The tocols were quantified according to the method reported by
Lampi et al. (2004) with some modification. Tocols were separated
by a normal phase HPLC using a GRACE Altima HP Silica
150 3 mm, 3 micron column and quantified with a fluorescence
detector (NP-HPLC–FLD) with an excitation wavelength of
290 nm and an emission wavelength of 325 nm. The mobile phase
was 1,4-dioxane/n-hexane (2:98, v/v) at a flow rate of 1 mL/min.
Separation of tocols was based on isocratic elution (Lampi et al.,
2004).
The quantity of the individual vitamin E isomers in samples was
calculated by the use of calibration curves for all standard isomers.
Tocopherol (T) standards (a-, b-, c-, d-T) and tocotrienol (T3) standards
(a-, b-, c-, d-T3) were purchased from Cayman Chemical,
USA, while n-hexane, ethyl acetate, ascorbic acid and DPPH (2,2-
diphenyl-1-picrylhydrazyl) were from Chem-Supply Pty. Ltd.,
Australia. Standard stock solutions were prepared to a concentration
of 500 lg/mL in hexane. Calibration curves for all isomers
were prepared over the concentration range of 1.0–25.0 lg/mL
using GenStat 14 (Lawes Agricultural Trust; VSN International,
Ltd., Hemel Hempstead, UK).
Barley extractions and standard isomers were injected into the
HPLC machine separately. Identification of peaks in barley samples
was made based on the retention time when compared with standard
peaks. Curves between standard peaks and standard contents
were used to calculate contents of isomers in barley samples.
The vitamin E content, expressed in mg of a-tocopherol-equivalents
(TE), was calculated according to Mclaughlin and Weihrauch
(1979) using biological activities of 1.0 for a-T, 0.3 for a-T3, 0.4 for
b-T, 0.05 for b-T3, 0.1 for c-T, 0.01 for c-T3 and 0.01 for d-T (a-
TE = a-T * 1.0 + a-T3 * 0.3 + b-T * 0.4 + b-T3 * 0.05 + c-T * 0.1 + c-T3
* 0.01 + d-T * 0.01).
Tocols ถูก quantified ตามวิธีการรายงานลำและ al. (2004) กับปรับเปลี่ยนบางอย่าง Tocols ถูกคั่นตามขั้นตอนปกติ HPLC ที่ใช้ซิลิก้า HP Altima เกรซ150 3 mm คอลัมน์ 3 ไมครอน และ quantified กับ fluorescence การเครื่องตรวจจับ (NP-HPLC – FLD) มีความยาวคลื่นในการกระตุ้นการของ290 nm และความยาวคลื่นการเล็ดรอดของ 325 nm ระยะเคลื่อนมี 1,4-dioxane/เอ็น เฮกเซน (2:98, v/v) ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร/นาทีElution isocratic คิดแบบแบ่งแยก tocols (ลำ et al.,2004)จำนวน isomers วิตามินแต่ละตัวในตัวอย่างได้คำนวณ โดยการใช้เส้นโค้งเทียบ isomers มาตรฐานทั้งหมดมาตรฐาน tocopherol (T) (การ- b- c- d-T) และมาตรฐาน tocotrienol (T3)(เป็น- b- c, d-T3) ซื้อจากเคย์เคมีสหรัฐอเมริกา ในขณะที่เอ็นเฮกเซน เอทิล acetate กรดแอสคอร์บิค และ DPPH (2,2-ฟีนิลได-1-picrylhydrazyl) ได้จัดหาเคมีเนชั่ลแนล จำกัดออสเตรเลีย แก้หุ้นได้เตรียมที่จะเข้มข้นของ 500 lg/มล. ในเฮกเซน เส้นโค้งการปรับเทียบสำหรับ isomers ทั้งหมดได้เตรียมช่วงความเข้มข้นของ 1.0 – 25.0 lg/mLใช้ 14 GenStat (Lawes เกษตรใจ นานาชาติ VSNจำกัด โรงแรม สหราชอาณาจักร)ข้าวบาร์เลย์สกัดและ isomers มาตรฐานถูกฉีดเข้าไปในตัวHPLC เครื่องแยกต่างหาก การระบุของยอดเขาในตัวอย่างข้าวบาร์เลย์ทำตามในการเก็บรักษาเมื่อเปรียบเทียบกับมาตรฐานยอดเขา เส้นโค้งระหว่างยอดมาตรฐานและเนื้อหามาตรฐานถูกใช้ในการคำนวณเนื้อหาของ isomers ในตัวอย่างข้าวบาร์เลย์แสดงเนื้อหาผสมวิตามินอี mg เป็น-tocopherol-เทียบเท่าคำนวณตามแม็กลาฟลินและ Weihrauch (เต้),(1979) โดยใช้กิจกรรมชีวภาพ 1.0 สำหรับ a-T, 0.3 สำหรับเป็น T3, 0.4 สำหรับb-T, 0.05 สำหรับบี-T3, 0.1 สำหรับ c-T, 0.01 c-T3 และ 0.01 สำหรับ d-T (เป็น-TE = a T * 1.0 + เป็น T3 * 0.3 + b-T * 0.4 + b T3 * c-T + 0.05 * 0.1 + c T3* 0.01 + d T * 0.01)
การแปล กรุณารอสักครู่..
โตคอถูกวัดตามวิธีการรายงานโดยลัมพี, et al
(2004) ที่มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง โตคอถูกแยกออกโดยเฟสปกติ HPLC ใช้ GRACE Altima HP ซิลิกา 150? 3 มมคอลัมน์ 3 ไมครอนและมีวัดเรืองแสงตรวจจับ(NP-HPLC-FLD) ที่มีความยาวคลื่นกระตุ้นของ290 นาโนเมตรและปล่อยความยาวคลื่น 325 นาโนเมตร เฟสเคลื่อนที่เป็น 1,4-dioxane / n-เฮกเซน (2:98, v / v) ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที. แยกโตคออยู่บนพื้นฐานของชะ isocratic (ลัมพี et al., 2004). ปริมาณของสารอินทรีย์วิตามินอีในแต่ละกลุ่มตัวอย่างได้รับการคำนวณโดยการใช้เส้นโค้งการสอบเทียบสำหรับทุกไอโซเมอมาตรฐาน. โทโคฟีรอ (T) มาตรฐาน (a-, B-, c-, dT) และ tocotrienol (T3) มาตรฐาน(a- ข - c-, D-T3) ที่ซื้อมาจากเคย์แมนเคมีสหรัฐอเมริกาในขณะที่n-เฮกเซนเอทิลอะซิเตวิตามินซีและ DPPH (2,2-. diphenyl-1-picrylhydrazyl) จาก Chem-Supply Pty Ltd. , ออสเตรเลีย มาตรฐานการแก้ปัญหาสต็อกพร้อมที่จะมีความเข้มข้นของแอลจี 500 / มิลลิลิตรในเฮกเซน เส้นโค้งการสอบเทียบสำหรับสารอินทรีย์ทั้งหมดได้จัดทำขึ้นในช่วงความเข้มข้นของ 1.0-25.0 ๆ lg / mL ใช้ GenStat 14 (Lawes การเกษตรเชื่อถือ; VSN อินเตอร์เนชั่นแนลจำกัด Hemel Hempstead สหราชอาณาจักร). สกัดข้าวบาร์เลย์และสารอินทรีย์มาตรฐานฉีดเข้าไปในเครื่อง HPLC แยกต่างหาก . บัตรประจำตัวของยอดเขาในตัวอย่างข้าวบาร์เลย์ที่ถูกทำขึ้นอยู่กับเวลาการเก็บรักษาเมื่อเทียบกับมาตรฐานยอด เส้นโค้งระหว่างยอดมาตรฐานและเนื้อหามาตรฐานถูกนำมาใช้ในการคำนวณเนื้อหาของสารอินทรีย์ในตัวอย่างข้าวบาร์เลย์. เนื้อหาวิตามินอีมิลลิกรัมของโทโคฟีรอเทียบเท่า(TE) ที่คำนวณได้ตาม Mclaughlin และ Weihrauch (1979) โดยใช้กิจกรรมทางชีวภาพของ 1.0 AT, 0.3 สำหรับ-T3 0.4 สำหรับBT, 0.05 สำหรับ B-T3 0.1 สำหรับ CT, 0.01 ค T3 และ 0.01 dT (a- TE = AT * 1.0 + A-T3 * 0.3 + BT * 0.4 + B-T3 * 0.05 + cT * 0.1 + C-T3 * 0.01 + 0.01 * dT)
การแปล กรุณารอสักครู่..
โทคอลที่เป็นเชิงปริมาณ ตามวิธีการที่รายงานโดย
ลำปี et al . ( 2004 ) มีการปรับเปลี่ยน โทคอลจากกัน
โดยปกติเฟส HPLC โดยใช้เกรซ Altima HP ซิลิกา
150 3 มม. 3 ไมครอนคอลัมน์และ quantified กับเรือง
ตรวจจับ ( np-hplc – FLD ) ที่มีความยาวคลื่นกระตุ้น
290 nm และปล่อยความยาวคลื่น 325 nm .
เฟสเคลื่อนที่ ( 2:98 1,4-dioxane / บีบ ,ปริมาตร / ปริมาตร ) ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที
แยกโทคอลขึ้นอยู่กับ Isocratic ( ( ลำปี et al . ,
) ) ปริมาณของแต่ละวิตามิน E คือในตัวอย่างคือ
คำนวณโดยการใช้เส้นโค้งเพื่อสอบเทียบมาตรฐานคือ .
( T ) มาตรฐาน ( โทโคเฟอรอล A - B - C - , d-t ) และโทโคไทรอีน ( T3 ) มาตรฐาน
( A - , B - , C - , d-t3 ) ซื้อจาก เคย์แมน เคมี
สหรัฐอเมริกา ในขณะที่บีบ ,เอทิลอะซิเตท , กรดแอสคอร์บิก และ dpph ( 2 , 2 -
diphenyl-1-picrylhydrazyl ) จากธุรกิจจัดหาเคมี จำกัด
ออสเตรเลีย โซลูชั่นสินค้ามาตรฐานเตรียมที่จะสมาธิ
500 LG / ml ในเฮกเซน . เส้นโค้งสอบเทียบทั้งหมดคือ
เตรียมผ่านช่วงความเข้มข้น 1.0 – 25.0 LG / ml
ใช้ genstat 14 ( ลอสการเกษตรเชื่อถือ vsn อินเตอร์เนชั่นแนล ,
)
เฮเมิลสเตด , สหราชอาณาจักร )การสกัดและข้าวบาร์เลย์คือมาตรฐานถูกฉีดเข้าสู่
2 เครื่องแยก รหัสของยอดเขาในข้าวบาร์เลย์ตัวอย่าง
ถูกสร้างตามการเวลาเมื่อเทียบกับยอดมาตรฐาน
เส้นโค้งระหว่างยอดมาตรฐาน และมาตรฐานที่ใช้ในการคำนวณ
เนื้อหาเนื้อหาของสารอินทรีย์ในตัวอย่างข้าวบาร์เลย์
วิตามินอี เนื้อหาที่แสดงออกในมิลลิกรัม a-tocopherol-equivalents
( TE )คำนวณตามกลุ่ม และ weihrauch
( 1979 ) โดยใช้กิจกรรมทางชีวภาพของ 1.0 สำหรับ a-t สำหรับ a-t3 0.3 0.4 สำหรับ
b-t 0.05 สำหรับ b-t3 0.1 สำหรับ c-t 0.01 และ 0.01 สำหรับ c-t3 สำหรับ d-t ( -
te = a-t * 1.0 a-t3 * * 0.4 0.3 b-t b-t3 * 0.05 0.1 c-t * c-t3
* 0.01 d-t * 0.01 )
การแปล กรุณารอสักครู่..