The 16S rDNA fragments of the ANAMMOX bacteria were initially
amplified by using a specific primer pair Amx368f/Amx820r;
however, the target fragments were not obtained. Subsequently, a
nested PCR was constructed for increased efficiency in obtaining
the required amplified fragments. The primer pair Pla46f/630r
was used in the first round to amplify Planctomycete and, during
the second round, the PCR products were used as a template for
the specific amplification of the ANAMMOX bacteria (Jetten et al.,
2009; Neef et al., 1998; Schmid et al., 2003). All the PCR amplifications
were constructed in triplicate, and the 16S rDNA fragments
obtained from the two rounds were purified by using anagarose
gel DNA purification kit (Sangon, China). Finally, cloning and
sequencing were performed by a commercial service provider
(SangonBiotech (Shanghai) Co., Ltd.)
The 16S rDNA fragments of the ANAMMOX bacteria were initiallyamplified by using a specific primer pair Amx368f/Amx820r;however, the target fragments were not obtained. Subsequently, anested PCR was constructed for increased efficiency in obtainingthe required amplified fragments. The primer pair Pla46f/630rwas used in the first round to amplify Planctomycete and, duringthe second round, the PCR products were used as a template forthe specific amplification of the ANAMMOX bacteria (Jetten et al.,2009; Neef et al., 1998; Schmid et al., 2003). All the PCR amplificationswere constructed in triplicate, and the 16S rDNA fragmentsobtained from the two rounds were purified by using anagarosegel DNA purification kit (Sangon, China). Finally, cloning andsequencing were performed by a commercial service provider(SangonBiotech (Shanghai) Co., Ltd.)
การแปล กรุณารอสักครู่..

16S rDNA เศษของแบคทีเรีย ANAMMOX ถูกขั้นต้น
ขยายโดยใช้คู่ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจง Amx368f / Amx820r;
แต่เศษเป้าหมายที่ไม่ได้รับ ต่อมา
ซ้อนกัน PCR ถูกสร้างขึ้นให้มีประสิทธิภาพเพิ่มขึ้นในการได้รับ
ชิ้นส่วนที่จำเป็นต้องขยาย ไพรเมอร์คู่ Pla46f / 630R
ถูกนำมาใช้ในรอบแรกจะขยาย Planctomycete และในช่วง
รอบที่สองผลิตภัณฑ์ PCR ถูกนำมาใช้เป็นแม่แบบสำหรับ
การขยายเฉพาะของแบคทีเรีย ANAMMOX (Jetten, et al.
2009; et al, Neef 1998. ชมิด, et al, 2003) ทั้งหมด amplifications PCR
ถูกสร้างขึ้นในเพิ่มขึ้นสามเท่าและชิ้นส่วน 16S rDNA
ที่ได้รับจากรอบสองถูกทำให้บริสุทธิ์โดยใช้ anagarose
ชุดฟอกดีเอ็นเอเจล (Sangon, จีน) ในที่สุดการโคลนและ
การเรียงลำดับได้ดำเนินการโดยผู้ให้บริการในเชิงพาณิชย์
(SangonBiotech (Shanghai) Co. , Ltd. )
การแปล กรุณารอสักครู่..
