Three steps in vitro enzymatic digestion technique (Boisen and
Fernandez, 1997) was used to determine the apparent total tract
digestibility of DM and GE in swine. Briefly, 1 g of sample was
weighed in a 250 mL conical flask. Then, 50 mL of phosphate buffer
solution 1 (0.1 mol/L, pH 6.0) was added to the flask followed by
20 mL of HCl solution (0.2 mol/L). The pH was adjusted to 2.0 by
mixing with 1 mol/L HCl or 1 mol/L NaOH. One milliliter of chloramphenicol
(Sigma C-0378, SigmaeAldrich Corp., St. Louis, MO,
USA) solution was added to prevent bacterial growth, which might
take place during hydrolysis. Two milliliter of freshly prepared
pepsin (Sigma P-0609, 800e2,500 units/mg, SigmaeAldrich Corp.,
St. Louis, MO, USA) solution was added to the flask. The pepsin solution
was made by mixing 0.75 g of pepsin to 30 mL of ultra-pure
water. The flask was then closed with a rubber stopper and incubated
in awater bath at 39C under gentle agitation (50 rpm) for 2 h.
The 20 mL phosphate buffer solution 2 (0.2 mol/L, pH 6.8) and
10 mL of 0.6 mol/L NaOH was then added to the solution in the
flask. The pH was adjusted to 6.8 with 1 mol/L HCl or 1 mol/L NaOH.
Six milliliter of fresh pancreatin solution, made by mixing 3 g of
pancreatin (Sigma P-1750, SigmaeAldrich Corp., St. Louis, MO, USA)
to 90 mL of ultrapure water, was added, and hydrolysis was
continued under the same conditions for 4 h.
สามขั้นตอนในเทคนิคเอนไซม์ย่อยอาหารหลอดทดลอง (Boisen และ
เฟิร์น? andez, 1997) ถูกใช้ในการตรวจสอบที่ชัดเจนรวมระบบทางเดิน
ย่อยได้ของ DM และจีอีในสุกร สั้น ๆ 1 กรัมของกลุ่มตัวอย่างได้รับการ
ชั่งน้ำหนักใน 250 มิลลิลิตรขวดรูปกรวย จากนั้น 50 มลของฟอสเฟตบัฟเฟอร์
โซลูชันที่ 1 (0.1 โมล / ลิตรค่า pH 6.0) ถูกบันทึกอยู่ในขวดตามด้วย
20 มลของการแก้ปัญหา HCl (0.2 โมล / ลิตร) ค่าพีเอชได้รับการปรับให้ 2.0 โดย
ผสมกับ 1 mol / L HCl หรือ 1 mol / L NaOH หนึ่งมิลลิลิตร chloramphenicol
(Sigma C-0378, SigmaeAldrich คอร์ป, St. Louis, MO,
USA) แก้ปัญหาที่ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อป้องกันการเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่อาจ
เกิดขึ้นระหว่างการย่อยสลาย สองมิลลิลิตรปรุงสดใหม่
น้ำย่อย (ซิกม่า P-0609, 800e2,500 / หน่วยมิลลิกรัม SigmaeAldrich คอร์ป,
St. Louis, มิสซูรี, สหรัฐอเมริกา) แก้ปัญหาที่ถูกเพิ่มเข้าไปในขวด วิธีการแก้ปัญหาน้ำย่อย
ที่ถูกสร้างขึ้นโดยการผสม 0.75 กรัมของเปปซิน 30 มลบริสุทธิ์
น้ำ ขวดจากนั้นก็ปิดด้วยจุกยางและบ่ม
ในห้องอาบน้ำ awater ที่ 39 องศาเซลเซียสภายใต้การกวนอ่อนโยน (50 รอบต่อนาที) สำหรับ 2 ชม.
20 มลแก้ปัญหาฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 2 (0.2 โมล / ลิตรค่า pH 6.8) และ
10 มล 0.6 mol / L NaOH ถูกเพิ่มเข้ามาแล้วเพื่อแก้ปัญหาในที่
ขวด ค่าพีเอชได้รับการปรับให้ 6.8 1 mol / L HCl หรือ 1 mol / L NaOH.
หกมิลลิลิตรของการแก้ปัญหา Pancreatin สดทำโดยการผสม 3 กรัมของ
Pancreatin (ซิกม่า P-1750 SigmaeAldrich คอร์ป, เซนต์หลุยส์, MO, USA )
90 มิลลิลิตรของน้ำบริสุทธิ์ได้รับการเพิ่มและการย่อยสลายได้รับ
อย่างต่อเนื่องภายใต้เงื่อนไขเดียวกันสำหรับ 4 ชั่วโมง
การแปล กรุณารอสักครู่..

สามขั้นตอนในการใช้เอนไซม์ย่อยอาหารและเทคนิค ( บอยเซิ่นFernandez , 1997 ) ถูกใช้เพื่อตรวจสอบระบบทั้งหมด ปรากฏการย่อยได้ของ DM และ GE ในสุกร สั้น 1 กรัมของตัวอย่างหนักใน 250 ml ขวดกรวย . แล้ว 50 มิลลิลิตร ฟอสเฟตบัฟเฟอร์โซลูชั่นที่ 1 ( 0.1 โมลต่อลิตรที่พีเอช 6.0 ) ถูกเพิ่มลงในขวด ตามด้วย20 ml ของกรดไฮโดรคลอริก ( 0.2 mol / l ) ปรับ pH 2.0 โดยผสมกับลิตร NaOH HCl หรือ 1 mol / L 1 mol . หนึ่งมิลลิลิตรของคลอแรมเฟนิคอล( Sigma c-0378 sigmaealdrich Corp . , เซนต์ หลุยส์ โมสหรัฐอเมริกา ) โซลูชั่นที่ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อป้องกันการเติบโตของแบคทีเรีย ซึ่งอาจใช้สถานที่ในการ . 2 มิลลิลิตรของเตรียมสดเพพซิน ( Sigma p-0609 800e2500 , หน่วย / มิลลิกรัม sigmaealdrich คอร์ปSt . Louis , MO , USA ) โซลูชั่นถูกบรรจุขวด โดยเอนไซม์เปปซิน โซลูชั่นทำโดยการผสม 0.75 กรัมของเตยหอมกับ 30 มล. Ultra บริสุทธิ์น้ำ ขวดแล้วปิดด้วยจุกยาง และ บ่มในนํ้า awater ที่ 39 องศาใต้อ่อนโยนการกวน ( 50 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 ชั่วโมง20 มิลลิลิตร สารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 2 ( 0.2 mol / l , pH 6.8 ) และ10 ml 0.6 โมลต่อลิตร NaOH จากนั้นเพิ่มโซลูชั่นในขวดเหล้า คือปรับ pH 6.8 ลิตรหรือ NaOH HCl กับ 1 วัน / 1 mol .6 มิลลิลิตรของสารละลาย Pancreatin สด ผลิตโดยการผสม 3 กรัมPancreatin ( Sigma p-1750 sigmaealdrich Corp . , St . Louis , MO , USA )90 มิลลิลิตรของน้ำบริสุทธิ์มาก , เพิ่ม , และย่อยสลาย คืออย่างต่อเนื่อง ภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน เป็นเวลา 4 ชั่วโมง
การแปล กรุณารอสักครู่..
