The moisture content of a fermented sample was determined by infrared moisture determination balance
(FD-720, Kett Electric Laboratory, Tokyo, Japan). The fermented matter was mixed with deionized water (1:2
w/v) by blender and the pH value was measured by pH meter (DKK-TOA, HM-25G, Japan).
Casein solution (0.65%) in 0.05 M phosphate buffer (pH 6.9) and 0.05 M carbonate buffer (pH 10) were
used as a substrate to analyze neutral and alkaline protease activity, respectively. One mL of crude enzyme Chuenjit Chancharoonpong et al. / APCBEE Procedia 2 ( 2012 ) 57 – 61 59
extractThe reaction was arrested by adding
5 mL of trichloroacetic acid (TCA) and incubated for 30 min. After centrifugation at 10,000 xg for 10 min at
4°C, the supernatant was collected. The supernatant (2 mL) was reacted with 5 mL of 500 mM Na2CO3 and 1
mL of five-fold diluted Folin-Ciocalteau reagent for 10 min. Absorbance was read against a blank at 660 nm.
One unit of enzyme activity was defined as the amount of enzyme that liberated 1μg of tyrosine per minute
under assay conditions and 5 mL of casein were mixed and incubated at 30°C for 10 min
ปริมาณความชื้นของตัวอย่างหมักถูกกำหนดโดยความมุ่งมั่นอินฟราเรดสมดุลความชื้น
(FD-720, Kett ไฟฟ้าในห้องปฏิบัติการ, กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) เรื่องหมักผสมกับน้ำปราศจากไอออน (1: 2
w / v) โดยเครื่องปั่นและค่าพีเอชโดยวัดจากค่า pH เมตร (DKK-TOA, HM-25G, ญี่ปุ่น).
การแก้ปัญหาเคซีน (0.65%) ใน 0.05 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.9) และ 0.05 M บัฟเฟอร์คาร์บอเนต (pH 10) ถูก
นำมาใช้เป็นสารตั้งต้นในการวิเคราะห์กิจกรรมโปรติเอสที่เป็นกลางและด่างตามลำดับ หนึ่งมิลลิลิตรเอนไซม์ Chuenjit Chancharoonpong et al, / APCBEE Procedia 2 (2012) 57-61 59
extractThe ปฏิกิริยาถูกจับกุมโดยการเพิ่ม
5 มิลลิลิตรของกรดไตรคลอโร (TCA) และบ่มเป็นเวลา 30 นาที หลังจากการหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 XG 10 นาทีที่
4 องศาเซลเซียสใสถูกเก็บรวบรวม ใส (2 มิลลิลิตร) ได้รับการตอบสนองด้วย 5 มิลลิลิตร 500 มิลลิ Na2CO3 และ 1
มิลลิลิตรห้าเท่าเจือจางน้ำยา Folin-Ciocalteau เป็นเวลา 10 นาที การดูดกลืนแสงได้อ่านกับว่างเปล่าที่ 660 นาโนเมตร.
หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่มีอิสรเสรี1μgของซายน์ต่อนาที
ภายใต้เงื่อนไขการทดสอบและ 5 มิลลิลิตรเคซีนถูกผสมและบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..
