The sperm rich–fraction was collected by hand manipulation into water-jacketed vessels. The volume, concentration,
and motility of the sperm were estimated immediately after collection. Only ejaculates with greater than 70% progressively motile sperm and 80% morphologically normal spermatozoa were used for cryopreservation. Immediately after collection, the semenwas diluted (1:1) in Biosolwens Plus (BP) extender (Biochefa, Sosnowiec, Polska).Spermatozoa were cryopreserved using the method described by Westendorf et al. [22] with modifications described subsequently. The diluted semen was transferred to 50 mL centrifuge tubes, equilibrated at 15 C for 60 minutes, and centrifuged at 800 g for 25 minutes. The supernatant was discarded and the sperm pellet was resuspended with extender A (80 mL of 11% lactose solution and 20 mL egg yolk) to a concentration of 1.5 109 spermatozoa/mL. The diluted semen was cooled to 5 C for 120 minutes. Two parts of semen were mixed with one part of extender B (89.5% extender A with 9% glycerol and 1.5% Equex-STM paste whose active ingredient is sodium dodecyl sulphate, Nova Chemical Sales, Scituate Inc, MA, USA). The final concentration of semen was 1.0 109 spermatozoa/mL and 3% glycerol. The diluted and cooled semen was loaded into 0.5 mL straws (Minitüb). The straws were sealed with polyvinyl chloride powder before being placed in contact with nitrogen vapor for 15 minutes in a polystyrene box. After that, the straws were plunged into liquid nitrogen (196 C) for storage. After 2 weeks of storage, samples were removed from the liquid nitrogen and thawed. Thawing was carried out by immersing the straws in a circulating water bath at 37 C for 40 seconds. Immediately after thawing, the semen was diluted in BP extender at 37 C.
The sperm rich–fraction was collected by hand manipulation into water-jacketed vessels. The volume, concentration,and motility of the sperm were estimated immediately after collection. Only ejaculates with greater than 70% progressively motile sperm and 80% morphologically normal spermatozoa were used for cryopreservation. Immediately after collection, the semenwas diluted (1:1) in Biosolwens Plus (BP) extender (Biochefa, Sosnowiec, Polska).Spermatozoa were cryopreserved using the method described by Westendorf et al. [22] with modifications described subsequently. The diluted semen was transferred to 50 mL centrifuge tubes, equilibrated at 15 C for 60 minutes, and centrifuged at 800 g for 25 minutes. The supernatant was discarded and the sperm pellet was resuspended with extender A (80 mL of 11% lactose solution and 20 mL egg yolk) to a concentration of 1.5 109 spermatozoa/mL. The diluted semen was cooled to 5 C for 120 minutes. Two parts of semen were mixed with one part of extender B (89.5% extender A with 9% glycerol and 1.5% Equex-STM paste whose active ingredient is sodium dodecyl sulphate, Nova Chemical Sales, Scituate Inc, MA, USA). The final concentration of semen was 1.0 109 spermatozoa/mL and 3% glycerol. The diluted and cooled semen was loaded into 0.5 mL straws (Minitüb). The straws were sealed with polyvinyl chloride powder before being placed in contact with nitrogen vapor for 15 minutes in a polystyrene box. After that, the straws were plunged into liquid nitrogen (196 C) for storage. After 2 weeks of storage, samples were removed from the liquid nitrogen and thawed. Thawing was carried out by immersing the straws in a circulating water bath at 37 C for 40 seconds. Immediately after thawing, the semen was diluted in BP extender at 37 C.
การแปล กรุณารอสักครู่..

สเปิร์มที่อุดมไปด้วยส่วนที่ถูกเก็บรวบรวมโดยการจัดการมือลงไปในน้ำเรือเสื้อ ปริมาณความเข้มข้นและการเคลื่อนที่ของตัวอสุจิประมาณทันทีหลังจากที่คอลเลกชัน
เฉพาะ ejaculates มีมากกว่า 70% สเปิร์มมีความก้าวหน้าและการเคลื่อนที่ 80% อสุจิปกติ morphologically ถูกนำมาใช้ในการเก็บรักษา ทันทีหลังจากที่คอลเลกชัน, semenwas เจือจาง (1: 1) ใน Biosolwens พลัส (BP) ขยาย (Biochefa, Sosnowiec, Polska) .Spermatozoa ถูกแช่แข็งโดยใช้วิธีการอธิบายโดย Westendorf et al, [22] มีการปรับเปลี่ยนที่อธิบายไว้ในภายหลัง น้ำอสุจิเจือจางถูกย้ายไป 50 มลหลอด centrifuge, equilibrated ที่ 15 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาทีและหมุนเหวี่ยงที่ 800? กรัมประมาณ 25 นาที สารละลายที่ถูกทิ้งและเม็ดสเปิร์มที่ถูก resuspended กับขยาย A (80 มิลลิลิตรของการแก้ปัญหาแลคโตส 11% และ 20 มลไข่แดง) กับความเข้มข้นของ 1.5 หรือไม่? สเปิร์ม 109 / มิลลิลิตร น้ำอสุจิเจือจางเย็นถึง 5 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 120 นาที สองส่วนของน้ำอสุจิที่ถูกผสมกับส่วนหนึ่งของขยาย B (89.5% ขยายที่มีกลีเซอรอล 9% และ 1.5% Equex STM-วางที่มีสารออกฤทธิ์คือโซเดียมโดเดซิลซัลเฟตโนวาขายเคมี Scituate Inc, MA, USA) ความเข้มข้นสุดท้ายของน้ำอสุจิเป็น 1.0? สเปิร์ม 109 / มิลลิลิตรและกลีเซอรีน 3% น้ำอสุจิเจือจางและระบายความร้อนได้รับการโหลดลง 0.5 มิลลิลิตรหลอด (Minitüb) หลอดถูกปิดผนึกด้วยผงโพลีไวนิลคลอไรด์ก่อนที่จะถูกวางไว้ในการติดต่อกับไอไนโตรเจนเป็นเวลา 15 นาทีในกล่องโฟม หลังจากนั้นหลอดที่ถูกกระโจนเข้าสู่ไนโตรเจนเหลว (? 196? C) สำหรับการจัดเก็บ หลังจาก 2 สัปดาห์ของการจัดเก็บตัวอย่างที่ถูกถอดออกจากไนโตรเจนเหลวและละลาย ละลายได้ดำเนินการโดยการแช่หลอดในอ่างน้ำที่ไหลเวียนที่ 37? C เป็นเวลา 40 วินาที ทันทีหลังจากที่ละลายน้ำอสุจิที่ถูกเจือจางในขยาย BP ที่ 37 องศาเซลเซียส
การแปล กรุณารอสักครู่..

อสุจิรวย–เศษส่วนเพื่อจัดการมือในเรือ Jacketed น้ำ ปริมาณความเข้มข้นของการเคลื่อนที่ของอสุจิและ
ประมาณได้ทันทีหลังจากคอลเลกชัน เพียง ejaculates มากกว่า 70% ผู้เคลื่อนที่ 80% จากปกติของอสุจิและอสุจิที่ใช้เป็นเชื้อ ทันทีหลังจากคอลเลกชัน semenwas เจือจาง ( 1 :1 ) ใน biosolwens พลัส ( BP ) Extender ( biochefa Sosnowiec , แน่นแฟ้น , ) อสุจิที่ถูกตรวจสอบคุณภาพโดยใช้วิธีการที่อธิบายโดย Westendorf et al . [ 22 ] กับการอธิบายในภายหลัง การเจือจางน้ำเชื้อถูกย้ายไป 50 ml ขายขาด equilibrated ที่ 15 , องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาที และระดับที่ 800 กรัม ใช้เวลา 25 นาทีและน่านถูกทิ้งและอสุจิเม็ดเป็น resuspended กับ Extender ( 80 ml 11% แล็กโตส โซลูชั่น และไข่แดง 20 ml ) ความเข้มข้น 1.5 109 / มิลลิลิตรน้ำเชื้ออสุจิเจือจางอยู่เย็น 5 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 120 นาที สองส่วนของน้ำเชื้อมาผสมกับส่วนหนึ่งของ Extender B ( ร้อยละ % Extender กับกลีเซอรอลร้อยละ 9 และ 15 % equex STM วางที่มีส่วนผสมที่ใช้งาน คือ โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต , โนวาเคมีขาย Scituate Inc , MA , USA ) ความเข้มข้นสุดท้ายของน้ำอสุจิเท่ากับ 1.0 109 5 / ml และ 3 % กลีเซอรอล . การเจือจางน้ำเชื้อ และเย็นถูกโหลดลง 0.5 ml หลอด ( นาทีü b )หลอดถูกผนึกด้วยโพลิไวนิลคลอไรด์ผงก่อนที่จะถูกวางไว้ในการติดต่อกับไอไนโตรเจน 15 นาทีในกล่องโฟม หลังจากนั้นฟางก็กระโจนลงในไนโตรเจนเหลว ( 196 C ) สำหรับการจัดเก็บ หลังจาก 2 สัปดาห์ของการเก็บตัวอย่าง เอาออกจากไนโตรเจนเหลวและแข็ง .การกระทำโดยแช่ฟางในการหมุนเวียนน้ำร้อนอุณหภูมิ 37 C นาน 40 วินาที ทันทีหลังจากละลาย , เจือจางน้ำเชื้อใน BP Extender ที่ 37
C
การแปล กรุณารอสักครู่..
