Thin-layer chromatography
All chromatographic procedures emanate from the
Russian botanist Tswett (1906), who separated plant
pigments by pipetting solutions on to the top of packed
glass tubes. Tswett's work led to the development of
column chromatography and, under pressure, to
HPLC. Other workers used paper as a support, and
before the advent of HPLC paper chromatography
was used for simplicity and speed. TLC arose from a
need to satisfactorily separate lipids, which paper techniques
could not achieve, but it was soon realized that
the technique was also considerably more flexible.
Paper chromatography is limited by the cellulose
support, whereas the thin layer of material on a glass
plate can be prepared from a slurry of a wide variety of
different chemical types, e.g. silica gel, celite, alumina,
cellulose (analogous to paper chromatography) and
chemically modified celluloses; and more recently with
the advent of reversed-phase chromatography, C2, C8
and C18 silanized and diphenyl silica.
Modern TLC was established by Stahl (1956) and
separations were found to be considerably shorter than
on paper, spots were more compact, resolution better,
and submicrogram samples could be separated and
recovered if necessary (by scraping away the spot using
a fine spatula), re-extracted and injected on to HPLC.
TLC is now generally regarded as a reliable and
sensitive qualitative technique for the separation of
complex mixtures in stability samples. In a typical
analysis, extracted samples are spotted 20 mm from
the bottom of a square glass plate, 200 x 200 mm,
coated with a dry slurry of silica (250 jam thick) and
placed in a closed tank containing a 10 mm layer of
eluting solvent, which has produced a saturated
vapour phase. The sample is developed (separated)
by the capillary movement of the solvent up the plate
and is therefore similar to HPLC. It is a thin flat
column (stationary phase) with solvent (mobile
phase) pumped by capillary flux, and much of the
theory (Snyder 1968) is the same. Consequently,
TLC and HPLC are complementary. TLC will quantify
the number of components (as they can be seen)
and estimate their concentration by reference to standards
run concurrently, whereas HPLC can quantify
their level, confident that all have been separated. The
developing solvent for TLC (particularly HPTLC
(high-performance TLC) and reverse phase) is also a
useful guide to identify the mobile phase for HPLC.
High-performance liquid chromatography
High-performance (pressure) liquid chromatography
(HPLC) is essentially column chromatography
performed by eluting under pressure. By pumping
the eluting solvent (mobile phase) under a pressure of
up to 40 MPa (6000 psi) and a flow rate of up to
3 mL min"1, the column can be much smaller and use
much smaller particle size packing material (stationary
phase). This results in shorter retention times
(solute time on column), high sensitivity (typically
1 ng), the need for only a small sample volume
(0-50 )LiL) and yet high selectivity (separation power)
for the resolution of complex mixtures.
HPLC methods can be divided into two distinct
modes.
ชั้นบาง chromatography
ทุกกระบวน chromatographic emanate จาก
botanist รัสเซีย Tswett (1906), ที่คั่นโรงงาน
สี โดยโซลูชั่น pipetting ไปด้านบนของบรรจุ
แก้วหลอด ทำงานของ Tswett ที่นำไปสู่การพัฒนา
คอลัมน์ chromatography และ ความ ดัน การ
HPLC คนอื่นใช้กระดาษเป็นการสนับสนุน และ
ก่อนการมาถึงของ HPLC กระดาษ chromatography
ใช้สำหรับความเรียบง่ายและความเร็ว TLC เกิดจากเป็น
ต้องผ่านแยกโครงการ ซึ่งกระดาษเทคนิค
อาจไม่บรรลุ แต่ถูกรับรู้เร็วที่
ยังเป็นเทคนิคยืดหยุ่นมากขึ้น.
chromatography กระดาษถูกจำกัด ด้วยเซลลูโลส
สนับสนุน ในขณะที่บางชั้นของวัสดุบนแก้ว
จานสามารถเตรียมจากสารละลายของหลากหลาย
สารเคมีชนิดต่าง ๆ เช่นซิลิก้าเจล celite อลูมิ นา,
(คล้ายคลึงกับกระดาษ chromatography) เซลลูโลส และ
celluloses การปรับเปลี่ยนสารเคมี และเมื่อเร็ว ๆ นี้ด้วย
มายระยะกลับ chromatography, C2, C8
ก C18 silanized และฟีนิลไดซิลิก้า
TLC สมัยก่อตั้งขึ้น โดย Stahl (1956) และ
พบประโยชน์จะมากสั้นกว่า
ได้กระชับ บนกระดาษ จุด ความละเอียดที่ดีกว่า,
และสามารถแบ่งตัวอย่าง submicrogram และ
กู้ถ้าจำเป็น (โดย scraping ไปใช้จุด
พายดี), การสกัด และฉีดระบบ HPLC
TLC ตอนนี้โดยทั่วไปถือเป็นการน่าเชื่อถือ และ
สำคัญเชิงคุณภาพเทคนิคการแบ่งแยก
น้ำยาผสมที่ซับซ้อนในตัวอย่างมั่นคง ในการทั่วไป
การวิเคราะห์ ตัวอย่างแยกเป็นด่าง 20 มม.จาก
ด้านล่างของแผ่นสี่เหลี่ยมแก้ว 200 x 200 mm,
เคลือบ ด้วยสารละลายแห้งของซิลิก้า (250 ติดหนา) และ
วางในถังปิดที่ประกอบด้วยชั้น 10 มม.ของ
eluting ตัวทำละลาย ซึ่งมีผลิตที่อิ่มตัว
ไอระยะ ตัวอย่างคือพัฒนา (แยก)
โดยย้ายรูพรุนของตัวทำละลายค่าจาน
จึงคล้ายกับ HPLC จะแบนบาง
คอลัมน์ (ระยะเครื่องเขียน) กับตัวทำละลาย (โมบาย
ระยะ) สูบ โดยเส้นเลือดฝอยไหล และมากการ
ทฤษฎี (Snyder 1968) จะเหมือนกัน ดังนั้น,
TLC และ HPLC จะเสริม TLC จะกำหนดปริมาณ
จำนวนส่วนประกอบ (ตามที่พวกเขาสามารถดูได้)
และประเมินความเข้มข้นของ โดยอ้างอิงมาตรฐาน
รันพร้อม โดย HPLC สามารถกำหนดปริมาณ
ระดับ มั่นใจว่า ทั้งหมดมีการแยก
พัฒนาตัวทำละลายสำหรับ TLC (HPTLC อย่างยิ่ง
(TLC ประสิทธิภาพสูง) และกลับเฟส) ก็เป็น
แนะนำประโยชน์ให้ระบุเฟสเคลื่อนที่สำหรับ HPLC
chromatography เหลวประสิทธิภาพสูง
chromatography
(HPLC) เหลวประสิทธิภาพสูง (แรงดัน) จะเป็นคอลัมน์ chromatography
โดย eluting ภายใต้ความดัน โดยสูบ
ผสมมี eluting (ระยะเคลื่อน) ภายใต้แรงกดดันของ
ถึง 40 แรง (6000 psi) และอัตราการไหลของถึง
3 mL นาที " 1 คอลัมน์สามารถมีขนาดเล็กมาก และใช้
ขนาดอนุภาคขนาดเล็กมากบรรจุภัณฑ์ (เครื่องเขียน
ระยะ) นี้ผลในเวลาเก็บรักษาสั้น
(solute เวลาคอลัมน์), ความไวสูง (โดยทั่วไป
1 ng), ต้องการไดรฟ์ข้อมูลตัวอย่างขนาดเล็กเท่า
(0-50) LiL) และยังสูงใว (ไฟแยก)
กับความละเอียดของส่วนผสมที่ซับซ้อน
HPLC วิธีสามารถแบ่งออกเป็นสองหมด
โหมดได้
การแปล กรุณารอสักครู่..

chromatography บางชั้น
ขั้นตอน chromatographic ทั้งหมดออกมาจาก
รัสเซียนักพฤกษศาสตร์ tswett ( 1906 )ที่แยกจากกันโดยโรงงาน
ต่อเนื่อง( By - product ) pipetting โซลูชันที่ไปที่ด้านบนของท่อดูดมา
แก้ว. งานของ tswett นำไปสู่การพัฒนาของ chromatography
ซึ่งจะช่วยคอลัมน์และอยู่ ภายใต้ ความกดดันในการ
hplc. คนงานคนอื่นใช้กระดาษเป็นการสนับสนุนและ
ก่อนการมาถึงของกระดาษ hplc chromatography
chromatography บางชั้น
ขั้นตอน chromatographic ทั้งหมดออกมาจาก
รัสเซียนักพฤกษศาสตร์ tswett ( 1906 )ที่แยกจากกันโดยโรงงาน
ต่อเนื่อง( By - product ) pipetting โซลูชันที่ไปที่ด้านบนของท่อดูดมา
แก้ว. งานของ tswett นำไปสู่การพัฒนาของ chromatography
ซึ่งจะช่วยคอลัมน์และอยู่ ภายใต้ ความกดดันในการ
hplc. คนงานคนอื่นใช้กระดาษเป็นการสนับสนุนและ
ก่อนการมาถึงของกระดาษ hplc chromatography
ใช้สำหรับความเร็วและความเรียบง่าย tlc ก็ลุกขึ้นจาก
ซึ่งจะช่วยให้เกิดการแยกออกจากกันอยู่ในเกณฑ์ดีไขมันซึ่งเทคนิคกระดาษ
ไม่ได้แต่ก็รู้สึกว่า
ซึ่งจะช่วยเทคนิคที่เป็นอย่างมากนอกจากนั้นยังมีความยืดหยุ่นมากขึ้น. chromatography
กระดาษมีจำกัด(มหาชน)โดยการสนับสนุนเซลลูโลส
ซึ่งจะช่วยได้ในขณะที่บางของวัสดุที่ทำจากกระจก
แผ่นที่สามารถจัดเตรียมจากสารละลายที่มีความหลากหลายของ
ไม่ช้าไม่นานสารเคมี ประเภท แตกต่างกันไปเช่นซิลิกาเจล, celite ,ดินสอพอง,
เซลลูโลส(คล้ายคลึงกันกับกระดาษ chromatography )และ
ซึ่งจะช่วยแก้ไขเคมี celluloses ;และเมื่อไม่นานมานี้พร้อมด้วย
ซึ่งจะช่วยให้การกำเนิดของสลับเฟส chromatography , c2 , c 8
และ C 18 silanized และเนดเต็ดไซิลิกา.
ที่ทันสมัย tlc ได้ถูกสร้างขึ้นโดย stahl ( 1956 )และ
ค้าปลีกก็พบว่ามีมากน้อยกว่า
บนกระดาษ,จุดก็มีมากขนาดกะทัดรัดด้านล่างของแผ่นกระจกขนาด 200 x 200 มม.
เคลือบด้วยสารละลายแห้งของซิลิกา( 250 แยมหนา)และ
ซึ่งจะช่วยจัดวางอยู่ในแท้งค์น้ำปิดที่ประกอบด้วยชั้น 10 มม.ของตัวทำละลาย
eluting ซึ่งขั้นตอน
Vapor ถึงจุดอิ่มตัวแล้ว ตัวอย่างที่มีการพัฒนา(แยกจากกัน)
โดยการเคลื่อนไหวซึ่งมีรูเล็กของตัวทำละลายขึ้นแผ่นที่
ซึ่งจะช่วยได้ดังนั้นจึงเหมือนกับ hplc. โรงแรมคือแบบจอแบนบาง
ตามมาตรฐานความละเอียดดี
และ submicrogram ตัวอย่างไม่สามารถจะแยกออกจากกันและ
ซึ่งจะช่วยฟื้นตัวหากจำเป็น(โดยขูดออกไปจุดให้บริการโดยใช้ไม้พายชั้นดี
)อีกครั้งและถูกแยกออกมาแบบฉีดขึ้นรูปที่ hplc .
tlc โดยทั่วไปแล้วจะถือว่าเป็นเทคนิคในเชิง คุณภาพ และเชื่อถือได้
ที่สำคัญสำหรับการแยกส่วนผสม
ซึ่งจะช่วยในการทรงตัวแล้วตัวอย่าง
ซึ่งจะช่วยในการวิเคราะห์ตัวอย่างถูกแยกออกมาเป็นลายจุด 20 มม.จาก
ตามมาตรฐานคอลัมน์(เฟสหยุดนิ่งอยู่กับที่)พร้อมด้วยตัวทำละลาย(มือถือ
)สูบน้ำโดย Flux ซึ่งมีรูเล็กและอื่นๆอีกมากมายของ
ทฤษฎี(ฉนวน 1968 )เป็นเหมือนกับที่ ดังนั้นจึงมีผลทำให้ผล
tlc และ hplc ได้รับของสมนาคุณ tlc จะ volatility )หมายเลข
ของส่วนประกอบทั้งหมด(ที่พวกเขาสามารถที่จะได้เห็น)
และประมาณการรวมกลุ่มของพวกเขาโดยการอ้างอิงมาตรฐาน
รันประกอบในขณะที่ hplc สามารถ volatility )
ระดับของพวกเขามั่นใจว่าทั้งหมดมีการแยกจากกัน
ซึ่งจะช่วยให้การพัฒนาตัวทำละลายสำหรับ tlc (โดยเฉพาะ hptlc
( ประสิทธิภาพ สูง tlc )และย้อนกลับ)ก็ยังเป็นคู่มือ
มีประโยชน์ในการระบุโมบายล์ขั้นตอนสำหรับ hplc .
ประสิทธิภาพ สูงผสมน้ำยาทำความสะอาด chromatography
ประสิทธิภาพ สูง(ความดัน)ผสมน้ำยาทำความสะอาด chromatography
( hplc )จำเป็นต้องมีคอลัมน์ chromatography
ซึ่งจะช่วยดำเนินการโดย eluting ภายใต้ ความกดดัน. โดยการปั๊ม
eluting ที่ตัวทำละลาย(เฟส) ภายใต้ แรงกดดันของ
ตามมาตรฐานได้ถึง 40 MPA ( 6000 PSI )และอัตราการไหลของน้ำในการรองรับผู้ใช้บริการได้ถึง
3 มล.นาที" 1 คอลัมน์ที่สามารถมีขนาดเล็กมากและใช้วัสดุเชื่อมต่อในการบรรจุขนาด อนุภาค
มีขนาดเล็กมาก(เฟสหยุดนิ่งอยู่กับที่เป็น
) โรงแรมแห่งนี้ได้ผลในช่วงเวลาการยึดสั้นลง
(เวลา solute ในคอลัมน์)ความไวแสงสูง(โดยปกติจะ
1 NG )ต้องการเพียงอย่างเดียวที่ระดับเสียงตัวอย่างขนาดเล็ก
( 0-50 )น้อย)และยังมีสูงตัวเลือก(การแยก)
สำหรับความละเอียดที่มีส่วนผสมของคอมเพล็กซ์
การแปล กรุณารอสักครู่..
