For the CV assay (Merrittet al., 20

For the CV assay (Merritt
et al., 2005), the medium was carefully removed with the aid of a micropipette
and the biofilms were washed three times by adding 225 μl of
phosphate buffered saline (PBS, NaCl 8 g/L; KCl 0.2 g/l; Na2HPO4
1.44 g/l; KH2PO4 0.24 g/l; pH 7.4 (Merck)) to remove unattached cells.
The resulting biofilm was stained for 30 min with 200 μl of 0.1% (w/v)
of CV (Merck), and excess of CV was removed by washing three times
with 225 μl PBS as described above. The dye attached to the biofilm
was solubilized in 70% ethanol for 30 min and the optical density (OD)
was measured at 595 nm (SpectraMax, Molecular Devices). When OD
values exceeded 1, samples were diluted in 70% ethanol and resulting
OD measurements were corrected for the dilution factor and by
subtracting the average of the blank. The resulting measurement was
defined as the total biofilm. Each plate was prepared in triplicate and
three independent biological replicates were analysed per condition.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สำหรับทดสอบ CV (Merrittร้อยเอ็ด al., 2005), สื่อที่ถูกเอาออกอย่างระมัดระวัง ด้วยความช่วยเหลือของ micropipette การและ biofilms ถูกล้าง 3 ครั้ง โดยการเพิ่ม μl 225 ของฟอสเฟต buffered น้ำเกลือ (PBS, NaCl 8 g/L KCl 0.2 g/l Na2HPO41.44 g/l KH2PO4 0.24 g/l ค่า pH 7.4 (เมอร์ค)) เอา unattached เซลล์Biofilm ได้เป็นสีสำหรับ 30 นาทีกับ 200 μl 0.1% (w/v)ของ CV (เมอร์ค), และส่วนที่เกินของ CV ถูกเอาออก โดยการซักสามครั้งมี 225 μl PBS ที่อธิบายข้างต้น สีย้อมกับ biofilmมี solubilized ในเอทานอล 70% ใน 30 นาทีและความหนาแน่นออปติคอล (OD)มีวัดที่ 595 nm (SpectraMax อุปกรณ์โมเลกุล) เมื่อ ODค่าเกิน 1 ตัวอย่างถูกทำให้เจือจางในเอทานอล 70% และส่งผลวัด OD ที่แก้ไข สำหรับตัวเจือจาง และโดยลบค่าเฉลี่ยของว่างเปล่า มีการประเมินผลกำหนดเป็น biofilm รวม แต่ละจานเตรียมไว้ใน triplicate และสามอิสระชีวภาพสามารถจำลองได้ analysed ต่อเงื่อนไข

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

(เมอร์ริสำหรับการทดสอบ
CV. et al, 2005)
ขนาดกลางที่ถูกลบออกอย่างระมัดระวังด้วยความช่วยเหลือของไมโครที่และไบโอฟิล์มถูกล้างสามครั้งโดยการเพิ่ม225
ไมโครลิตรของฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ(พีบีเอส, โซเดียมคลอไรด์ 8 กรัม / ลิตร; KCl 0.2 g / l; Na2HPO4
1.44 g / l; KH2PO4 0.24 g / l; pH 7.4 (เมอร์ค)) เพื่อขจัดเซลล์โสด.
ไบโอฟิล์มส่งผลให้ได้รับการย้อมสีเป็นเวลา 30 นาทีกับ 200 ไมโครลิตร 0.1% (w / v)
ของ CV (เมอร์ค ) และส่วนที่เกินจาก CV
ถูกลบออกโดยการซักสามครั้งกับพีบีเอส225 ไมโครลิตรที่อธิบายข้างต้น สีย้อมที่แนบมากับฟิล์มถูกละลายในเอทานอล 70% เป็นเวลา 30 นาทีและความหนาแน่นของแสง (OD) วัดที่ 595 นาโนเมตร (SpectraMax โมเลกุลอุปกรณ์) เมื่อ OD ค่าเกิน 1 ตัวอย่างที่ถูกเจือจางในเอทานอล 70% และส่งผลให้การวัดOD ได้รับการแก้ไขสำหรับปัจจัยที่ทำให้เจือจางและโดยการหักค่าเฉลี่ยของว่าง ผลการวัดที่ถูกกำหนดให้เป็นไบโอฟิล์มรวม แต่ละจานถูกจัดทำขึ้นในเพิ่มขึ้นสามเท่าและสามซ้ำชีวภาพอิสระที่ได้มาวิเคราะห์ต่อสภาพ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สำหรับ CV assay ( Merritt
et al . , 2005 ) , สื่อถูกลบออกอย่างระมัดระวัง ด้วยความช่วยเหลือของไมโครปิเปต
และไบโอฟิล์มได้ซักสามครั้ง โดยการเพิ่ม 225 μ l
ฟอสเฟตในน้ำเกลือ ( PBS , เกลือ 8 กรัม / ลิตร ปริมาณ 0.2 กรัม / ลิตร na2hpo4
1.44 กรัมต่อลิตร ; kh2po4 0.24 กรัมต่อลิตร ; พีเอช 7.4 ( Merck ) เอาไม่เซลล์ ส่งผลให้ฟิล์มมีเปื้อน
30 นาที 200 μ L 0.1% ( w / v )
ของ CV ( Merck )และส่วนเกินของพันธุ์ออกซักสามครั้ง
กับ 225 μ L PBS ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ย้อมติดฟิล์ม
ถูกสร้างในเอทานอล 70% เป็นเวลา 30 นาทีและความหนาแน่นของแสง ( OD )
เป็นวัดที่ 595 nm ( spectramax โมเลกุล , อุปกรณ์ ) เมื่อ OD
ค่าเกิน 1 ตัวอย่างที่เจือจางในเอทานอล 70% และผลจากการวัดจำนวนการแก้ไขปัจจัย

2 และลบเฉลี่ยของว่างเปล่า ผลการวัดคือ
นิยามเป็นฟิล์มทั้งหมด แต่ละจานที่เตรียมไว้ทั้งสามใบและ
3 ซ้ำทางชีวภาพอิสระวิเคราะห์ต่อเงื่อนไข