Intergeneric conjugation procedure

Intergeneric conjugation procedure Streptomyces rimosus R7 and M4018 spores (104) were suspended in 500 ll of 2 · YT medium and treated at a range of temperatures from room temperature (nonheated spores) to 55C for 10 min. The donor strain, E. coli ET12567 (pUZ8002 ⁄ pIJ8600), was grown in LB until anOD600 of 0Æ4–0Æ6. The cells were washed twice with LB and resuspended in a final volume of 500 ll of LB (108 cells). Equal volumes of E. coli cells and the S. rimosus
spore suspension were mixed and spread on MS, ISP 4 and TSA (Oxoid) containing 10 m mol l)1 MgCl2, and incubated at 30C for 16–20 h. The plates were flooded with 1 ml water containing nalidixic acid (500 lg ml)1)
and thiostrepton (1000 lg ml)1and incubated furtherfor 5–7 days. For conjugation with mycelia, S. rimosus was grown in 50 ml TSB (in which it grows in a very

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ลูกผันกระบวน Streptomyces rimosus R7 และ M4018 สปอร์ (104) ถูกหยุดชั่วคราวใน 500 ll ของ 2 · YT กลาง และรับการรักษาในช่วงอุณหภูมิตั้งแต่อุณหภูมิห้อง (สปอร์ nonheated) ถึง 55C 10 นาที สายพันธุ์ผู้บริจาค อีโคไล ET12567 (pIJ8600 pUZ8002 เวป), ถูกปลูกปอนด์จนถึง anOD600 ของ 0Æ4 – 0Æ6 ล้างสองครั้ง ด้วยปอนด์ และ resuspended ในไดรฟ์ข้อมูลสุดท้าย 500 เซลล์ ll ของปอนด์ (108 เซลล์) เท่ากับวอลุ่ม S. rimosus E. coli และช่วงล่างสปอร์ถูกผสม และ spread บน MS, ISP 4 และ TSA (Oxoid) ที่ประกอบด้วย 10 m mol l) 1 MgCl2 และรับการกก 30 c เป็นเวลา 16-20 ชม. แผ่นจะถูกน้ำท่วมน้ำ 1 ml ประกอบด้วยกรดนาลิดิซิก (lg 500 ml) 1)และ 1 และ thiostrepton (1000 lg ml) ได้รับการกก furtherfor 5 – 7 วัน สำหรับผันกับ mycelia, S. rimosus ถูกปลูกใน TSB 50 มล. (ในที่ที่จะเติบโตในตัวมาก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผัน intergeneric ขั้นตอน Streptomyces rimosus R7 และ M4018 สปอร์ (104) ถูกระงับใน 500 LL 2 · YT กลางและรับการรักษาที่หลากหลายของอุณหภูมิจากอุณหภูมิห้อง (สปอร์ nonheated) เพื่อ 55C เป็นเวลา 10 นาที ความเครียดของผู้บริจาคเชื้อ E. coli ET12567 (pUZ8002 / pIJ8600) ถูกปลูกใน LB จนกว่า anOD600 ของ0Æ4-0Æ6 เซลล์ที่ถูกล้างครั้งที่สองกับ LB และ resuspended ในปริมาณสุดท้ายของ 500 LL ของปอนด์ (108 เซลล์) ปริมาณที่เท่ากันของ E. coli เซลล์และ S. rimosus
สปอร์ระงับการผสมและการแพร่กระจายบน MS, ISP ที่ 4 และ TSA (Oxoid) ที่มี 10 เมตร mol L) 1 MgCl2 และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสสำหรับ 16-20 ชั่วโมง แผ่นที่ถูกน้ำท่วมด้วย 1 มิลลิลิตรน้ำที่มีกรด nalidixic (500 มล. LG) 1)
และ thiostrepton (1000 LG มล.) 1 และบ่ม furtherfor 5-7 วัน สำหรับการเชื่อมต่อกันด้วยเส้นใย, S. rimosus ถูกปลูกใน 50 มล TSB (ซึ่งมันเติบโตในมาก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ขั้นตอนการ rimosus intergeneric Streptomyces r7 m4018 ( 104 ) และสปอร์แขวนลอยใน 500 จะ 2 ด้วย YT ขนาดกลาง และปฏิบัติที่ช่วงอุณหภูมิตั้งแต่อุณหภูมิห้อง ( สูงสปอร์ ) 55c 10 นาทีจากความเครียด , E . coli et12567 ( puz8002 ⁄ pij8600 ) ปลูกในปอนด์จนถึง anod600 0 กู้ 4 กู้– 0 6 เซลล์ก็ล้างสองครั้งกับปอนด์และ resuspended ในเล่มสุดท้ายของ 500 จะปอนด์ ( 108 เซลล์ ) ปริมาณเท่ากันของ E . coli เซลล์และ rimosus Sช่วงล่างสปอร์ถูกผสมและการแพร่กระจายบน MS , ISP และ TSA ( oxoid ) ประกอบด้วย 10 m mol L ) 1 ชุด และบ่มที่อุณหภูมิ 30C 16 – 20 ชั่วโมง จานเต็มไปด้วย 1 ml น้ำที่มีสะพานกรุงธน ( 500 LG มล. ) 1 )และ thiostrepton ( 1000 LG มิลลิลิตร ) และบ่ม furtherfor 5 – 7 วัน สำหรับการรวมกันกับเส้นใย เอส rimosus ปลูกใน TSB 50 ml ( ซึ่งมันจะเติบโตในมาก