบายข้างต้นสำหรับเอช luciae หุ้นวัฒนธรรม.
การชักนำให้เกิดการจับหนวดพัฒนา
สาม biclonal ที่แตกต่างกันวัฒนธรรมสำนวนที่ถูกจัดตั้งขึ้นโดยใช้สามเอช luciae โคลน สี่สิบแปดชีวิตยี่สิบสี่ของแต่ละโคลนอยู่ใน
508 จีเอ็ม WATSONAND RN Mariscal
70 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางวัฒนธรรมอาหารที่เต็มไปด้วยน้ำทะเลที่สูงถึง 10 มม (40 มล.) เพื่อให้ฝูงชนดอกไม้ทะเลและประกันรายชื่อหนวดบ่อย ตลอดทั้งวัฒนธรรม นอกจากนี้วัฒนธรรม interspecific ดอกไม้ทะเลเดียวที่ได้รับการจัดตั้งขึ้นโดยใช้โมโนโคลนอลยี่สิบสี่เอช luciae ผสมกับจำนวนที่เท่ากัน D. gracillima ในจานวัฒนธรรมที่เต็มไปด้วย 40 ml ของน้ำทะเล เพื่อที่จะควบคุมจากผลกระทบที่เป็นไปได้ของการเบียดเสียดในจับหนวดพัฒนาวัฒนธรรมการควบคุมของสี่สิบแปดโมโนโคลนอลเอช luciae ก่อตั้งขึ้นในจานเพาะเลี้ยงเป็นมาก่อน ขั้นตอนที่อธิบายไว้ข้างต้นมีวัตถุประสงค์เพื่อกระตุ้นให้เกิดการพัฒนาของหนวดจับในเอช luciae Anemone วัฒนธรรมที่ได้รับการฉายในช่วงเวลาประมาณหนึ่งสัปดาห์สำหรับการพัฒนาหนวดจับหนวดจับผู้ใหญ่และถอยหนวดจับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการจัดเก็บและบำรุงรักษาสัตว์

สองแตกต่างกันโคลนของดอกไม้ทะเล haliplanella luciae ถูกถอดออกจากหินหรือกระจุกหอยนางรมขนาดเล็กใกล้มหาวิทยาลัยฟลอริดาจุดปฏิบัติการทางทะเล , ตุรกี , ฟลอริดา สามชั่วโมง luciae โคลนเพื่อ L . L . minasian ที่ปากของแม่น้ำอินเดียในเดลาแวร์ โมโนโคลนอล hวัฒนธรรมต็อก luciae ก่อตั้งขึ้นหลังจากเหตุการณ์การบ่อย ๆ เริ่มต้นด้วยการแยกของแต่ละบุคคล luciae โคลน . . วัฒนธรรมต็อกดอกไม้ทะเลไว้ในวัฒนธรรมอาหารที่เต็มไปด้วยทะเลน้ำธรรมชาติ ( 28 †" 30 % O ) ซึ่งมีการเปลี่ยนแปลงทุกวัน และจัดขึ้นที่ 17 †" 19 ° Cทะเลดอกไม้ทะเล เลี้ยงให้สมบูรณ์สองสัปดาห์กับสดฟักอาร์ท nauplii ตามวิธีการของ minasian และมาริ าล ( 1979 ) ตัวอย่างของดอกไม้ทะเล diadumene gracillima ( ซึ่งสามารถจับหนวด ) ถูกเก็บจากหอยนางรมกระจุกใกล้ทะเลแลป ซึ่งแตกต่างจาก luciae FSU H , D . gracillima ไม่ใคร่ reproduces asexually . ดังนั้นทดลอง Dgracillima ไม่ได้โคลน . diadumene gracillima ไว้ในวัฒนธรรมอาหารที่เต็มไปด้วยน้ำทะเล โดยวิธีการที่อธิบายข้างต้นสำหรับวัฒนธรรมหุ้นเอช luciae .

จับหนวดและการพัฒนาที่แตกต่างกันสาม biclonal วัฒนธรรมเซ็นต์ขึ้นโดยใช้สามชั่วโมง luciae โคลน สี่สิบแปดสิ่งมีชีวิตยี่สิบสี่ของแต่ละโคลนอยู่ใน
508 กรัมเมตร watsonand อาร์ เอ็นมาริ าล
70 มม. เส้นผ่าศูนย์กลางวัฒนธรรมอาหารที่เต็มไปด้วยทะเลน้ำความสูง 10 มม. ( 40 ml ) เพื่อให้ฝูงชนออกมาและประกันติดต่อหนวดบ่อยตลอดทั้งวัฒนธรรม นอกจากนี้ วัฒนธรรม ดอกไม้ทะเล interspecific เดียวก่อตั้งขึ้นโดยใช้โมโนโคลนอล luciae ยี่สิบสี่ชั่วโมงเท่ากัน ผสมกับตัวเลขของ D . gracillima ในวัฒนธรรมอาหารที่เต็มไปด้วย 40 ml ของน้ำทะเลเพื่อควบคุมป้องกันผลกระทบที่เป็นไปได้ของที่อยู่ในการพัฒนาหนวดจับควบคุมวัฒนธรรมของโมโนโคลนอล luciae 48 . ก่อตั้งขึ้นในวัฒนธรรมของอาหารเช่นเดิม ขั้นตอนที่อธิบายไว้ข้างต้นมีวัตถุประสงค์เพื่อกระตุ้นการพัฒนาของจับหนวดในชั่วโมง luciae . ดอกไม้ทะเลวัฒนธรรมมีประมาณหนึ่งสัปดาห์ช่วงการพัฒนาจับหนวดผู้ใหญ่จับหนวด และ้
จับหนวด