Council Directive 70/524/EEC regula

Council Directive 70/524/EEC regulates the application of probiotic (microorganisms) additives in feeding stuffs. In the present study a method for the differentiation and strain identification of authorised probiotic Saccharomyces cereviseae strains in feeding stuffs by Polymerase Chain Reaction (PCR) was validated. Four different samples of animal feeding stuffs containing yeast at levels between 105 to 107 CFU/g were examined. Samples were enumerated on chloramphenicol glucose yeast extract agar and
colonies were selected from these plates for DNA extraction and subsequent analysis. The PCR method
using delta sequence primers produced an ‘amplified sequence polymorphism’ characteristic for the test
strain. Feeds supplemented with one of four probiotic yeast strains each were analysed by seven of nine
invited laboratories. All laboratories returned valid results with the exception of one laboratory that had
insufficiently separated bands on the gel. The method had a good reproducibility for probiotic yeast isolates
from feed of all four authorised probiotic yeast strains (APYS) CBS 493.94, APYS CNCM 1-1079,
APYS CNCM 1-1077, APYS NCYC SC47 and of a commercially available yeast reference strain, NCYC
81. The PCR method is to be considered by CEN and ISO as official control method for identification of
authorised probiotic Saccharomyces cerevisiae strains from feeding stuffs.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สภาสั่ง 70/524/EEC กำหนดแอพลิเคชันของโปรไบโอติกส์ (จุลินทรีย์) วัตถุเจือปนในอาหารวัตถุดิบ ในปัจจุบันศึกษาวิธีการที่สร้างความแตกต่าง และมีการตรวจสอบต้องใช้รหัสของกุญแจโปรไบโอติกส์ Saccharomyces cereviseae สายพันธุ์ในอาหารวัตถุดิบโดยปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) สี่ตัวอย่างที่แตกต่างกันของวัตถุดิบอาหารสัตว์ที่ประกอบด้วยยีสต์ในระดับระหว่าง 105-107 CFU/g ที่ถูกตรวจสอบ ตัวอย่างที่ระบุใน agar chloramphenicol กลูโคสยีสต์สารสกัด และอาณานิคมถูกเลือกจากแผ่นเหล่านี้สกัดดีเอ็นเอและการวิเคราะห์ที่ตามมา วิธี PCRใช้เดลต้าลำดับไพรเมอร์ผลิตลักษณะ 'ขยายลำดับโพลิมอร์ฟิซึม' สำหรับการทดสอบต้องใช้ เสริม ด้วยหนึ่งสี่โปรไบโอติกส์ยีสต์แต่ละตัวดึงข้อมูลถูก analysed โดยเจ็ดเก้าเชิญห้องปฏิบัติการ ห้องปฏิบัติการทั้งหมดส่งกลับผลลัพธ์ที่ถูกต้องยกเว้นห้องปฏิบัติการหนึ่งที่มีวง insufficiently แยกบนเจ วิธีมี reproducibility ดีสำหรับแยกยีสต์โปรไบโอติกส์จากข้อมูลของโปรไบกุญแจสี่ทั้งหมดโอติกส์ ยีสต์ CBS (APYS) 493.94, APYS CNCM 1-1079SC47 NCYC APYS CNCM 1-1077, APYS และต้อง ใช้ยีสต์ที่ใช้ในเชิงพาณิชย์อ้างอิง NCYC81.วิธี PCR จะพิจารณาโดย CEN ISO เป็นวิธีการควบคุมอย่างเป็นทางการสำหรับการระบุกุญแจโปรไบโอติกส์ Saccharomyces cerevisiae สายพันธุ์จากอาหารวัตถุดิบ