Phenolic acids were analyzed according to a validated methods
with some modifications in HPLC elution conditions (Mattila &
Hellstrom, 2007; Mattila & Kumpulainen, 2002; Naczk & Shahidi,
2004). The total phenolic extract (free and bound) was filtered
through a membran filter (0.45 mm) (Filtrex Techn., Singapore) and
analyzed in a HPLC chromatograph system (Perkin Elmer, Flexar,
USA) equipped with DAD and a reversed-phase C18 column (Perkin
Elmer ODS-2.5 mm, 250 mm-4.6 mm). The temperature of the
column oven was set at 30 C. A gradient elution was employed
with a mobile phase consisting of 40 mL/100 mL of acetonitrile
(solution A) and 2 mL/100 mL of acetic acid (solution B) as follows:
Isocratic elution 100 mL/100 mL B, 0e15 min; linear gradient from
100 mL/100 mL B to 85 mL/100 mL B, 15e30 min; linear gradient
from 85 mL/100 mL B to 75 mL/100 mL B, 30e40 min; linear
gradient from 75 mL/100 mL B to 50 mL/100 mL B, 40e50 min;
isocratic elution 50 mL/100 mL B, 50e55 min; linear gradient from
50 mL/100 mL B to 100 mL/100 mL B, 55e60 min; isocratic elution
100 mL/100 mL A, 60e70 min; isocratic elution 100 mL/100 mL B,
70 min; post-time 6 min before the next injection. The injection
volume was 10 mL, the flow rate was 1 mL/min at room temperature,
and the duration of a single runwas 40 min. All phenolic acids
were quantified using an external standard. All standards were
prepared as stock solutions at 2 mg/mL in methanol and they were
stored in darkness at 18 C. All experiments were replicated three
times for each total phenolic extracts of each flour type.
กรดฟีนอถูกวิเคราะห์ตามวิธีการตรวจมีการปรับเปลี่ยนบางอย่างใน HPLC elution (Mattila &Hellstrom, 2007 Mattila & Kumpulainen, 2002 Naczk และ Shahidi2004) มีกรองรวมฟีนอสารสกัด (ฟรี และถูกผูกไว้)ผ่านตัวกรอง membran (0.45 mm) (Filtrex Techn. สิงคโปร์) และวิเคราะห์ในระบบ (เอลเมอเพอร์ Flexar, chromatograph HPLCสหรัฐอเมริกา) พร้อมกับพ่อและคอลัมน์ C18 กลับเฟส (เพอร์เอลเมอ ODS 2.5 มม. 250 มม. - 4.6 มม.) อุณหภูมิของการเตาอบคอลัมน์ถูกตั้งค่าที่ 30 ซี Elution ไล่ระดับสีได้ว่าจ้างด้วยระยะเคลื่อนที่ประกอบด้วยของ 40 mL/100 mL ของ acetonitrile(โซลูชัน A) และ 2 mL/100 mL ของกรดน้ำส้ม (โซลูชัน B) เป็นดังนี้:Elution isocratic คิด 100 mL/100 mL B, 0e15 นาที การไล่ระดับสีแบบเส้นตรงจาก100 mL/100 mL B ไป 85 mL/100 mL B, 15e30 นาที การไล่ระดับสีแบบเส้นตรงจาก 85 mL/100 mL B ไป 75 mL/100 mL B, 30e40 นาที เชิงเส้นไล่ระดับจาก 75 mL/100 mL B ไป 50 mL/100 mL B, 40e50 นาทีelution isocratic คิด 50 mL/100 mL B, 50e55 นาที การไล่ระดับสีแบบเส้นตรงจาก50 mL/100 mL B ไป 100 mL/100 mL B, 55e60 นาที elution isocratic คิด100 mL/100 mL A, 60e70 นาที elution isocratic คิด 100 mL/100 mL Bนาที 70 หลังเวลา 6 นาทีก่อนฉีดถัดไป การฉีดปริมาตร 10 mL, 1 mL/min ที่อุณหภูมิห้อง มีอัตราการไหลและระยะเวลาของ runwas เดียว 40 นาที กรดฟีนอทั้งหมดมี quantified โดยใช้มาตรฐานการภายนอก ได้มาตรฐานทั้งหมดเตรียมเป็นหุ้นโซลูชั่นที่ 2 mg/mL ในเมทานอล และพวกเก็บในที่มืดที่ค. 18 การทดลองทั้งหมดถูกจำลองแบบสามเวลาสำหรับแต่ละแยกฟีนอรวมของแป้งแต่ละชนิด
การแปล กรุณารอสักครู่..
กรดฟีนอลที่ได้มาวิเคราะห์ตามวิธีการตรวจสอบด้วยการปรับเปลี่ยนบางอย่างในเงื่อนไขชะ HPLC (Mattila และ Hellstrom 2007; & Mattila Kumpulainen 2002; & Naczk Shahidi, 2004) สารสกัดฟีนอลรวม (ฟรีและผูกพัน) ถูกกรองผ่านตัวกรองMembran (0.45 มม) (Filtrex Techn. สิงคโปร์) และการวิเคราะห์ในระบบchromatograph HPLC (Perkin Elmer, Flexar, USA) พร้อมกับพ่อและเฟสกลับ C18 คอลัมน์ (Perkin Elmer ODS-2.5 มิลลิเมตร 250 มิลลิเมตร 4.6 มิลลิเมตร) อุณหภูมิของเตาอบคอลัมน์ตั้งอยู่ที่ 30 องศาเซลเซียส ชะลาดเป็นลูกจ้างกับเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 40 mL / 100 มิลลิลิตร acetonitrile (สารละลาย A) และ 2 mL / 100 มิลลิลิตรของกรดอะซิติก (สารละลาย B) ดังต่อไปนี้: ชะ Isocratic 100 mL / 100 มล B, 0e15 นาที; ลาดเชิงเส้นจาก100 mL / 100 มล B 85 mL / 100 มล B, 15e30 นาที; ลาดเชิงเส้นจาก 85 mL / 100 มล B 75 mL / 100 มล B, 30e40 นาที; เชิงเส้นไล่ระดับจาก 75 mL / 100 มล B 50 mL / 100 มล B, 40e50 นาที; ชะ isocratic 50 มล / 100 มล B, 50e55 นาที; ลาดเชิงเส้นจาก50 มล / 100 มล B 100 mL / 100 มล B, 55e60 นาที; ชะ isocratic 100 mL / 100 มล A, 60e70 นาที; ชะ isocratic 100 mL / 100 มล B, 70 นาที; โพสต์เวลา 6 นาทีก่อนที่จะฉีดต่อไป ฉีดปริมาณ 10 มิลลิลิตรอัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาทีที่อุณหภูมิห้องและระยะเวลาของrunwas เดียว 40 นาที กรดฟีนอลทั้งหมดถูกวัดโดยใช้มาตรฐานภายนอก มาตรฐานทั้งหมดถูกเตรียมการแก้ปัญหาสต็อกที่ 2 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรในเมทานอลและพวกเขาก็เก็บไว้ในความมืดที่? 18? C การทดลองทั้งหมดถูกจำลองแบบสามครั้งสำหรับแต่ละสารสกัดฟีนอลรวมของแต่ละประเภทแป้ง
การแปล กรุณารอสักครู่..
ฟีโนลิก กรด วิเคราะห์ตามการตรวจสอบวิธีการ
กับการปรับเปลี่ยนบางอย่างในเงื่อนไขใช้ HPLC ( mattila &
เฮลสเตริม , 2007 ; mattila & kumpulainen , 2002 ; naczk & shahidi
, 2004 ) สารฟีนอลิกทั้งหมด ( ฟรีและผูก ) ถูกกรองผ่านตัวกรอง membran
( 0.45 มม. ) ( filtrex techn . , สิงคโปร์ ) และวิเคราะห์ข้อมูลในระบบโครมาโตกราฟ
เป็น HPLC ( เพอร์กินเอลเมอร์ flexar
, ,สหรัฐอเมริกา ) พร้อมกับพ่อและ reversed-phase คอลัมน์ C18 เพอร์กินเอลเมอร์
ods-2.5 มม. mm-4.6 250 มม. ) อุณหภูมิของเตาอบ
คอลัมน์ไว้ที่ 30 C ลาดได้มาว่าจ้าง
กับเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 40 มล. / 100 มิลลิลิตรของไน
( โซลูชั่น ) และ 2 มล. / 100 มิลลิลิตรของกรด ( สารละลาย ) ดังนี้
Isocratic ( 100 มล. / 100 ml 0e15 B มินเชิงเส้นไล่ระดับจาก
/ 100 ml B 85 มล. / 100 มล. B , 15e30 มิน 100 มิลลิลิตร ;
ลาดเชิงเส้นจาก / 100 ml B 75 มล. / 100 ml B , 30e40 นาที 85 ml ; เส้น
ลดหลั่นจาก / 100 มล. B 50 มล. / 100 ml B , 40e50 Min 75 มิลลิลิตร ;
Isocratic ( 50 มล. / 100 ml B , 50e55 มินเชิงเส้นไล่ระดับจาก
/ 100 ml B 100 มล. / 100 ml B , 55e60 มิน 50 ml ; Isocratic (
100 มล. / 100 มล. , 60e70 มิน ; Isocratic / 100 มิลลิลิตร ( B 100 ml
70 นาที ;โพสต์เวลา 6 นาทีก่อนที่จะฉีดต่อไป ปริมาณการฉีด
10 มิลลิลิตร อัตราการไหลเท่ากับ 1 มล. / นาทีที่อุณหภูมิ ห้อง
และระยะเวลาของ runwas เดียว 40 นาที ทั้งหมดมีปริมาณกรดฟีนอล
โดยใช้มาตรฐานภายนอก มาตรฐานเป็นโซลูชั่นที่
เตรียมเป็นหุ้น 2 mg / ml ในเมทานอลและพวกเขา
เก็บไว้ในที่มืด 18 ทั้งหมดทดลองซ้ำ 3
Cครั้งสำหรับแต่ละรวมฟีนอล สารสกัดจากแป้งแต่ละชนิด
การแปล กรุณารอสักครู่..