จากจุดเริ่มของฐานรากในปีพ.ศ. 2489 ห้างหุ้นส่วนจำกัดโรงงานน้ำตาลมิตรผล ได้ถือกำเนิดขึ้นเป็นกิจการในครัวเรือนที่จังหวัดราชบุรี โดยมีจุดมุ่งหมายการเพื่อผลิตน้ำตาลทรายในรูปแบบอุตสาหกรรมขนาดเล็ก ในระยะแรกยังคงใช้แรงงานโคและกระบือในการหมุนเครื่องหีบอ้อยแบบไม้ ต่อมาจึงได้ขยายกิจการและเริ่มการผลิตเป็นน้ำเชื่อมเข้มข้นเพื่อส่งขายต่อไปยังโรงงานที่ผลิตน้ำตาลทรายขาว
จากรากฐานที่มั่นคง เติบโดไปเป็นธุรกิจที่ก้าวไกลในปีพ.ศ. 2499 ห้างหุ้นส่วนจำกัดโรงงานน้ำตาลมิตรผล ได้พัฒนาธุรกิจเป็น บริษัท น้ำตาลมิตรผล จำกัด และเริ่มทำการผลิตน้ำตาลทรายขาวเป็นครั้งแรก จวบจนวันนี้ นับเป็นเวลากว่า 50 ปีที่ บริษัท น้ำตาลมิตรผล จำกัด ได้ขยายกิจการอย่างต่อเนื่อง เพื่อรองรับความต้องการที่เพิ่มขึ้นตลอดเวลาของอุตสาหกรรมน้ำตาล โดยขยายโรงงานน้ำตาลเพิ่มขึ้นทั้งในภาคกลางและภาคตะวันออกเฉียงเหนือของประเทศไทย ได้แก่
โรงงานน้ำตาลมิตรภูเขียว จังหวัดชัยภูมิ (พ.ศ.2526)
โรงงานน้ำตาลมิตรผล จังหวัดสุพรรณบุรี (พ.ศ.2533)
โรงงานน้ำตาลมิตรภูเวียง จังหวัดขอนแก่น (พ.ศ.2538)
โรงงานน้ำตาลมิตรกาฬสินธุ์ จังหวัดกาฬสินธุ์ (พ.ศ.2540)
และล่าสุดได้เข้าไปร่วมถือหุ้นในโรงงานน้ำตาลสิงห์บุรี (พ.ศ. 2546)