Standard BRET systems consist of a

Standard BRET systems consist of a luciferase, which in the presence of its bioluminogenic substrate, acts as a resonance energy donor, and a fluorescent protein, which is the resonance energy acceptor. To successfully translate a BRET assay from cell culture to living subjects, it is critical that the BRET system is characterized by efficient energy transfer, excellent spectral resolution, a BRET donor with high bioluminescence quantum yield, and a red light-emitting BRET acceptor. Current BRET systems emit light mostly in the green to yellow region of the visible spectrum (510–570 nm), rendering them suboptimal for imaging in living subjects. Examples of such systems include BRET1 (16) and BRET2 (17), which consist of the donor Renilla reniformis luciferase [RLuc; λem = 480 nm for coelenterazine (CLZ) and λem = 395 nm for DeepBlueC] paired with either YFP (λex/λem = 514/530 nm) or GFP (λex/λem = 400/510 nm), respectively. Firefly luciferase (λem = 565 nm) combined with the red fluorescent protein (RFP) DsRed (λex/λem = 558/583 nm) provides a red-shifted signal; however, this system lacks sensitivity and spectral resolution (18, 19).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ระบบเบรตมาตรฐานประกอบด้วย luciferase ซึ่งในต่อหน้าของพื้นผิวของ bioluminogenic เป็นผู้บริจาคเป็นพลังงานการสั่นพ้อง และมีโปรตีนเรืองแสง ที่ acceptor พลังงานการสั่นพ้อง แปลวิเคราะห์เบรตจากเซลล์วัฒนธรรมเพื่อชีวิตเรื่องเรียบร้อยแล้ว มันเป็นสิ่งสำคัญที่เป็นลักษณะระบบเบรต โดยโอนย้ายพลังงานที่มีประสิทธิภาพ ความละเอียดสเปกตรัมแห่ง เบรตผู้บริจาค มีผลผลิตสูง bioluminescence ควอนตัม เบรต acceptor เปล่งแสงสีแดง ระบบเบรตปัจจุบันฉายส่วนใหญ่ในภูมิภาคของสเปกตรัมมองเห็น (510-570 nm), สีเหลืองแสดงสภาพในภาพในเรื่องนั่งเล่น ตัวอย่างของระบบเช่น BRET1 (16) และ BRET2 (17), ซึ่งประกอบด้วยผู้บริจาค Renilla reniformis luciferase [RLuc; λem = 480 nm สำหรับ coelenterazine (CLZ) และ λem = 395 nm สำหรับ DeepBlueC] จับคู่กับ YFP อย่างใดอย่างหนึ่ง (λex/λem = 514/530 nm) หรือ GFP (λex/λem = 400/510 nm), ตามลำดับ Luciferase หิ่งห้อย (λem = 565 nm) รวมกับโปรตีนเรืองแสงสีแดง (RFP) DsRed (λex/λem = 558/583 nm) ให้สัญญาณการเปลี่ยนสีแดง อย่างไรก็ตาม ระบบนี้ขาดความไวและความละเอียดสเปกตรัม (18, 19)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ระบบ BRET มาตรฐานประกอบด้วย luciferase ซึ่งในการปรากฏตัวของพื้นผิว bioluminogenic ของตนทำหน้าที่เป็นผู้บริจาคด้วยคลื่นพลังงานและโปรตีนเรืองแสงซึ่งเป็นตัวรับพลังงานเสียงสะท้อน ประสบความสำเร็จในการทดสอบแปล BRET จากการเพาะเลี้ยงเซลล์ให้กับอาสาสมัครที่อาศัยอยู่ก็เป็นสิ่งสำคัญที่ระบบ BRET เป็นลักษณะการถ่ายโอนพลังงานที่มีประสิทธิภาพความละเอียดสเปกตรัมที่ยอดเยี่ยมของผู้บริจาค BRET ควอนตัมกับผลผลิตชีวิตเรืองแสงสูงและสีแดงเปล่งแสงใบเสร็จ BRET ระบบ BRET ปัจจุบันเปล่งแสงสีเขียวส่วนใหญ่ในภูมิภาคเหลืองของสเปกตรัมที่มองเห็น (510-570 นาโนเมตร), การแสดงผลให้พวกเขาก่อให้เกิดผลลัพธ์สำหรับการถ่ายภาพในวิชาที่อยู่อาศัย ตัวอย่างของระบบดังกล่าวรวมถึง BRET1 (16) และ BRET2 (17) ซึ่งประกอบด้วยผู้บริจาค Renilla reniformis luciferase [RLuc; λem = 480 นาโนเมตรสำหรับ coelenterazine (CLZ) และλem = 395 นาโนเมตรสำหรับ DeepBlueC] จับคู่กับทั้ง YFP (λex / λem = 514/530 นาโนเมตร) หรือ GFP (λex / λem = 400/510 นาโนเมตร) ตามลำดับ หิ่งห้อย luciferase (λem = 565 นาโนเมตร) รวมกับโปรตีนเรืองแสงสีแดง (RFP) DsRed (λex / λem = 558/583 นาโนเมตร) ให้สัญญาณสีแดงขยับ; แต่ระบบนี้ขาดความไวและความละเอียดสเปกตรัม (18, 19)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ระบบเบรตมาตรฐานประกอบด้วยเอนไซม์ลูซิเฟอเรส ซึ่งในการปรากฏตัวของ bioluminogenic พื้นผิว , ทำหน้าที่เป็นเสียงสะท้อนจากพลังงาน และโปรตีนเรืองแสงซึ่งเป็นพลังงานเรโซแนนซ์พระนาสิก . แปลว่าสําเร็จ Bret เจริญชีวิตคน มันเป็น อันตราย ระบบเบรต เป็นลักษณะการถ่ายโอนพลังงานอย่างมีประสิทธิภาพ ความละเอียด เงาที่ยอดเยี่ยมเป็นเบร็ทผู้บริจาคที่มีผลผลิตควอนตัมไบโอลูมิเนสเซนต์สูง และสีแดงแสงเปล่ง Bret พระนาสิก . ปัจจุบันระบบเบรตเปล่งแสงส่วนใหญ่อยู่ในเขตสีเขียวสีเหลืองของสเปกตรัมที่มองเห็น ( 510 ) 570 nm ) , การแสดงผลพวกเขา suboptimal สำหรับการถ่ายภาพในชีวิตคน ตัวอย่างของระบบดังกล่าว รวมถึง bret1 ( 16 ) และ bret2 ( 17 ) ซึ่งประกอบด้วยผู้บริจาค renilla reniformis ลูซิเฟอเรส [ rluc ;λ em = 480 nm สำหรับ coelenterazine ( clz ) และλ em = 395 nm สำหรับ deepbluec ] จับคู่กับ yfp ( λแฟนเก่า / λ em = 514 / 530 nm ) หรือ GFP ( λแฟนเก่า / λ em = 400 / 510 nm ) ตามลำดับ หิ่งห้อย ลูซิเฟอเรส ( λ em = 810 nm ) รวมกับโปรตีนเรืองแสงสีแดง ( RFP ) dsred ( λแฟนเก่า / λ em = 558 / 522 nm ) มีสีแดงเปลี่ยนสัญญาณ อย่างไรก็ตาม ระบบนี้ยังขาดความไวสเปกตรัมความละเอียด ( 18 , 19 )