DNA immunisation is a relatively ne

DNA immunisation is a relatively new technique with high esciency, simplicity and
broad applicability (Hassett & Whitton, 1996; Donnelly et al., 1997). The principle is
that plasmid DNA with an antigen gene following a eukaryotic promoter is delivered
to the tissue of an animal, where it is taken up by cells which then express the antigen.
Vaccination of fish by DNA injection has been shown to be e#ective against viral
diseases such as infectious haematopoietic necrosis (IHN) and viral haemorrhagic
septicaemia (VHS) (Anderson et al., 1996a; Boudinot et al., 1998; Heppel et al., 1998;
Lorenzen et al., 1998, 1999). However, information on the longevity of DNA expression
and/or di#usion of injected DNA, which might lead to the creation of transgenic fish,
is limited. These matters must be clarified before commercialisation of DNA vaccines
for fish becomes a reality. To analyse the duration of expression and the di#usion of
expression through the body over a prolonged period of time, we developed an in vivo
assay for luciferase detection in live glass catfish that had been injected with DNA
encoding the luciferase gene. An advantage of this system over the analysis of isolated
tissues is that fish survive the analysis and thus we were able to monitor luciferase
expression in individual fish for an extended time period.
The glass catfish were approximately 5 cm in total length and were held at 25 C.
They were injected with 5
l PBS containing 20
g pCEP4-luc DNA into the left lateral
muscle. Plasmid pCEP4-luc (Mayerhofer et al., 1995) contains the firefly luciferase gene
under the control of the human cytomegalovirus promoter which has been shown to be
e$cient in fish (Anderson et al., 1996b). Detection of luciferase expression in plasmidinjected
fish was performed after anaesthesia in 0·017% FA100 (Tanabe Yakuhin Co.,

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Immunisation ดีเอ็นเอเป็นเทคนิคค่อนข้างใหม่กับ esciency สูง ความเรียบง่าย และความเกี่ยวข้องของกว้าง (Hassett & Whitton, 1996 Donnelly et al., 1997) หลักคือส่งที่ plasmid DNA กับยีนการตรวจหาโปรโมเตอร์ eukaryotic ต่อไปนี้ในเนื้อเยื่อของสัตว์ ที่มันจะถูกใช้ โดยเซลล์ซึ่งแสดงการตรวจหาแล้ววัคซีนปลาโดยฉีดดีเอ็นเอได้รับการแสดงเป็น อี #ective ต่อต้านไวรัสโรคเช่นโรคติดเชื้อ haematopoietic การตายเฉพาะส่วน (IHN) และไวรัส haemorrhagicsepticaemia (VHS) (แอนเดอร์สันและ al., 1996a Boudinot และ al., 1998 Heppel และ al., 1998Lorenzen และ al., 1998, 1999) อย่างไรก็ตาม ข้อมูลในลักษณะของดีเอ็นเอนิพจน์และ/หรือ di #usion เอ็นฉีด ซึ่งอาจนำไปสู่การสร้างปลาถั่วเหลืองถูกจำกัด ต้องละเอียดเรื่องเหล่านี้ก่อนที่จะ commercialisation ค่าวัคซีนดีเอ็นเอปลากลายเป็นความจริง การวิเคราะห์ความต้องการระยะเวลาและ di #usion ของนิพจน์โดยใช้ร่างกายเป็นระยะเวลานาน เราพัฒนาเป็นในสัตว์ทดลองวิเคราะห์ตรวจ luciferase ในปลาดุกสดแก้วที่มีการฉีดกับดีเอ็นเอเข้ารหัสยีน luciferase ข้อดีของระบบนี้ผ่านการวิเคราะห์แยกเนื้อเยื่อคือ การวิเคราะห์การอยู่รอดของปลา และดังนั้น เราไม่สามารถตรวจสอบ luciferaseนิพจน์ในปลาแต่ละตัวเป็นระยะเวลานานปลาแก้วได้ประมาณ 5 ซม.ความยาวรวม และถูกจับที่ 25 cพวกเขาถูกฉีด ด้วย PBS 5 l ที่ประกอบด้วยดีเอ็นเอลุค pCEP4 20 กรัมลงในด้านข้างซ้ายกล้ามเนื้อ Plasmid pCEP4-ลุค (Mayerhofer และ al., 1995) ประกอบด้วยยีน luciferase หิ่งห้อยภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์ cytomegalovirus มนุษย์ซึ่งจะเป็นcient $ e ในปลา (แอนเดอร์สันและ al., 1996b) ตรวจสอบนิพจน์ luciferase plasmidinjectedปลาทำ anaesthesia 0·017% FA100 (Tanabe Yakuhin Co. หลัง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การฉีดวัคซีนดีเอ็นเอเป็นเทคนิคที่ค่อนข้างใหม่กับ esciency สูงเรียบง่ายและ
การบังคับใช้ในวงกว้าง (Hassett และไวท, 1996. Donnelly, et al, 1997) หลักการคือ
พลาสมิดดีเอ็นเอที่มียีนแอนติเจนต่อไปนี้โปรโมเตอร์ eukaryotic จะถูกส่ง
ไปยังเนื้อเยื่อของสัตว์ที่ถูกนำขึ้นมาจากเซลล์ที่แล้วแสดงแอนติเจน.
การฉีดวัคซีนของปลาโดยการฉีดดีเอ็นเอได้รับการแสดงที่จะเป็น E # ective กับไวรัส
โรคเช่นโรคติดเชื้อเนื้อตายเม็ดเลือด (Ihn) และไวรัสตกเลือด
ภาวะโลหิตเป็นพิษ (VHS) (เดอร์สัน, et al, 1996a. Boudinot et al, 1998;. Heppel et al, 1998;.
. Lorenzen et al, 1998, 1999) อย่างไรก็ตามข้อมูลเกี่ยวกับอายุการใช้งานของการแสดงออกดีเอ็นเอ
และ / หรือ di # usion ดีเอ็นเอฉีดซึ่งอาจนำไปสู่การสร้างพันธุ์ปลาที่
มี จำกัด เรื่องเหล่านี้จะต้องชี้แจงก่อนที่การค้าของวัคซีนดีเอ็นเอ
สำหรับปลากลายเป็นความจริง การวิเคราะห์ระยะเวลาในการแสดงออกและ di # usion ของ
การแสดงออกผ่านร่างกายเป็นระยะเวลานานของเวลาเราพัฒนาในร่างกาย
ทดสอบสำหรับการตรวจสอบ luciferase ในปลาดุกแก้วสดที่ได้รับการฉีดดีเอ็นเอ
เข้ารหัสยีน luciferase ข้อดีของระบบนี้ในช่วงการวิเคราะห์แยก
เนื้อเยื่อเป็นปลาที่รอดการวิเคราะห์และทำให้เรามีความสามารถในการตรวจสอบ luciferase
การแสดงออกของแต่ละบุคคลในปลาเป็นระยะเวลานาน.
ปลาดุกแก้วประมาณ 5 เซนติเมตรยาวรวมและถูกจัดขึ้นที่ 25 ? ซี
พวกเขาได้รับการฉีด 5? ลิตรพีบีเอสที่มี 20 กรัมดีเอ็นเอ pCEP4-luc เข้าด้านข้างซ้าย
ของกล้ามเนื้อ พลาสมิด pCEP4-luc (Mayerhofer et al., 1995) มียีนหิ่งห้อย luciferase
ภายใต้การควบคุมของผู้ก่อการ cytomegalovirus มนุษย์ซึ่งได้รับการแสดงให้เห็นว่า
อี $ เพียงพอในปลา (แอนเดอ et al., 1996b) การตรวจสอบการแสดงออก luciferase ใน plasmidinjected
ปลาได้ดำเนินการหลังจากการระงับความรู้สึกใน 0 · 017% FA100 (ทานาเบะยาคูฮิน จำกัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คนเป็นเทคนิคค่อนข้างใหม่กับดีเอ็นเอ esciency สูง , ความเรียบง่ายและ
กว้างมาส ( แฮสซิต&ไวท , 1996 ; ดอนเนลลี่ et al . , 1997 ) หลักการคือว่าพลาสมิดดีเอ็นเอกับ
แอนติเจนยีนต่อไปนี้การเข้ามาส่ง
ให้เนื้อเยื่อของสัตว์ที่เป็นที่ขึ้น โดยเซลล์ที่แสดงแอนติเจน .
วัคซีนของปลาโดยการฉีดดีเอ็นเอได้ถูกแสดงเป็น อี# ective ต่อต้านเชื้อไวรัส เช่น โรคใบไหม้ ( ที่แท้จริง )
ihn ) และไวรัสข้อมูล
ภาวะเลือดเป็นพิษ ( VHS ) ( Anderson et al . , 1996a ; boudinot et al . , 1998 ; heppel et al . , 1998 ;
lorenzen et al . , 1998 , 1999 ) อย่างไรก็ตาม ข้อมูลเกี่ยวกับอายุการใช้งานของ
การแสดงออกดีเอ็นเอและ / หรือ ดิ # usion ฉีดดีเอ็นเอซึ่งอาจนำไปสู่การสร้างยีน
ปลา , จำกัด เรื่องเหล่านี้ต้องชี้แจงก่อนการพาณิชย์ของดีเอ็นเอวัคซีน
ปลากลายเป็นความจริง เพื่อวิเคราะห์ระยะเวลาในการแสดงออก และ ดิ # usion ของ
การแสดงออกผ่านร่างกายมากกว่าระยะเวลานานของเวลา เราพัฒนาโดยการตรวจหาเอนไซม์ลูซิเฟอเรส (
ปลาดุกในแก้วอยู่ที่ได้รับการฉีดดีเอ็นเอ
มีเอนไซม์ลูซิเฟอเรสยีน . ข้อดีของระบบนี้ผ่านการวิเคราะห์แยกเนื้อเยื่อที่ปลารอด
การวิเคราะห์ และดังนั้น เราสามารถที่จะตรวจสอบการแสดงออกของเอนไซม์ลูซิเฟอเรส
ในปลาแต่ละตัวเป็นระยะเวลาที่ขยาย .
แก้วปลาดุกประมาณ 5 ซม. ความยาวรวมและถูกจัดขึ้นที่ 25 
Cพวกเขาฉีด 5
L PBS ที่มี 20
กรัม pcep4 ลุคดีเอ็นเอเข้าซ้ายข้าง
กล้ามเนื้อ พลาสมิด pcep4 ลุค ( mayerhofer et al . , 1995 ) มีหิ่งห้อยลูซิเฟอเรสยีน
ภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์มนุษย์ใหม่ซึ่งได้รับการแสดงเป็น
E $ cient ในปลา ( Anderson et al . , 1996b ) การตรวจหาการแสดงออกใน plasmidinjected
ลูซิเฟอเรสปลาแสดงหลังจากยาสลบใน 0 ด้วย 017 % fa100 ( ทานาเบะ yakuhin Co . ,