2.5. Skin evaporation and permeatio

2.5. Skin evaporation and permeation studies
In vitro studies were conducted using Franz diffusion cells (0.79 cm2
)
and split-thickness human cadaver skin as previously described [16].
Briefly, receptor compartments contained 4.5 mL of Dulbecco's
phosphate-buffered saline (PBS), pH 7.4, with 0.02% sodium azide preservative,
maintained at 37 °C in aluminum blocks and magnetically
stirred. A tritiated water screening test was used to confirm skin integrity,
ensuring an intact, normal, barrier function for in vitro skin studies.
Skin samples with 3
H2O permeation values greater than 1.56 μL/cm2 as
determined by liquid scintillation counting (Beckman LS6500) were
rejected as excessively permeable [17]. Samples were rank ordered
based on 3
H2O permeation results and randomly assigned to a treatment
group [18]. After an overnight equilibration the formulations described
above were applied to each cell at a dose of 3 μL/cell, using a positive
displacement pipette and a pre-wetted glass rod for uniform spreading.
For experiments in which transdermal absorption alone was measured,
the skin was mounted in Franz diffusion cells equipped with a
donor chamber that was open to the atmosphere and extended approximately
11 mm above the skin surface. The receptor solution
was removed for HPLC analysis and replaced with fresh buffer at predetermined
time points over a 24 h period. The heating/stirring modules
containing the cells were placed in a fume hood with the sash
adjusted to simulate outdoor conditions [16].
For experiments in which both evaporation and absorption data
were gathered, a modified Franz diffusion cell was used as described
in Saiyasombati and Kasting [19]. The top portion of the Franz cell
consisted of a custom-made 4 mL donor compartment with an air
inlet and an outlet connection to a Tenax TA cartridge (Supelco, St.
Louis, MO) that acted as a vapor trap. Room air was continuously
drawn through the inlet port on the evaporation cell, passed over
the skin surface and exhausted through the Tenax TA cartridge to
trap evaporated DEET. This airflow was maintained at approximately
40 mL/min by a 224-PCXR4 universal sample pump (SKC, Eighty Four,
PA) connected to the top of the adsorbent tube. Previous characterization
of this sampling scheme showed that this flow rate simulates
approximate outdoor conditions [16,19]. Cartridges and receptor
solutions were exchanged at predetermined post-dose time points
during a 48 h period. At the conclusion of the experiment, the
evaporation cells were rinsed with 2 mL of 95% ethanol to harvest
any residual DEET, and this solvent was collected for analysis. Additionally,
skin samples were retained and placed in a 95% ethanol solution
for analysis. All samples were analyzed by HPLC.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 การศึกษาระเหยและซึมผ่านผิวหนังการศึกษาในหลอดทดลองถูกดำเนินการโดยใช้เซลล์แพร่ฟรานซ์ (0.79 cm2)และผิวความหนาแยกมนุษย์ cadaver อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [16]สั้น ๆ ช่องรับอยู่ 4.5 mL ของ Dulbeccoฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ (PBS), ค่า pH 7.4 กับ 0.02% โซเดียม azide สารกันบูด37 ° C ในบล็อกอลูมิเนียม และแม่เหล็กกวน น้ำ tritiated ทดสอบการคัดกรองถูกใช้เพื่อยืนยันความสมบูรณ์ของผิวสร้างฟังก์ชันเหมือนเดิม ปกติ อุปสรรคการศึกษาผิวในหลอดทดลองผิวตัวอย่างที่ 3H2O ค่าการซึมผ่านมากกว่า μL 1.56 cm 2 เป็นกำหนด โดยของเหลวอาร์กอนนับ (Beckman LS6500) ได้ปฏิเสธที่ซึมเข้าไปมากเกินไปได้ [17] ตัวอย่างลำดับที่สั่งได้อิงจาก 3การซึมผ่านของ H2O ผล และกำหนดแบบสุ่มให้การรักษากลุ่ม [18] หลังจาก equilibration ค้างคืนการอธิบายสูตรการข้างต้นถูกนำไปใช้กับแต่ละเซลล์ที่ปริมาณของ 3 μL/เซลล์ ใช้บวกปิเปตระวางและก้านแก้วเปียกไว้ล่วงหน้าสำหรับการแพร่กระจายเหมือนกันสำหรับการทดลองในการดูดซึมที่ผิวหนังเพียงอย่างเดียวโดยวัดติดอยู่ในเซลล์แพร่ฟรานซ์มีผิวหอการค้าบริจาคที่ถูกเปิดให้บรรยากาศ และขยายประมาณ11 มม.เหนือผิว วิธีการแก้ไขปัญหาในการรับถูกเอาออกสำหรับวิเคราะห์ HPLC และแทนที่ ด้วยสดบัฟเฟอร์ที่กำหนดจุดเวลาในช่วง 24 ชม โมเครื่องทำความร้อน/กวนของเซลล์ที่ถูกจัดวางในควันวงกบปรับปรุงเพื่อจำลองสภาวะกลางแจ้ง [16]สำหรับการทดลองในข้อมูลที่ระเหยและการดูดซึมชุมนุม ใช้เซลล์แพร่ฟรานซ์แก้ไขตามที่อธิบายไว้ใน Saiyasombati และ Kasting [19] ส่วนบนของเซลล์ฟรานซ์ประกอบด้วยการทำ 4 mL ผู้บริจาคมีช่องสำหรับอากาศทางเข้าและการเชื่อมต่อเต้าเสียบให้ตลับหมึก Tenax TA (Supelco เซนต์หลุยส์ MO) ที่ทำหน้าที่เป็นกับดักไอน้ำ ห้อง air เป็นอย่างต่อเนื่องลากผ่านท่าเรือเข้าในเซลล์ระเหย ส่งผ่านผิว surface และผ่านตา Tenax ตลับหมึกที่หมดกับดักระเหย DEET ไหลของอากาศนี้ถูกรักษาไว้ที่ประมาณ40 mL/min โดยปั๊มอย่างสากล 224 PCXR4 (SKC แปดสิบสี่PA) เชื่อมต่อไปยังด้านบนของหลอด adsorbent จำแนกลักษณะก่อนหน้าแผนการสุ่มตัวอย่างนี้แสดงให้เห็นว่า อัตราการไหลนี้จำลองประมาณกลางแจ้งสภาพ [16,19] ตลับหมึกและตัวรับระบบแลกเปลี่ยนที่จุดกำหนดยาหลังเวลาในช่วงระยะเวลา 48 ชั่วโมง ในบทสรุปของการทดลอง การเซลล์ระเหยถูกล้าง ด้วย 2 มล.ของเอทานอล 95% การเก็บเกี่ยวDEET ใด ๆ ตกค้าง และตัวทำละลายนี้ถูกรวบรวมวิเคราะห์ นอกจากนี้ผิวตัวอย่างเก็บไว้ และในการแก้ปัญหาเอทานอล 95%สำหรับการวิเคราะห์ ตัวอย่างทั้งหมดได้วิเคราะห์ โดย HPLC

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 ระเหยผิวหนังและการซึมผ่านการศึกษา
ในการศึกษาในหลอดทดลองได้ดำเนินการโดยใช้ฟรานซ์เซลล์แพร่ (0.79 cm2
)
และแยกความหนาของผิวซากศพมนุษย์ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [16].
สั้น ๆ , ช่องรับบรรจุ 4.5 มล Dulbecco ของ
น้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (PBS), พีเอช 7.4 กับ 0.02% โซเดียม azide สารกันบูด
เก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในบล็อกอลูมิเนียมและสนามแม่เหล็ก
กวน การทดสอบการตรวจคัดกรองน้ำ tritiated ถูกใช้ในการยืนยันความสมบูรณ์ของผิว
สร้างความมั่นใจเหมือนเดิมปกติฟังก์ชั่นอุปสรรคสำหรับในหลอดทดลองศึกษาผิว.
ตัวอย่างผิวสวยด้วย 3
H2O ซึมผ่านค่าที่มากกว่า 1.56 ไมโครลิตร / cm2 เป็น
กำหนดโดยนับประกายเหลว (Beckman LS6500) เป็น
ปฏิเสธเป็นซึมเข้าไปมากเกินไป [17] ตัวอย่างอันดับสั่งซื้อ
ขึ้นอยู่กับ 3
ผลการซึมผ่าน H2O และมอบหมายให้การรักษาโดยการสุ่ม
กลุ่ม [18] หลังจากการปรับสมดุลในชั่วข้ามคืนสูตรที่อธิบายไว้
ข้างต้นถูกนำไปใช้กับแต่ละเซลล์ขนาด 3 ไมโครลิตร / มือถือโดยใช้บวก
เปตกระจัดและก้านแก้วก่อนเปียกสำหรับเครื่องแบบแพร่กระจาย.
สำหรับการทดสอบซึ่งในการดูดซึมผิวหนังเพียงอย่างเดียวคือการวัด
ผิว ได้รับการติดตั้งในฟรานซ์เซลล์แพร่พร้อมกับ
ห้องผู้บริจาคที่เปิดออกสู่บรรยากาศและขยายประมาณ
11 มมเหนือพื้นผิว วิธีการแก้ปัญหารับ
จะถูกลบออกสำหรับการวิเคราะห์ HPLC และแทนที่ด้วยบัฟเฟอร์สดที่กำหนดไว้
จุดเวลาเป็นระยะเวลากว่า 24 ชั่วโมง เครื่องทำความร้อน / โมดูลกวน
ที่มีเซลล์ถูกวางไว้ในตู้ดูดควันที่มีสายสะพาย
ปรับเพื่อจำลองสภาพกลางแจ้ง [16].
สำหรับการทดสอบซึ่งทั้งสองระเหยและการดูดซึมข้อมูล
ที่ถูกรวบรวมเซลล์แพร่ฟรานซ์ที่แก้ไขได้ถูกใช้ตามที่อธิบายไว้
ใน Saiyasombati และ Kasting [19] ส่วนบนของเซลล์ฟรานซ์
ประกอบด้วย custom-made 4 มลบริจาคช่องที่มีอากาศ
ที่ไหลเข้าและการเชื่อมต่อกับเต้าเสียบ Tenax TA ตลับหมึก (Supelco, St.
Louis, มิสซูรี) ที่ทำหน้าที่เป็นกับดักไอ อากาศในห้องได้รับการอย่างต่อเนื่อง
วาดผ่านทางพอร์ตขาเข้าในเซลล์ระเหยผ่าน
พื้นผิวและหมดผ่านตลับ Tenax TA เพื่อ
ดักระเหยสาร DEET การไหลของอากาศนี้ถูกเก็บรักษาไว้ที่ประมาณ
40 มิลลิลิตร / นาทีโดยตัวอย่างปั๊มสากล 224 PCXR4 (SKC แปดสิบสี่
PA) ที่เชื่อมต่อไปยังด้านบนของหลอดดูดซับที่ ลักษณะก่อนหน้า
ของโครงการกลุ่มตัวอย่างนี้แสดงให้เห็นว่าอัตราการไหลนี้จะจำลอง
สภาพกลางแจ้งโดยประมาณ [16,19] ตลับหมึกและรับ
การแก้ปัญหาที่มีการแลกเปลี่ยนที่กำหนดไว้จุดเวลาที่โพสต์ยา
ในช่วงระยะเวลา 48 ชั่วโมง ในช่วงท้ายของการทดลองที่
เซลล์ระเหยถูกล้างด้วย 2 มล 95% เอทานอลที่จะเก็บเกี่ยว
DEET ตกค้างและตัวทำละลายนี้ถูกเก็บรวบรวมเพื่อการวิเคราะห์ นอกจากนี้
กลุ่มตัวอย่างที่ผิวถูกเก็บไว้และวางไว้ในการแก้ปัญหาเอทานอล 95%
สำหรับการวิเคราะห์ ตัวอย่างทั้งหมดมาวิเคราะห์โดยวิธี HPLC

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การศึกษาการซึมผ่านผิวหนังการระเหยในหลอดทดลองโดยใช้ Franz diffusion cells จำนวน ( 0.79 ตร. ซม.)ส่วนความหนาของมนุษย์ซากศพผิวตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 16 ]สั้น ๆ จากช่องที่มีอยู่ 4.5 มิลลิลิตรของดัลเบโค่เกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( PBS ) , pH 7.4 กับ 0.02% โซเดียมไซด์สารกันบูด ,ยังคงที่ 37 ° C ในบล็อกอลูมิเนียมและแม่เหล็กคน น้ำ tritiated คัดกรองถูกใช้เพื่อยืนยันความสมบูรณ์ของผิวมั่นใจเป็นเหมือนเดิม ปกติ ฟังก์ชั่น สำหรับอุปสรรคในการศึกษาผิวหลอดหนังตัวอย่างกับ 3H2O ใช้ค่ามากกว่า 1.56 μ L / cm2 เป็นพิจารณาจากข้อมูลสภาพคล่องนับ ( แบคแมน ls6500 ) ได้แก่ปฏิเสธที่มากเกินไป permeable [ 17 ] จำนวนตำแหน่งคำสั่งตาม 3H2O ผ่านผลและวัตถุประสงค์เพื่อการรักษากลุ่ม [ 18 ] วัน equilibration สูตร อธิบายข้างต้นเพื่อประยุกต์ในเซลล์แต่ละเซลล์ในขนาด 3 μ L / เซลล์ , การบวกปิเปตแบบก่อนเปียกและแท่งแก้วสําหรับเครื่องแบบกระจายสำหรับการทดลองที่ transdermal การดูดซึมอยู่วัดผิวหนังที่ถูกติดตั้งใน Franz diffusion เซลล์ พร้อมห้องที่ถูกเปิดจากบรรยากาศและขยายประมาณ11 มม. เหนือผิว รับโซลูชั่นจะถูกลบออกเพื่อการวิเคราะห์ HPLC และแทนที่ด้วยสด บัฟเฟอร์ ที่กําหนดเวลาจุดในช่วง 24 ชั่วโมง . ความร้อน / กวน โมดูลที่ประกอบด้วยเซลล์ที่ถูกวางไว้ในเครื่องดูดควันควันกับสายสะพายปรับเพื่อจำลองสภาพกลางแจ้ง [ 16 ]สำหรับการทดลองที่ 2 ข้อมูลการระเหยการดูดซึมรวบรวม , แก้ไขฟรานซ์การแพร่กระจายเซลล์ถูกใช้อธิบายและใน saiyasombati แค้สติ้ง [ 19 ] ส่วนด้านบนของเซลล์ ฟรานซ์ประกอบด้วย 4 มิลลิลิตร โดยผู้บริจาคช่องกับอากาศปากน้ำและการเชื่อมต่อออกถึงตลับทาทีแนค ( supelco St .Louis , MO ) ที่แสดงเป็นไอน้ำ กับดัก อากาศในห้องกำลังอย่างต่อเนื่องวาดผ่านทางเข้าท่าเรือในการระเหยของเซลล์ผ่านพื้นผิวของผิวหนังและทาตลับให้หมดผ่าน surigaoensisกับดักระเหย DEET . นี้ให้ไว้ที่ประมาณ40 มิลลิลิตรต่อนาที โดย 224-pcxr4 สากลตัวอย่างปั๊ม ( SKC แปดสิบสี่pa ) เชื่อมต่อกับด้านบนของตัวดูดซับ หลอด การศึกษาก่อนหน้าตัวอย่างของโครงการนี้พบว่าอัตราการไหลนี้จำลองโดยประมาณสระเงื่อนไข [ 16,19 ] ตลับและตัวรับโซลูชั่นถูกแลกเปลี่ยนที่กำหนดปริมาณเวลาจุด โพสต์ในระหว่างระยะเวลา 48 ชั่วโมง . ที่สรุปจากการทดลองการระเหยเซลล์ถูกล้างด้วย 2 มิลลิลิตรเอทานอล 95% เก็บเกี่ยวใด ๆตกค้าง DEET และตัวทำละลายนี้ รวบรวมข้อมูลเพื่อการวิเคราะห์ นอกจากนี้ตัวอย่างหนังถูกเก็บไว้และวางไว้ในสารละลายเอทานอล 95%สำหรับการวิเคราะห์ ตัวอย่างวิเคราะห์โดย HPLC