ResultsWe showed that the addition

Results

We showed that the addition of the 3′dideoxy blocker suppressed but did not eliminate false-positive amplification from the wild-type template. However, the addition of the PCR specificity enhancer near eliminated false-positive amplification from the wild-type allele. Further discrimination between true and false positives was enabled by using the quantification cycle (Cq) value of a single mutant template as a cut-off point, thus enabling robust distinction between true and false positives. As 10,000 JAK2 templates were used per replicate, the assay had a sensitivity of 1/10-4 per replicate. Greater sensitivity could be reached by increasing the number of replicates analysed. Variation in replicates when low mutant-allele templates were present necessitated the use of a statistics-based approach to estimate the load of mutant JAK2 copies. QuanTAS-PCR showed comparable quantitative results when validated against a commercial assay.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผล

เราแสดงให้เห็นว่านอกเหนือจากการป้องกัน 3'dideoxy เก็บกด แต่ไม่ได้กำจัดการขยายเท็จบวกจากแม่แบบป่าชนิด แต่นอกเหนือจาก pcr จำเพาะเพิ่มที่อยู่ใกล้กรอบการขยายเท็จบวกจากอัลลีลป่าชนิดการเลือกปฏิบัติต่อระหว่างบวกจริงและเท็จถูกเปิดใช้งานโดยใช้วงจรปริมาณ (CQ) ค่าของแม่กลายพันธุ์เดียวเป็นจุดตัดจึงทำให้ความแตกต่างที่แข็งแกร่งบวกระหว่างความจริงและเท็จ เป็น 10,000 JAK2 แม่แบบถูกนำมาใช้ต่อซ้ำ, ทดสอบมีความไวของ 1/10-4 ต่อซ้ำความไวมากขึ้นสามารถเข้าถึงได้โดยการเพิ่มจำนวนของการวิเคราะห์ซ้ำ การเปลี่ยนแปลงในแม่แบบซ้ำเมื่อกลายพันธุ์-อัลลีลต่ำอยู่ในปัจจุบันจำเป็นต้องมีการใช้วิธีการทางสถิติที่ใช้ในการประเมินภาระสำเนา JAK2 กลายพันธุ์ quantas-PCR แสดงให้เห็นผลเชิงปริมาณเทียบได้เมื่อตรวจสอบกับการวิเคราะห์เชิงพาณิชย์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผล

เราพบว่าการเพิ่มบล็อก 3′dideoxy ถูกระงับ แต่ไม่กำจัดขยายบวกเท็จจากแบบชนิดป่า อย่างไรก็ตาม การเพิ่มเพิ่ม specificity PCR ใกล้ตัดขยายบวกเท็จจาก allele ชนิดป่า การแบ่งแยกระหว่างความจริง และเท็จทำงานผิดพลาดถูกเปิดใช้งาน โดยใช้ค่า (ซี) วงจรนับแบบกลายพันธุ์เดียวเป็นจุดตัด เปิดใช้งานความแตกต่างแข็งแกร่งระหว่างทำงานผิดพลาดจริง และเท็จ เป็นแม่แบบ JAK2 10000 ใช้ต่อ replicate ทดสอบที่มีความไว 1/10-4 ต่อ replicate ความไวสูงสามารถมาถึงได้ โดยการเพิ่มจำนวน replicates analysed ความผันแปรใน replicates เมื่อแม่ mutant allele ต่ำถูกนำ necessitated ใช้วิธีการใช้สถิติอนุมานโหลดสำเนา JAK2 กลายพันธุ์ QuanTAS PCR แสดงให้เห็นว่าสามารถเปรียบเทียบเชิงปริมาณผลเมื่อตรวจสอบกับการทดสอบเชิงพาณิชย์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผล

เราแสดงให้เห็นว่าจากการที่ 3 'ตัวบล็อก dideoxy ที่ปิดกั้นแต่ก็ไม่มีการลดการขยายสัญญาณเสียงแบบบวกที่ผิดพลาดจากแม่แบบใดแม่แบบป่า - ประเภท อย่างไรก็ตามจากการที่มี Contrast Enhancer พวกเขาถกเถียง pcr ซึ่งอยู่ใกล้กับแพ้การขยายสัญญาณเสียงแบบบวกที่ผิดพลาดจาก allele ป่า - ประเภทการเลือกปฏิบัติต่อไประหว่างการแจ้งเตือนความจริงและเท็จมีการเปิดใช้โดยการใช้จักรยานจึงจำเป็นต้องมี( CQ )มูลค่าของแม่แบบ mutant เป็นจุดตัดที่ทำให้การเปิดใช้งานความแตกต่างระหว่างการแจ้งเตือนที่แข็งแกร่งจริงและเท็จ เทมเพลตเป็น 10 , 000 คนจากอ.พระ 2 ใช้ต่อฝีมือสอบที่มีระดับความไวของ 1/10-4 ต่อลอกเลียนแบบได้ระดับความไวมากขึ้นไม่สามารถเข้าถึงได้ด้วยการเพิ่มจำนวนของหาดจอมเทียนวิเคราะห์ การเปลี่ยนแปลงในหาดจอมเทียนเมื่อเทมเพลตต่ำ mutant - allele อยู่ทำให้ต้องใช้ที่ของการสถิติ - ซึ่งใช้เพื่อประมาณการจำนวน 2 ชุดจากอ.พระ mutant quantas - pcr แสดงให้เห็นผลในเชิงปริมาณใกล้เคียงกับเมื่อได้รับการทดสอบกับสอบเชิงพาณิชย์