2.5. ImmunofluorescenceKidneys were

2.5. Immunofluorescence
Kidneys were isolated from CRIg-Fc and control treated mice and immediately frozen into Tissue-Tek OCT compound. Sections (5 μm thickness) were cut on a cryostat, fixed in acetone and washed successively in 1× PBS (Phosphate Buffered Saline) three times and blocked with 10% BSA in PBS for 30 min. Diluted FITC-anti-mouse IgG (Jackson Immunoresearch, West Grove, PA) or anti-mouse C3 (Hycult Biotech, Plymouth Meeting, PA) antibodies were incubated overnight at 4 °C, and goat anti-mouse FITC antibody was used as a secondary antibody for C3. Sections were visualized with a Nikon C1 confocal microscope. The fluorescence intensity of glomeruli from each animal was calculated using Image J software. At least 20 glomeruli per section were analyzed and scored.
2.6. Statistical analysis
Two-tailed Students t test were used for data analysis and p values of ≤0.05 were regarded as statistically significant.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5. immunofluorescenceไตได้แยกจาก CRIg-Fc และควบคุมรักษาหนู และทันทีแช่แข็งเข้าไปในเนื้อเยื่อ-Tek OCT ผสม ส่วน (5 μm หนา) ถูกตัดบน cryostat เป็น ถาวรในอะซิโตน และล้างใน 1 × PBS (ฟอสเฟต Buffered Saline) ติด ๆ กันสามครั้ง และถูกบล็อก ด้วย 10% บีเอสเอใน PBS ใน 30 นาที Diluted FITC-ป้องกันเมาส์ IgG (Jackson Immunoresearch เวสต์โกรฟ PA) หรือเมาส์ป้องกัน C3 (Hycult เทคโนโลยีชีวภาพ พลีมัธประชุม PA) แอนตี้ได้ incubated ค้างคืนที่ 4 ° C และมีใช้แอนติบอดี FITC เมาส์ป้องกันแพะเป็นแอนติบอดีที่รองสำหรับ C3 ส่วนมี visualized ด้วยกล้องจุลทรรศน์ confocal Nikon C1 มีคำนวณความเข้ม fluorescence ของ glomeruli จากสัตว์แต่ละใช้ซอฟต์แวร์ภาพ J Glomeruli น้อย 20 สำหรับแต่ละส่วนถูกวิเคราะห์ และคะแนน2.6. สถิติวิเคราะห์หางสองทดสอบ t ของนักเรียนได้ใช้สำหรับการวิเคราะห์ข้อมูล และค่า p ของ ≤0.05 ได้ถืออย่างมีนัยสำคัญทางสถิติที่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 อิมมูโนไตแยกได้จาก CRIg-Fc รับการรักษาและการควบคุมหนูและแช่แข็งทันทีในสารประกอบเนื้อเยื่อเต็กตุลาคม
ส่วน (5 ไมครอนหนา) ถูกตัดใน cryostat การแก้ไขในอะซีโตนและล้างอย่างต่อเนื่องใน 1 ×พีบีเอส (ฟอสเฟต Buffered Saline) สามครั้งและถูกปิดกั้นกับบีเอสเอ 10% ในพีบีเอสเป็นเวลา 30 นาที เจือจาง FITC ป้องกันเมาส์ IgG (แจ็คสัน Immunoresearch เวสโกรฟ, PA) หรือต่อต้านเมาส์ C3 (Hycult ชีวภาพประชุมพลีมั ธ , PA) แอนติบอดีถูกบ่มค้างคืนที่ 4 องศาเซลเซียสและแพะแอนติบอดีต่อต้านเมาส์ FITC ถูกใช้เป็น แอนติบอดีรองสำหรับ C3 ส่วนที่ถูกมองเห็นด้วย Nikon C1 กล้องจุลทรรศน์ confocal ความเข้มของแสง glomeruli จากสัตว์แต่ละที่คำนวณโดยใช้ซอฟแวร์ภาพ J อย่างน้อย 20 glomeruli ต่อส่วนวิเคราะห์และให้คะแนน.
2.6
การวิเคราะห์ทางสถิตินักเรียนสองหางเสื้อทดสอบถูกนำมาใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลและค่านิยมของพี≤0.05ถูกมองว่าเป็นนัยสำคัญทางสถิติ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 D
ไตถูกแยกจาก crig FC และควบคุมรักษาหนูทันทีและแช่แข็งเป็นเต็กเนื้อเยื่อต.ค. นี้ด้วย ส่วน ( 5 μม. หนา ) ที่ถูกตัดใน Cryostat คงที่ ) และล้างอย่างต่อเนื่องใน 1 × PBS ( ฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ ) 3 ครั้ง และถูกปิดกั้นด้วย 10% BSA ใน PBS เป็นเวลา 30 นาที ซึ่ง IgG anti เมาส์ fitc ( แจ็คสัน immunoresearch West Grove ,ป่า ) หรือ C3 ป้องกันเมาส์ ( hycult เทคโนโลยีชีวภาพ พลีมัธ นัด , PA ) แอนติบอดีที่ถูกบ่มค้างคืนที่ 4 ° C และแพะป้องกันเมาส์ fitc แอนติบอดีที่ใช้เป็นแอนติบอดีมัธยม C3 ส่วนที่เป็นภาพกับ Nikon C1 ด้วยกล้องจุลทรรศน์ ความเข้มของการเรืองแสงโกลเมอจากสัตว์แต่ละคำนวณได้โดยใช้ภาพ J ซอฟต์แวร์ อย่างน้อย 20 โกลเมอต่อส่วนวิเคราะห์และคะแนน .
2.6 การวิเคราะห์ทางสถิติ
สองหางทดสอบนักเรียน สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูล และค่า≤ 0.05 ถือว่าอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ