The yeastDNAwas extracted fromthe pure cultures according to the
method described by Pereira et al. (2013). The 5.8S ITS rRNA gene
region of yeast isolates was amplified using the primers ITS1 and ITS4
(Masoud et al., 2004). The obtained ITS-rRNA gene region of yeast
isolates was digested by restriction endonucleases HaeIII and MspI, according
to the manufacturer's instructions (Invitrogen, São Paulo,
Brazil). The PCR products and restriction fragments were separated
by gel electrophoresis on 0.7% (w⁄v) agarose gel, and stained with
ethidium bromide (Sigma). The bands were then visualized by UV
transilluminator and photographed. A size marker (Gene Ruler of
100 bp DNA Ladder Plus, Fermentans) was used as a reference. The patterns
of Amplified rRNA gene Restriction Analysis (ARDRA) were clustered
using BioNumerics Version 6.50 (Applied Maths, Sint-Martens-
Latem, Belgium). Representative isolates were selected on the basis of
genotypic groupings, and the 5.8S ITS rRNA gene region was sequenced
using an ABI3730 XL automatic DNAsequencer. The sequences obtained
were compared with sequences available in the GenBank database
through a basic local alignment search tool (BLAST). The nucleotide sequences
of representative isolates were deposited in the GenBank database
under access numbers KF747750 to KF747757.
The yeastDNAwas extracted fromthe pure cultures according to themethod described by Pereira et al. (2013). The 5.8S ITS rRNA generegion of yeast isolates was amplified using the primers ITS1 and ITS4(Masoud et al., 2004). The obtained ITS-rRNA gene region of yeastisolates was digested by restriction endonucleases HaeIII and MspI, accordingto the manufacturer's instructions (Invitrogen, São Paulo,Brazil). The PCR products and restriction fragments were separatedby gel electrophoresis on 0.7% (w⁄v) agarose gel, and stained withethidium bromide (Sigma). The bands were then visualized by UVtransilluminator and photographed. A size marker (Gene Ruler of100 bp DNA Ladder Plus, Fermentans) was used as a reference. The patternsof Amplified rRNA gene Restriction Analysis (ARDRA) were clusteredusing BioNumerics Version 6.50 (Applied Maths, Sint-Martens-Latem, Belgium). Representative isolates were selected on the basis ofgenotypic groupings, and the 5.8S ITS rRNA gene region was sequencedusing an ABI3730 XL automatic DNAsequencer. The sequences obtainedwere compared with sequences available in the GenBank databasethrough a basic local alignment search tool (BLAST). The nucleotide sequencesof representative isolates were deposited in the GenBank databaseunder access numbers KF747750 to KF747757.
การแปล กรุณารอสักครู่..

yeastDNAwas สกัด fromthe วัฒนธรรมบริสุทธิ์ตาม
วิธีการอธิบายโดยราและคณะ (2013) 5.8S ยีน rRNA ของ
ภูมิภาคของเชื้อยีสต์ถูกขยายโดยใช้ไพรเมอร์ ITS1 และ ITS4
(Masoud et al., 2004) ITS-rRNA ภูมิภาคยีนที่ได้รับของยีสต์
สายพันธุ์ถูกย่อยโดยข้อ จำกัด endonuclease ที่ HaeIII และ MspI ตาม
คำแนะนำของผู้ผลิต (Invitrogen, เซาเปาโล,
บราซิล) PCR ผลิตภัณฑ์และข้อ จำกัด ชิ้นส่วนถูกแยกออก
โดย gel electrophoresis บน 0.7% (w/v) เจล agarose และย้อมด้วย
ethidium โบรไมด์ (Sigma) วงที่ได้รับการมองเห็นแล้วโดย UV
transilluminator และถ่ายภาพ ขนาดเครื่องหมาย (ยีนผู้ปกครองของ
100 bp บันไดดีเอ็นเอพลัส, Fermentans) ถูกนำมาใช้เป็นข้อมูลอ้างอิง รูปแบบ
ของการขยาย rRNA ยีนข้อ จำกัด การวิเคราะห์ (ARDRA) ได้รับการจัดกลุ่ม
โดยใช้ BioNumerics รุ่น 6.50 (ประยุกต์คณิตศาสตร์, Sint-Martens-
ลาเทม, เบลเยี่ยม) เชื้อที่เป็นตัวแทนได้รับการคัดเลือกบนพื้นฐานของ
การจัดกลุ่มทางพันธุกรรมและภูมิภาค 5.8S ยีน rRNA มันก็ติดใจ
ใช้ DNAsequencer อัตโนมัติ ABI3730 XL ลำดับที่ได้
ถูกนำมาเปรียบเทียบกับลำดับที่มีอยู่ในฐานข้อมูลของ GenBank
ผ่านเครื่องมือค้นหาการจัดตำแหน่งในท้องถิ่นขั้นพื้นฐาน (ระเบิด) ลำดับเบส
ของเชื้อที่เป็นตัวแทนที่ถูกฝากไว้ในฐานข้อมูลของ GenBank
ภายใต้หมายเลขเข้าสู่ระบบเพื่อ KF747750 KF747757
การแปล กรุณารอสักครู่..
