2.7. Inhibition halo testThe proced

2.7. Inhibition halo test
The procedure was performed as described by Rodríguez et al.
(2007). Three-millimeter diameter wells were made in LB plates
and a series of gallic acid (0.0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 and 2.5 mg/well) or
catechin (0.0, 5.0, 7.5, 10.0, 12.5 and 15.0 mg/well) solutions were
added to the wells. Then, 10 mL of an E. coli suspension containing
3  107 cells/mL were evenly spread over the plates with a metal
handle loop. After 24 h of incubation at 37 C the diameters of the
growth inhibition halos were determined.
2.8. Evaluation of combined action between gallic acid and catechin
The inhibition halo test was conducted as described above on LB
plates with a series of wells containing a fixed concentration of
catechin (7.5 mg/well) plus increasing doses of gallic acid (0.0, 0.1,
0.25, 0.5, 0.75 and 1.0 mg/well). The diameters of the E. coli growth
inhibition halos were measured after 24 h of incubation at 37 C.
2.9. Statistical analysis
Data were analyzed using the analysis of variance (ANOVA) and
the Tukey test to evaluate differences (p < 0.05).
3. Results
3.1. Antibacterial activity of gallic acid against E. coli
3.1.1. Growth assay in liquid medium
Growth of E. coli in presence of gallic acid was evaluated in LB
liquid culture medium supplemented with a range of concentrations
of gallic acid over a 24 h incubation period. After this time,
both absorbance at 600 nmand CFU/mL of the cell suspension were
determined. As shown in Fig. 1, the OD600 values decreased when
the medium was supplemented with gallic acid. Such growth
inhibitory effect became evident with gallic acid contents above
2.5 mg/mL. Full inhibitionwas observed with gallic acid contents of
3.5 mg/mL or more. CFU counting also put in evidence the inhibitory
effect of gallic acid on E. coli growth. In effect, the CFU/mL
values showed a steepy decrease from 1  109 to 2  103 at gallic
acid concentrations in the culture medium above 3.0 mg/mL. In this
assay, the minimum inhibitory concentration (MIC) of gallic acid to
produce 99% of E. coli growth inhibition was 3.25 mg/mL.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7 การยับยั้ง halo ทดสอบขั้นตอนที่ดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดย Rodríguez et al(2007) . บ่อเส้นผ่าศูนย์กลาง 3 มิลลิเมตรการทำแผ่นปอนด์และชุดของกรด gallic (0.0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 และ 2.5 มิลลิกรัม/ดี) หรือสารสกัดจาก (0.0, 5.0, 7.5, 10.0, 15.0 และ 12.5 มิลลิกรัม/ดี) ถูกโซลูชั่นเพิ่มเข้าไปในบ่อ แล้ว 10 mL เป็น E. coli ระงับบรรจุ3 107 เซลล์/mL ได้เท่า ๆ กันแผ่แผ่นกับโลหะจัดการวน หลังจาก 24 ชมของการบ่มที่ 37 C สมมาตรของการมีกำหนด halos ยับยั้งการเจริญเติบโต2.8. การประเมินผลการดำเนินการรวมระหว่างกรด gallic และสารสกัดจากการยับยั้ง halo ทดสอบได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ข้างต้นในปอนด์แผ่น มีชุดบ่อประกอบด้วยความเข้มข้นคงที่ของสารสกัดจาก (7.5 mg/ดี) และเพิ่มปริมาณของกรด gallic (0.0, 0.10.25, 0.5, 0.75 และ 1.0 มิลลิกรัม/ดี) สมมาตรของการเจริญเติบโตของ E. colihalos ยับยั้งถูกวัดหลังจาก 24 ชมของการบ่มที่ 37 เซลเซียส2.9. สถิติวิเคราะห์มีวิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้ค่าความแปรปรวนของการวิเคราะห์ (วิเคราะห์ความแปรปรวน) และการทดสอบ Tukey ประเมินความแตกต่าง (p < 0.05)3. ผลลัพธ์3.1 การกิจกรรมต้านเชื้อแบคทีเรียของกรด gallic กับ E. coli3.1.1 การเจริญเติบโตวิเคราะห์ในของเหลวมีประเมินการเจริญเติบโตของ E. coli ในของกรด gallic ปอนด์สื่อวัฒนธรรมของเหลวเสริม ด้วยช่วงของความเข้มข้นของกรด gallic ระยะฟักตัว 24 ชม เวลาทั้ง absorbance ที่ 600 nmand CFU/mL การระงับเซลล์ได้กำหนด ตามที่แสดงใน Fig. 1, OD600 ค่าลดลงเมื่อสื่อที่เสริม ด้วยกรด gallic เจริญเติบโตดังกล่าวลิปกลอสไขผลกลายเป็นชัด ด้วยกรด gallic เนื้อหาข้างต้น2.5 mg/mL Inhibitionwas เต็มที่สังเกต ด้วยกรด gallic เนื้อหาของ3.5 มิลลิกรัม/มิลลิลิตรหรือมากกว่า CFU นับยังใส่ในหลักฐานที่ลิปกลอสไขผลของกรด gallic ใน E. coli เจริญเติบโต ในผล CFU/mLค่าแสดงให้เห็นว่าการลด steepy 1 109 ไป 2 103 ที่ gallicความเข้มข้นกรดในสื่อวัฒนธรรมเหนือ 3.0 mg/mL ในที่นี้วิเคราะห์ ต่ำสุดลิปกลอสไขความเข้มข้น (MIC) ของกรด gallic เพื่อผลิต 99% ของการยับยั้งการเจริญเติบโตของ E. coli 3.25 mg/mL

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 ทดสอบรัศมีการยับยั้ง
ขั้นตอนที่ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดยRodríguez et al.
(2007) เส้นผ่าศูนย์กลางสามมิลลิเมตรหลุมได้ทำในแผ่น LB
และชุดของกรดแกลลิ (0.0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 และ 2.5 มก. / ดี) หรือ
catechin (0.0, 5.0, 7.5, 10.0, 12.5 และ 15.0 มิลลิกรัม / ดี) การแก้ปัญหาที่ถูก
เพิ่มเข้ามาในบ่อ จากนั้น 10 มลของ E. coli ที่มีระบบกันสะเทือน
3? 107 เซลล์ / มิลลิลิตรถูกแพร่กระจายอย่างสม่ำเสมอตลอดแผ่นด้วยโลหะ
ห่วงจับ หลังจาก 24 ชั่วโมงของการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางของ
รัศมีการยับยั้งการเจริญได้รับการพิจารณา.
2.8 การประเมินผลของการดำเนินการร่วมกันระหว่างฝรั่งเศสกรดและ Catechin
ทดสอบรัศมียับยั้งได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ข้างต้นใน LB
แผ่นกับชุดของหลุมที่มีความเข้มข้นคงที่ของ
catechin (7.5 mg / ดี) บวกปริมาณที่เพิ่มขึ้นของกรดแกลลิ (0.0, 0.1,
0.25 , 0.5, 0.75 และ 1.0 mg / ดี) เส้นผ่าศูนย์กลางของ E. coli การเจริญเติบโตของ
รัศมีการยับยั้งวัดหลังจาก 24 ชั่วโมงของการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส.
2.9 การวิเคราะห์ทางสถิติ
วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) และ
ทดสอบ Tukey การประเมินที่แตกต่างกัน (p <0.05).
3 ผล
3.1 ฤทธิ์ต้านแบคทีเรียกรดแกลลิต่อต้านเชื้อ E. coli
3.1.1 ทดสอบการเจริญเติบโตในอาหารเหลว
การเจริญเติบโตของเชื้อ E. coli ในการปรากฏตัวของกรดแกลลิถูกประเมินใน LB
อาหารเลี้ยงเชื้อเหลวเสริมด้วยช่วงของความเข้มข้น
ของกรดแกลลิช่วงระยะเวลาบ่ม 24 ชั่วโมง หลังจากที่เวลานี้
ทั้งดูดกลืนแสงที่ 600 nmand CFU / มิลลิลิตรเซลล์แขวนลอยที่ถูก
กำหนด ดังแสดงในรูป 1, ค่า OD600 ลดลงเมื่อ
กลางได้รับการเสริมด้วยกรดแกลลิ การเจริญเติบโตดังกล่าว
ผลยับยั้งก็เห็นได้ชัดที่มีเนื้อหากรดแกลลิข้างต้น
2.5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร inhibitionwas เต็มข้อสังเกตที่มีเนื้อหาฝรั่งเศสกรดของ
3.5 mg / ml หรือมากกว่า CFU นับยังใส่ในหลักฐานการยับยั้ง
ผลกระทบของกรดแกลลิใน E. coli การเจริญเติบโต ผล CFU / mL
ค่าแสดงให้เห็นว่าการลดลง steepy ตั้งแต่วันที่ 1? 109-2? 103 ที่ฝรั่งเศส
เข้มข้นของกรดในอาหารเลี้ยงเชื้อดังกล่าวข้างต้น 3.0 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ในการนี้
การทดสอบที่เข้มข้นต่ำสุด (MIC) ของกรดแกลลิการ
ผลิต 99% ของ E. coli การยับยั้งการเจริญเป็น 3.25 mg / ml

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7 . รัศมีการทดสอบการยับยั้ง
ขั้นตอนการเมืองตามที่อธิบายไว้โดยลุยส์โรดรีเกซ et al .
( 2007 ) ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 3 มิลลิเมตร เวลส์ ถูกทำในปอนด์แผ่น
และชุดเพิ่มขึ้น ( 0.0 , 0.5 , 1.0 , 1.5 , 2.0 และ 2.5 มก. / ดี ) หรือ
catechin ( 0.0 5.0 , 7.5 และ 10.0 12.5 15.0 มิลลิกรัม ) โซลูชั่น
เพิ่มในเวลส์ จากนั้น 10 ml ของ E . coli ช่วงล่างที่มี
3  107 เซลล์ / มล. ได้ทั่วถึงกระจายผ่านแผ่นโลหะ
จัดการวง หลังจาก 24 ชั่วโมง บ่มที่อุณหภูมิ 37  C ขนาดของรัศมีถูกยับยั้งการเจริญเติบโต
.
2.8 . การประเมินผลการดําเนินการรวมกันระหว่างฝรั่งเศสกรดและ Catechin
ยับยั้งรัศมีการทดสอบได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ข้างต้นใน LB
จานกับชุดของบ่อที่มีความเข้มข้นคงที่
catechin ( 75 มิลลิกรัม ) และเพิ่มปริมาณของกรดแกลลิค ( 0.0 , 0.1 ,
0.25 , 0.5 , 0.75 และ 1.0 มก. / ดี ) ขนาดของ E . coli การยับยั้งการเจริญเติบโต
รัศมีวัดหลังจาก 24 ชั่วโมง บ่มที่ 37  C .
2.9 .
สถิติการวิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) และการทดสอบเพื่อประเมินผลเป็นราย
ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ ( P < 0.05 )
3 ผลลัพธ์
3.1 . ฤทธิ์ต้านแบคทีเรียของกรดแกลลิคกับ E .