Histone deacetylase inhibitors have shown promise as antitumor
agents and naturally this has stimulated interest in the
screening of compounds for HDAC inhibition. Unfortunately,
the standard techniques for HDAC assay are cumbersome.
Use of [3H]acetyl-histone or [3H]acetyl-histone peptides as
substrates involves an acid/ethyl acetate extraction step prior to
scintillation counting. Unlabeled, acetylated histone
peptides have been used as substrates, but reactions then
require resolution by HPLC. Enzo Life Science’s HDAC
Fluorescent Activity Assay/Drug Discovery Kit addresses these
problems by providing an assay that can be carried out in two
simple mixing steps, all on the same 96-well plate (Fig. 1). It
has been used successfully with preparations of all class I
HDACs-HDAC1, HDAC2, HDAC3 and HDAC8 (Figs. 6 & 7,
Refs. 26, 27) - with class II HDACs 6, 9 and 10 and with
yeast Sir2 and its human homolog, SIRT1 (see also Fig. 8).
ยับยั้งสโตน deacetylase ได้แสดงให้เห็นว่าสัญญาต้าน
ตัวแทนและเป็นธรรมชาตินี้ได้กระตุ้นความสนใจใน
การคัดกรองของสารยับยั้ง HDAC แต่น่าเสียดายที่
เทคนิคมาตรฐานสำหรับการทดสอบ HDAC จะยุ่งยาก.
ใช้ [3H] acetyl-สโตนหรือ [3H] เปปไทด์ acetyl-สโตนเป็น
พื้นผิวที่เกี่ยวข้องกับกรด / เอทิลอะซิเตขั้นตอนการสกัดก่อนที่จะมี
การนับประกาย Unlabeled, สโตน acetylated
เปปไทด์ที่ได้รับการใช้เป็นพื้นผิว แต่ปฏิกิริยาจากนั้น
ต้องใช้ความละเอียดโดย HPLC Enzo วิทยาศาสตร์ชีวภาพของ HDAC
Fluorescent Assay กิจกรรม / การค้นพบยาเสพติดที่อยู่ในชุดเหล่านี้
ปัญหาโดยการให้การทดสอบว่าสามารถดำเนินการได้ในสอง
ขั้นตอนการผสมง่ายทั้งหมดบนแผ่น 96 หลุมเดียวกัน (รูปที่ 1). มัน
ถูกนำมาใช้ประสบความสำเร็จกับการเตรียมความพร้อมของการเรียนทั้งหมดที่ฉัน
HDACs-HDAC1, HDAC2, HDAC3 และ HDAC8 (มะเดื่อ 6 & 7.
Refs 26, 27.) - กับชั้นที่สอง HDACs 6, 9 และ 10 และ
ยีสต์ Sir2 และมนุษย์ homolog, SIRT1 (ดูรูปที่. 8)
การแปล กรุณารอสักครู่..