followed by 30 cycles of 50 s at 94

followed by 30 cycles of 50 s at 94 ◦C, 45 s at 55 ◦C (the temperature
for GAPDH, CYP3A4 and GDF5 were 52, 53 and 50 ◦C, respectively),
20 s (the duration for GAPDH, CYP3A4 and GDF5 were 40, 50 and
75 s, respectively) at 72 ◦C, and a final extension performed at 72 ◦C
for 5 min [28–30]. The reactions were then held at 4 ◦C until analysis.
Finally, amplified products (5 l) were loaded onto a 3.0%
agarose gel in TBE (90 mM Tris–borate pH 8.0, 1 mM EDTA) buffer
for electrophoresis, with bands visualized under ultraviolet light by
GoldView staining using the Gel Doc EQ System.
3. Results and discussion
The use of magnetic nanoparticles to isolate nucleated cells
directly from urine is of significant advantage from both ease of
use and purity perspectives. This facile approach concentrates and
extracts gDNA from urine, and eliminates the influence of physiological
metabolites present in the sediments of centrifuged or
frozen urine samples that would otherwise inhibit enzyme activities.
Despite considerable efforts to extract gDNA from urine
sediments, traditional gDNA extraction methods are easily contaminated
by various known enzyme inhibitors (phenol, urea and salts)
originating from the urine and/or extraction process. Consequently,
it would be necessary to re-dissolve the sediment prior to cell isolation,
as adopted by protocols assaying other urine components (e.g.,
proteins) [26]. Despite reports that incubating urine samples at

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตามรอบ 30 50 s ที่ 94 ◦C, 45 s ที่ 55 ◦C (อุณหภูมิ
สำหรับ GAPDH, CYP3A4 และ GDF5 52, 53 และ 50 ◦C ตามลำดับ),
20 s (ระยะ GAPDH, CYP3A4 และ GDF5 ได้ 40, 50 และ
75 s ตามลำดับ) ที่ 72 ◦C และส่วนขยายเป็นขั้นสุดท้าย 72 ◦C
สำหรับ 5 นาที [28–30] ปฏิกิริยาที่ถูกแล้วจัดขึ้นที่ 4 ◦C จนถึงการวิเคราะห์.
ในที่สุด ผลิตภัณฑ์เอาต์ (5 ลิตร) ถูกโหลดลงในเจ 3.0%
agarose ในบัฟเฟอร์ TBE (90 มม. Tris–borate ค่า pH 8.0, 1 mM EDTA)
สำหรับ electrophoresis กับวง visualized ภายใต้รังสีอัลตราไวโอเลตโดย
GoldView ย้อมสีโดยใช้ระบบคณะกรรมการเอกสารเจ
3 ผลลัพธ์และสนทนา
การใช้แม่เหล็กการเก็บกักเพื่อแยกเซลล์ nucleated
โดยตรงจากปัสสาวะเป็นความได้เปรียบที่สำคัญจากทั้งง่าย
มุมมองการใช้และความบริสุทธิ์ มุ่งเน้นวิธีการนี้ร่ม และ
แยก gDNA จากปัสสาวะ และกำจัดอิทธิพลของสรีรวิทยา
อยู่ในตะกอนของ metabolites centrifuged หรือ
แช่ตัวอย่างปัสสาวะที่จะหรือยับยั้งกิจกรรมของเอนไซม์
แม้ มีความพยายามมากเพื่อดึง gDNA จากปัสสาวะ
ตะกอน วิธีสกัดดั้งเดิม gDNA มีปนเปื้อนได้ง่าย
โดย inhibitors รู้จักเอนไซม์ต่าง ๆ (วาง ยูเรีย และเกลือ)
เกิดจากกระบวนการปัสสาวะและ/หรือแยก ดังนั้น,
มันจะจำเป็นในการละลายตะกอนก่อนแยกเซลล์ ใหม่
เป็นบุตรบุญธรรม โดยโปรโตคอล assaying คอมโพเนนต์ปัสสาวะ (e.g.,
proteins) [26] แม้ มีรายงานที่ incubating ปัสสาวะตัวอย่างที่

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตามด้วย 30 รอบ 50 s ที่ 94 ◦ C 45 S 55 C ( อุณหภูมิ◦
สำหรับ gapdh ( gdf5 , และจำนวน 52 , 53 และ 50 ◦องศาเซลเซียส ) ,
20 วินาที ( ระยะเวลา gapdh ( gdf5 , และ 40 , 50 และ 75 s
2 ) 72 ◦ C , และสุดท้ายการกระทำที่ 72 ◦ C
5 นาที [ 28 – 30 ] ปฏิกิริยาจึงจัดขึ้นที่ 4 ◦ C จนถึงการวิเคราะห์ .
ในที่สุดขยายผลิตภัณฑ์ ( 5  L ) ถูกโหลดลงบนเจล ( 3.0 %
ในทีบี ( 90 มม. นอกจากนี้ – บอเรท pH 8.0 , 1 mM EDTA ) บัฟเฟอร์
สำหรับอิเล็กกับวงมองเห็นภายใต้แสงอัลตราไวโอเลตโดย
goldview staining โดยใช้เจลหมอ EQ ระบบ .
3 ผลและการอภิปราย
ใช้อนุภาคนาโนแม่เหล็กแยกแบบเซลล์
โดยตรงจากปัสสาวะอย่างประโยชน์ทั้งจากความสะดวกของ
ใช้และมุมมองที่เท่าเทียมกัน วิธีการที่ง่ายนี้เข้มข้นและสารสกัดจาก gdna
จากปัสสาวะ และลดอิทธิพลของสรีรวิทยา
หลายชนิดอยู่ในตะกอนดินที่ระดับหรือ
แช่แข็งตัวอย่างปัสสาวะที่มิฉะนั้นจะยับยั้งกิจกรรมเอนไซม์ .
แม้จะมีความพยายามมากที่จะดึง gdna จากตะกอนปัสสาวะ
, การสกัดด้วยวิธีแบบดั้งเดิมได้อย่างง่ายดาย gdna ปนเปื้อน
โดยยับยั้งเอนไซม์ต่าง ๆที่รู้จัก ( ฟีนอล , ยูเรียและเกลือ )
ที่เกิดจากปัสสาวะและ / หรือกระบวนการสกัด . โดย
จำเป็นต้อง re ละลายตะกอนก่อนการแยกเซลล์
เป็นบุตรบุญธรรมโดยโปรโตคอล assaying ส่วนประกอบอื่นๆ เช่น โปรตีนในปัสสาวะ
) [ 26 ] แม้จะมีรายงานว่า การแช่ตัวอย่างปัสสาวะที่