The formation of glycan structuresw

The formation of glycan structures
with terminal mannose residues allows recombinant proteins to target mannose-specific surface
receptors on macrophages (6) and in products where an increased clearance rate from the blood
is desirable (49). The lack of sialylation is also an advantage for the production of plant-derived
asialoerythropoietin (78).
Glycoengineering has been achieved through a variety of approaches, including conventional
mutagenesis or homologous recombination to knock out genes encoding unwanted glycosyltransferases,
RNA interference to suppress the same enzymes, and transgene expression to introduce
heterologous glycosyltransferases that form human-like glycans (5). Engineering the
N-glycosylation pathway in different plant species has thus achieved the abolition of β(1,2)-linked
xylose and core α(1,3)-linked fucose residues (18, 52, 100, 109) and the complete reconstruction of
mammalian glycosylation pathways in plants (1, 9–12, 66, 76, 85, 110). The versatility of this approach
has allowed the development of product-specific designer glycoforms in plants (Figure 2).
For example, it is well established that antibody effector functions such as binding to the Fc γRIIIa
receptor are inhibited by core fucose residues [both the core α(1,3)-linked fucose residues found
in plants and the core α(1,6)-linked fucose residues found in mammals] and that the absence of
these residues promotes antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (99, 110). Consequently,
glycoengineered plants can be used to produce glyco-optimized versions of proteins that would
not be produced naturally, such as the CD20-specific antibody with improved pharmacokinetic
properties produced by Synthon using the LEX technology recently acquired from Biolex Therapeutics.
This antibody is indicated for the treatment of non-Hodgkin’s lymphoma and has a
10-fold greater affinity for its receptor and a 20-fold greater antibody-dependent, cell-mediated
cytotoxicity compared with its mammalian counterpart (30).
Plant glycan structures do not always affect the function of a recombinant protein; for example,
the HIV-neutralizing antibody 2G12 produced in plants was just as potent as counterparts
produced in mammalian cells (82, 83), and plant-derived glycoproteins do not appear to induce
adverse or allergenic responses in humans even when administered on multiple occasions (34).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การก่อตัวของโครงสร้าง glycanกับเทอร์มินัล mannose ตก recombinant โปรตีนเป้าหมาย mannose เฉพาะพื้นผิวที่ช่วยให้receptors บนบังเอิญ (6) และ ในผลิตภัณฑ์ที่เคลียร์การเพิ่มอัตราจากเลือดถูกต้อง (49) การขาดของ sialylation เป็นการผลิตของโรงงานมาasialoerythropoietin (78)Glycoengineering ได้รับความผ่านหลากหลายวิธี รวมถึงแบบดั้งเดิมmutagenesis หรือ homologous recombination น็อกยีน glycosyltransferases ที่ไม่พึงประสงค์ การเข้ารหัสแทรกแซงอาร์เอ็นเอจะระงับเอนไซม์เดียว และ transgene นิพจน์จะแนะนำglycosyltransferases heterologous ที่ glycans เหมือนมนุษย์ (5) วิศวกรรมการทางเดิน N glycosylation ในพืชต่างชนิดจึงได้รับเลิกβ (1, 2) -เชื่อมโยงα xylose และหลัก (1,3) -เชื่อมโยง fucose ตก (18, 52, 100, 109) และฟื้นฟูเสร็จสมบูรณ์ของมนต์ mammalian glycosylation ในพืช (1, 9 – 12, 66, 76, 85, 110) ความคล่องตัวของวิธีการนี้ได้รับอนุญาตของ glycoforms ออกแบบผลิตภัณฑ์เฉพาะในพืช (รูปที่ 2)ตัวอย่าง มันดีสำเร็จ effector ที่แอนติบอดีหน้าที่เช่นผูกกับ Fc γRIIIaตัวรับจะห้าม โดยหลัก fucose ตก [ทั้งแกนα (1,3) -เชื่อมโยง fucose ตกพบในพืชและαหลัก (1,6) -เชื่อมโยง fucose ตกค้างที่พบในการเลี้ยงลูกด้วยนม] และการขาดงานของตกค้างเหล่านี้ส่งเสริมขึ้นอยู่กับแอนติบอดี mediated เซลล์ cytotoxicity (99, 110) ดังนั้นglycoengineered พืชที่สามารถใช้ในการผลิตปรับ glyco รุ่นโปรตีนที่จะไม่ได้ผลิตตามธรรมชาติ เช่นแอนติบอดี CD20 เฉพาะด้วย pharmacokinetic ปรับปรุงคุณสมบัติที่ผลิต โดยใช้เทคโนโลยีเล็กซ์ทัวร์ที่เพิ่ง มาจาก Biolex Therapeutics Synthonแอนติบอดีนี้บ่งชี้สำหรับการรักษาไม่ใช่ฮอดจ์กิน และมีการความสัมพันธ์มากกว่า 10-fold ของตัวรับและตัว 20-fold มากกว่าแอนติบอดีขึ้นอยู่กับ mediated เซลล์cytotoxicity เปรียบเทียบกับสำเนาของ mammalian (30)โครงสร้างพืช glycan เสมอมีผลต่อการทำงานของโปรตีน recombinant ตัวอย่างที่เอชไอวี neutralizing แอนติบอดี 2G 12 ผลิตในพืชไม่เพียงมีศักยภาพเป็นคู่ผลิตใน mammalian เซลล์ (82, 83), และ glycoproteins มาโรงงานไม่ ก่อให้เกิดร้าย หรือแพ้ผลการตอบรับในมนุษย์แม้ว่าจัดการในหลายโอกาส (34)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การก่อตัวของโครงสร้างไกลแคน
ที่มีสารตกค้างแมนโนสเทอร์ช่วยให้โปรตีนที่จะกำหนดเป้าหมายพื้นผิวสรุปเฉพาะ
ผู้รับในแมคโครฟาจ (6) และในผลิตภัณฑ์ที่มีอัตราการกวาดล้างเพิ่มขึ้นจากเลือด
เป็นที่พึงปรารถนา (49) ขาด sialylation ยังเป็นประโยชน์สำหรับการผลิตที่ได้จากพืช
asialoerythropoietin (78).
Glycoengineering ได้รับความสำเร็จผ่านความหลากหลายของวิธีการรวมทั้งการชุมนุม
กลายพันธุ์หรือรวมตัวกันอีกคล้ายคลึงกันที่จะเคาะออกยีนที่ควบคุมการ glycosyltransferases ที่ไม่ต้องการ
การแทรกแซงอาร์เอ็นเอที่จะปราบปรามเดียวกัน เอนไซม์และการแสดงออกของยีนที่จะแนะนำ
glycosyltransferases heterologous ที่ฟอร์ม glycans เหมือนมนุษย์ (5) วิศวกรรม
ทางเดิน N-glycosylation ในพันธุ์พืชที่แตกต่างกันได้ประสบความสำเร็จดังนั้นการยกเลิกของβ (1,2) -linked
ไซโลและαหลัก (1,3) -linked ตกค้าง fucose (18, 52, 100, 109) และฟื้นฟูสมบูรณ์ ของ
ทางเดิน glycosylation เลี้ยงลูกด้วยนมในพืช (1, 9-12, 66, 76, 85, 110) ความเก่งกาจของวิธีการนี้
ได้รับอนุญาตให้การพัฒนาของ glycoforms ออกแบบเฉพาะผลิตภัณฑ์ในพืช (รูปที่ 2).
ตัวอย่างเช่นมันเป็นที่ยอมรับกันดีว่าฟังก์ชั่น Effector แอนติบอดีเช่นผูกพันกับγRIIIa Fc
รับจะถูกยับยั้งโดยตกค้าง fucose หลัก [ทั้งสอง แกนα (1,3) -linked ตกค้าง fucose พบ
ในพืชและแกนα (1,6) -linked ตกค้าง fucose พบได้ในสัตว์เลี้ยงลูกด้วย] และกรณีที่ไม่มี
สารตกค้างเหล่านี้ส่งเสริมแอนติบอดีขึ้นอยู่กับความเป็นพิษ cell-mediated (99, 110 ) ดังนั้น
glycoengineered พืชสามารถนำมาใช้ในการผลิตรุ่น Glyco ที่ดีที่สุดของโปรตีนที่จะ
ไม่ได้รับการผลิตตามธรรมชาติเช่นแอนติบอดี CD20 เฉพาะกับเภสัชจลนศาสตร์การปรับปรุง
คุณสมบัติผลิตโดย Synthon ใช้เทคโนโลยี LEX เมื่อเร็ว ๆ นี้ได้มาจากการ Biolex Therapeutics.
แอนติบอดีนี้จะแสดง สำหรับการรักษาโรคมะเร็งต่อมน้ำเหลืองไม่ Hodgkin และมี
10 เท่าสัมพันธ์ที่ใกล้ชิดมากขึ้นสำหรับการรับและ 20 เท่าแอนติบอดีขึ้นอยู่มากขึ้น cell-mediated
พิษเมื่อเทียบกับคู่เลี้ยงลูกด้วยนมของมัน (30).
พืชโครงสร้างไกลแคนไม่เคยส่งผลกระทบต่อ การทำงานของโปรตีน; ตัวอย่างเช่น
เอชไอวีแอนติบอดี neutralizing 2G12 ผลิตในโรงงานเป็นเพียงที่มีศักยภาพเป็นคู่
ที่ผลิตในเซลล์สัตว์ (82, 83) และไกลโคโปรตีนจากพืชที่ได้มาไม่ปรากฏที่จะทำให้เกิด
การตอบสนองที่ไม่พึงประสงค์หรือภูมิแพ้ในมนุษย์แม้ในขณะที่การบริหารงานหลายครั้ง (34)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การก่อตัวของไกลแคนโครงสร้าง
กับเทอร์มินัล mannose ตกค้างช่วยให้โปรตีนรีคอมบิแนนท์เพื่อเป้าหมายเฉพาะองค์ประกอบพื้นผิว
receptors ในแมโครเฟจ ( 6 ) และในผลิตภัณฑ์ที่เพิ่มขึ้นอัตราการกวาดล้างจากเลือด
ที่พึงประสงค์ ( 49 ) ขาด sialylation ยังเป็นประโยชน์สำหรับการผลิตของพืชซึ่ง asialoerythropoietin

( 78 )glycoengineering ได้ประสบผ่านความหลากหลายของวิธีการรวมทั้งการปกติ
หรือการเปรียบเทียบที่จะเคาะออกยีนเข้ารหัส glycosyltransferases ไม่พึงประสงค์
RNA รบกวนยับยั้งเอนไซม์เดียวกันและการแสดงออกยีนชนิดที่แนะนำ
glycosyltransferases มนุษย์เหมือน glycans ( 5 ) วิศวกรรมศาสตร์
n-glycosylation ทางเดินในพืชชนิดต่างๆจึงได้รับการยกเลิกของบีตา - ไซโล ( 1 , 2 ) เชื่อมโยง
และหลักα ( 1 , 3 ) - เชื่อมโยงฟิวโคสตกค้าง ( 18 , 52 , 100 , 109 ) และสมบูรณ์ฟื้นฟูวิถีเฉพาะ glycosylation
ในพืช ( 1 , 9 – 12 , 66 , 75 , 85 , 110 ) หลากหลายของวิธีการนี้
อนุญาตให้มีการ พัฒนาผลิตภัณฑ์ ออกแบบเฉพาะ glycoforms พืช
( รูปที่ 2 )ตัวอย่างเช่น มันก็ขึ้นว่า แอนติบอดี ( ฟังก์ชันเช่นผูกกับ เอฟซี γ riiia
ตัวรับจะถูกยับยั้งโดยตกค้างฟูโคสหลัก [ ทั้งหลักα ( 1 , 3 ) - เชื่อมโยงฟิวโคสที่พบตกค้างในพืชและหลักα
( 1,6 ) - เชื่อมโยงฟิวโคสที่พบตกค้างในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ] และที่ขาด
ตกค้างเหล่านี้ส่งเสริมภูมิคุ้มกันชนิดอาศัยเซลล์ ( cytotoxicity ( 99 , 110 ) โดย
glycoengineered พืชสามารถนำมาผลิตเป็นไกลโคโปรตีนซึ่งจะปรับรุ่น
ไม่สามารถผลิตได้เองตามธรรมชาติ เช่น cd20 เฉพาะแอนติบอดีด้วยการปรับปรุงคุณสมบัติทางเภสัชจลนศาสตร์
ผลิตโดยใช้เทคโนโลยี synthon เล็กซ์ เพิ่งได้มาจาก biolex ) .
แอนติบอดีนี้จะแสดงสำหรับการรักษาที่ไม่ใช่มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดฮอดจ์กินมี
10 เท่ามากกว่าความสัมพันธ์ของตัวรับและ 20 กว่าแอนติบอดีขึ้นพับ , การตรึงเซลล์เซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม
เมื่อเทียบกับคู่ ( 30 ) .
โครงสร้างไกลแคนต้นไม่เสมอส่งผลกระทบต่อการทำงานของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ ; ตัวอย่างเช่น
neutralizing แอนติบอดีเอชไอวี 2 ผลิตในพืชก็มีศักยภาพเป็น counterparts
ผลิต ในเขตเซลล์ ( 82 , 83 )ไกลโคโปรตีน และพืชซึ่งไม่ปรากฏทำให้เกิดภูมิแพ้การตอบสนองในมนุษย์
ทวน หรือแม้แต่เมื่อใช้ในโอกาสต่างๆ ( 34 )