The Cre/lox site-specific recombina

The Cre/lox site-specific recombination system has emerged as an important tool for the generation of conditional somatic mouse mutants. This method allows one to control gene activity in space and time in almost any tissue of the mouse, thus opening new avenues for studying gene function and for establishing sophisticated animal models of human diseases. A major technical advance in terms of in vivo inducibility was the development of ligand-dependent Cre recombinases that can be activated by administration of tamoxifen to the animal. Here we describe how tamoxifen-dependent Cre recombinases, so-called CreER recombinases, work and how they can be used to generate time- and tissue-specific mouse mutants. The focus will be on the CreER(T2) recombinase, which is currently the most successful CreER version. We will give an overview of available CreER(T2) transgenic mouse lines and present protocols that detail the generation of experimental mice for inducible gene knockout studies, the induction of recombination by tamoxifen treatment, and the analysis of the quality and quantity of recombination by reporter gene and target gene studies. Most of the protocols can also be used as general guidelines for the generation and characterization of Cre/lox-mediated genome modifications in mice

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ระบบไซต์ recombination Cre/lox ได้ผงาดขึ้นเป็นเครื่องมือสำคัญสำหรับการสร้างสายพันธุ์ somatic เมาส์แบบมีเงื่อนไข วิธีนี้ช่วยให้การควบคุมกิจกรรมของยีนในพื้นที่และในเกือบทุกเนื้อเยื่อของเมาส์ เปิด avenues ใหม่ สำหรับการศึกษายีนฟังก์ชัน และ สำหรับการกำหนดรูปแบบสัตว์มนุษย์โรคดังนั้น การพัฒนา recombinases Cre ขึ้นอยู่กับลิแกนด์ที่สามารถเรียกใช้ โดยการดูแลของ tamoxifen การสัตว์ ล่วงหน้าทางเทคนิคสำคัญใน inducibility ในสัตว์ทดลองได้ ที่นี่เราอธิบายว่า tamoxifen ขึ้นอยู่กับ Cre recombinases เรียกว่า CreER recombinases ทำงาน และวิธีที่สามารถใช้เพื่อสร้างเวลา และเนื้อเยื่อเฉพาะเมาส์สายพันธุ์ โฟกัสจะอยู่บน recombinase CreER(T2) ซึ่งขณะนี้รุ่น CreER ประสบความสำเร็จมากที่สุด เราจะให้ภาพรวมของบรรทัดเมาส์ถั่วเหลือง CreER(T2) ว่าง และปัจจุบันโปรโตคอลที่มีรายละเอียดรุ่นหนูทดลองศึกษายีน inducible ชนะน็อกโดยเทคนิค การเหนี่ยวนำของ recombination โดย tamoxifen รักษา และการวิเคราะห์คุณภาพและปริมาณของ recombination โดยโปรแกรมรายงานยีนและเป้าหมายการศึกษายีน ยังสามารถใช้เป็นแนวทางทั่วไปส่วนใหญ่ของโพรโทคอลที่สร้างและสมบัติของ Cre/lox-mediated แก้ไขจีโนมในหนู

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Cre / ปลาแซลมอนรมคระบบรวมตัวกันอีกเว็บไซต์ที่เฉพาะเจาะจงได้กลายเป็นเครื่องมือที่สำคัญในการผลิตของการกลายพันธุ์เมาส์ร่างกายเงื่อนไข วิธีการนี​​้จะช่วยให้หนึ่งในการควบคุมกิจกรรมของยีนในพื้นที่และเวลาในเกือบเนื้อเยื่อเมาส์ใด ๆ จึงเปิดช่องทางใหม่สำหรับการศึกษาการทำงานของยีนและการสร้างรูปแบบสัตว์ที่มีความซับซ้อนของโรคของมนุษย์ ล่วงหน้าทางเทคนิคที่สำคัญในแง่ของในร่างกาย inducibility คือการพัฒนาของแกนด์ขึ้นอยู่กับ recombinases Cre ที่สามารถใช้งานได้โดยการบริหารงานของ tamoxifen เพื่อสัตว์ ที่นี่เราอธิบายถึงวิธีการขึ้นอยู่กับ tamoxifen Cre recombinases ที่เรียกว่า recombinases Creer การทำงานและวิธีการที่พวกเขาสามารถใช้เวลาในการสร้างและการกลายพันธุ์เมาส์เนื้อเยื่อเฉพาะ การมุ่งเน้นที่จะอยู่บน Creer (T2) recombinase ซึ่งปัจจุบันเป็นรุ่นที่ประสบความสำเร็จมากที่สุด Creer เราจะให้ภาพรวมของที่มีอยู่ Creer (T2) สายเมาส์พันธุ์และโปรโตคอลปัจจุบันที่รายละเอียดรุ่นของหนูทดลองยีนกระตุ้นการศึกษาที่น่าพิศวง, การเหนี่ยวนำของการรวมตัวกันโดยการรักษา tamoxifen และการวิเคราะห์ที่มีคุณภาพและปริมาณของการรวมตัวกันอีกโดยนักข่าว ยีนและการศึกษายีนเป้าหมาย ส่วนใหญ่ของโปรโตคอลนอกจากนี้ยังสามารถนำมาใช้เป็นแนวทางทั่วไปสำหรับคนรุ่นและลักษณะของ Cre / ปลาแซลมอนรมคพึ่งจีโนมการปรับเปลี่ยนในหนู

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Please don't talk to me again, I'm sorry you did this to me.Please don't talk to me again, I'm sorry you did this to me.Please don't talk to me again, I'm sorry you did this to me.Please don't talk to me again, I'm sorry you did this to me.