2. Materials and methods2.1. Microb

2. Materials and methods

2.1. Microbial cultures

The recall-associated M. circinelloides strain isolated from spoiled yogurt and two clinical isolates were generously provided by the Joseph Heitman at Duke University (Durham, NC).

M. circinelloides strains NRRL 3615, 3614, and 3627 were obtained from USDA's Agricultural Research Service collection (Table 1).

All isolates were maintained as frozen stock cultures and plated on Potato Dextrose Agaracidified to pH 3.5 prior to use in experiments.

Inoculum was prepared by scraping plates which had been incubated at 25 °C for 48 h and re-suspending the hyphae / sporangiospores in peptone water or skim milk, depending on the experiment.

Yeast-like cells used to generate thermal destruction data were prepared by streaking M. circinelloides onto acidified PDA.

Plates were incubated at 25 °C for at least 48 h in a GasPack anaerobic jar.

Typical colony and cellular morphology was observed following incubation.

Following extraction from GasPack anaerobic jars, yeast-like cells were immediately used for thermal destruction experiments.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. จุลินทรีย์วัฒนธรรมม. เกี่ยวข้องเรียกคืน circinelloides สายพันธุ์แยกได้จากโยเกิร์ตบูด และสองทางคลินิกแยกกว้างได้จาก Heitman โจเซฟที่มหาวิทยาลัยดุ๊ก (Durham, NC) สายพันธุ์ circinelloides M. NRRL 3615, 3614 และ 3627 ได้รับจาก USDA ของเกษตรวิจัยบริการ (ตารางที่ 1)แยกทั้งหมดถูกเก็บรักษาไว้เป็นวัฒนธรรมสินค้าแช่แข็ง และชุบบนมันฝรั่งเดกซ์โทรส Agaracidified ค่า pH 3.5 ก่อนเพื่อใช้ในการทดลอง ถูกเตรียม inoculum โดยขูดแผ่นซึ่งก็ได้รับการกกที่ 25 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง และการระงับ hyphae / sporangiospores ใน peptone น้ำ หรือนม ขึ้นอยู่กับการทดลองคร่าว ๆใช้ในการสร้างข้อมูลความร้อนทำลายเซลล์ยีสต์เหมือนถูกเตรียม โดยหลาก M. circinelloides ลงบน PDA กรด แผ่นได้รับการกกที่ 25 ° C สำหรับโหล GasPack ไม่ใช้ออกซิเจนอย่างน้อย 48 ชั่วโมง อาณานิคมทั่วไปและสัณฐานวิทยาของเซลล์เป็นที่สังเกตต่อไปนี้การกกไข่ ไปดูดจากขวดที่ไม่ใช้ออกซิเจน GasPack เซลล์ยีสต์เหมือนทันทีใช้สำหรับการทดลองความร้อนทำลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ

2.1 วัฒนธรรมจุลินทรีย์

จำที่เกี่ยวข้องเมตร circinelloides สายพันธุ์ที่แยกได้จากโยเกิร์ตบูดและสองสายพันธุ์ทางคลินิกได้ให้เห็นแก่ตัวโดยโจเซฟ Heitman ที่มหาวิทยาลัยดุ๊ก (Durham, NC).

เอ็ม circinelloides สายพันธุ์ NRRL 3615, 3614 และ 3627 ที่ได้รับจากการเก็บรวบรวมการวิจัยการบริการทางการเกษตรของ USDA (ตารางที่ 1).

ไอโซเลททั้งหมดได้รับการดูแลเป็นวัฒนธรรมหุ้นแช่แข็งและชุบ potato dextrose Agaracidified ค่าพีเอช 3.5 ก่อนที่จะใช้ในการทดลอง.

เชื้อได้รับการจัดทำขึ้นโดยขูด แผ่นซึ่งได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงและอีกครั้งระงับ hyphae / การปอร์เปปโตนในน้ำหรือนมพร่องมันเนยขึ้นอยู่กับการทดลอง.

เซลล์ยีสต์เช่นใช้ในการสร้างความร้อนทำลายข้อมูลที่ถูกจัดทำโดยพุ่ง circinelloides เมตรบน กรด PDA.

แผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลาอย่างน้อย 48 ชั่วโมงในขวดแบบไม่ใช้ออกซิเจน GasPack.

อาณานิคมทั่วไปและสัณฐานวิทยาโทรศัพท์มือถือเป็นข้อสังเกตดังต่อไปนี้การบ่ม.

หลังจากที่สกัดจากขวดแบบไม่ใช้ออกซิเจน GasPack เซลล์ยีสต์เหมือนถูกนำมาใช้ทันทีสำหรับการทดลองการทำลายความร้อน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ2.1 . เชื้อจุลินทรีย์เรียกคืนที่เกี่ยวข้องม. circinelloides สายพันธุ์ที่แยกได้จากโยเกิร์ตบูด 2 ไอโซเลทและคลินิกอย่างไม่เห็นแก่ตัวโดยโจเซฟไฮต์เมิ่นที่มหาวิทยาลัยดุ๊ก ( Durham , NC )เมตร circinelloides สายพันธุ์ NRRL 3615 เอเซีย และ 3627 , ความเข้มข้นของ USDA เกษตรวิจัยบริการคอลเลกชัน ( ตารางที่ 1 )ทุกสายพันธุ์เป็นยังคงเป็นหุ้นวัฒนธรรมแช่แข็ง และชุบบนอาหาร Potato Dextrose agaracidified pH 3.5 ก่อนเพื่อใช้ในการทดลองโดยเตรียมขูดแผ่นซึ่งมีอุณหภูมิ 25 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง และจะระงับ / sporangiospores extract ) ในน้ำหรือนมไขมันต่ำ ขึ้นอยู่กับการทดลองเซลล์ยีสต์ เช่น ที่ใช้ในการสร้างความร้อนทำลายข้อมูล เตรียมปรับ streaking ม. circinelloides บน PDAแผ่นอุณหภูมิ 25 ° C เป็นเวลาอย่างน้อย 48 ชั่วโมงใน gaspack anaerobic jar .กลุ่มทั่วไปและลักษณะรูปร่างของเซลล์พบว่าต่อไปนี้การบ่มต่อไปนี้ gaspack ถังสกัดจากยีสต์ เช่น โอ่ง เซลล์ก็ใช้งานได้ทันที เพื่อทำลายสภาวะการทดลอง