(r = 0.9750). The results were expressed in mg vitamin C equivalent
antioxidative capacity per gram dry weight (mg VCEAC/g DW).
2.7. Determination of ferric reducing/antioxidant power assay (FRAP)
The antioxidant activity of the extract was also evaluated using
FRAP assay with some modification to the method of Benzie and
Strain (1999). FRAP reagent was prepared in acetate buffer
(300 mM acetate buffer and adjusted pH to 3.6 by acetic acid and
made up to 100 ml), 10 mM TPTZ solution in 40 mM HCl and
20 mM iron (III) chloride solution and 300 mM acetate buffer in
the proportion of 1:1:10 (v/v), respectively. The FRAP reagent
was prepared fresh daily and warmed to 37 C in an oven prior
to use. A total of 30 ll sample extract was added to 270 ll of the
FRAP reagent, mixed well and incubated for 30 min. The absorbance
was measured at 595 nm using a microplate reader spectrophotometer
(Synergy HT, BiotTek instruments, USA). Samples
were measured in triplicates. A standard curve of iron (II) sulfate
solution (0–500 lm) was Y = 0.001X + 0.211 (r = 0.9910). The
results were expressed as millimole ferrous ion per gram dry
weight (mmol Fe(II)/g DW).
2.8. ABTS+ scavenging assay
The ABTS cation radical scavenging assay was carried out with
some modifications to the previous method (Seeram et al., 2006).
To prepare 20
,20
-azinobis(3-ethylbenzothiazline-6-sulfonic acid)
diammonium salt (ABTS+
) radical cations, 2.6 mM potassium persulphate
was added to 7.4 mM aqueous stock solution of ABTS+ in
the proportion of 1:1 (v/v). The mixture was thoroughly mixed and
allowed to stand for 12 h prior to use. Trolox was used as an antioxidant
standard in the range of 0–500 lm. A total of 10 ll sample
extract was added to 190 ll of ABTS+ radical cation solution, well
mixed and incubated for 2 h. The absorbance was measured at
595 nm using a microplate reader spectrophotometer (Synergy
HT, BiotTek instruments, USA). Samples were assayed in triplicates.
TEAC values were calculated from the Trolox standard curve and
expressed in millimol Trolox equivalent antioxidative capacity
per gram dry weight (mmol TEAC/g DW).
2.9. Statistical analyses
Triplicates were used for each treatment. Results were
expressed as means ± standard deviation (SD). The significant differences
between means were calculated by a one-way analysis
of variance (ANOVA) using Duncan’s multiple-range test at
p < 0.05. In order to determine the contribution of bioactive
compounds to the antioxidant capacity, Pearson’s correlation
coefficients were calculated, at 1% and 5% probability, using the
Student’s t test for all variables.
3.
(r = 0.9750) ผลการวิจัยแสดงในมก. วิตามินซีเท่ากับ
กำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระต่อกรัมน้ำหนักแห้ง (มก VCEAC / กรัม DW).
2.7 การวิเคราะห์หาปริมาณธาตุเหล็กลดอำนาจการทดสอบ / สารต้านอนุมูลอิสระ (FRAP)
ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดถูกประเมินยังใช้
ทดสอบ FRAP กับการปรับเปลี่ยนบางอย่างเพื่อให้วิธีการ Benzie และ
สายพันธุ์ (1999) น้ำยา FRAP ถูกจัดทำขึ้นในบัฟเฟอร์อะซิเตท
(300 มิลลิบัฟเฟอร์อะซิเตทและการปรับค่า pH 3.6 โดยกรดอะซิติกและ
ทำถึง 100 มล.), 10 มิลลิแก้ปัญหา TPTZ ใน 40 มิลลิ HCl และ
20 มมเหล็ก (III) สารละลายคลอไรด์และ 300 มิลลิบัฟเฟอร์อะซิเตท ใน
สัดส่วน 1: 1: 10 (v / v) ตามลำดับ น้ำยา FRAP
ได้ถูกจัดทำสดใหม่ทุกวันและอบอุ่นถึง 37 C ในเตาอบก่อน
ที่จะใช้ รวม 30 LL สารสกัดจากตัวอย่างถูกบันทึกอยู่ใน 270 LL ของ
สาร FRAP ผสมดีและบ่มเป็นเวลา 30 นาที การดูดกลืนแสง
วัดที่ 595 นาโนเมตรโดยใช้ผู้อ่าน microplate Spectrophotometer
(Synergy HT, เครื่องมือ BiotTek สหรัฐอเมริกา) ตัวอย่าง
อยู่ในวัด triplicates กราฟมาตรฐานของเหล็ก (II) ซัลเฟต
การแก้ปัญหา (0-500 LM) เป็น Y = 0.001X + 0.211 (r = 0.9910)
ผลการวิจัยแสดงเป็นไอออนเหล็ก millimole ต่อกรัมแห้ง
น้ำหนัก (mmol Fe (II) / กรัม DW).
2.8 ทดสอบ ABTS + ไล่
ไอออน ABTS ทดสอบต้านอนุมูลถูกดำเนินการที่มี
การปรับเปลี่ยนบางอย่างเพื่อให้วิธีการก่อนหน้า (Seeram et al., 2006).
เพื่อเตรียมความพร้อม 20
, 20
-azinobis (กรด 3 ethylbenzothiazline-6-sulfonic)
เกลือ Diammonium (ABTS +
) ไพเพรุนแรง 2.6 มิลลิโพแทสเซียมเปอร์ซัลเฟต
ถูกบันทึกอยู่ใน 7.4 มิลลิสารละลายน้ำของ ABTS + ใน
สัดส่วน 1: 1 (v / v) ส่วนผสมเป็นผสมอย่างทั่วถึงและ
ได้รับอนุญาตให้ยืนเป็นเวลา 12 ชั่วโมงก่อนที่จะใช้ Trolox ถูกใช้เป็นสารต้านอนุมูลอิสระ
มาตรฐานในช่วง 0-500 LM รวม 10 LL ตัวอย่าง
สารสกัดถูกเพิ่มเข้ามาถึง 190 LL ของ ABTS + แก้ปัญหาไอออนบวกหัวรุนแรงดี
ผสมและบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมง การดูดกลืนแสงวัดที่
595 นาโนเมตรโดยใช้ผู้อ่าน microplate Spectrophotometer (Synergy
HT, เครื่องมือ BiotTek สหรัฐอเมริกา) ตัวอย่าง assayed ใน triplicates.
ค่า TEAC จะถูกคำนวณจากกราฟมาตรฐาน Trolox และ
แสดงออกใน millimol Trolox ความจุเทียบเท่าต้านอนุมูลอิสระ
ต่อกรัมน้ำหนักแห้ง (mmol TEAC / กรัม DW).
2.9 สถิติวิเคราะห์
Triplicates ถูกนำมาใช้ในการรักษาแต่ละ ผลลัพธ์ที่ได้
แสดงเป็นหมายถึง±ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐาน (SD) ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ
ระหว่างวิธีการนี้จะถูกคำนวณโดยการวิเคราะห์ทางเดียว
ของความแปรปรวน (ANOVA) ใช้การทดสอบหลายช่วงของดันแคนที่
p <0.05 เพื่อตรวจสอบผลงานของออกฤทธิ์ทางชีวภาพ
ของสารให้สารต้านอนุมูลอิสระ, เพียร์สันความสัมพันธ์
นี้จะถูกคำนวณค่าสัมประสิทธิ์ที่ 1% และน่าจะเป็น 5% โดยใช้
การทดสอบค่าทีนักศึกษาสำหรับตัวแปรทั้งหมด.
3
การแปล กรุณารอสักครู่..

( r = 0.9750 ) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงออกในวิตามิน C
ความจุเทียบเท่าสารต่อน้ำหนักแห้งกรัม ( มิลลิกรัม / กรัม vceac DW ) .
2.7 . การหาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระลด / พลัง ( เฟอร์ ( VDO )
ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดยังประเมินการใช้ Frap
ตรวจสอบด้วยการแก้ไขบางส่วนและวิธีการ benzie
เมื่อย ( 1999 ) ใช้ Frap
เตรียมในบัพเฟอร์อะซิเตต( อะซิเตทบัฟเฟอร์ 300 มม. และปรับ pH 3.6 โดยกรด
ขึ้นเพื่อ 100 ml ) 10 มิล tptz สารละลาย HCl และ
40 มม. 20 มม. เหล็ก ( III ) สารละลายบัฟเฟอร์อะซิเตตคลอไรด์และ 300 มม.
สัดส่วนของ 1:1:10 ( V / V ) ตามลำดับ ใช้ Frap
ที่เตรียมสดใหม่ทุกวัน และเปิดถึง 37 องศาเซลเซียส ในเตาอบก่อน
ใช้ . รวมสารสกัดตัวอย่าง 30 จะถูกเพิ่ม 270 จะของ
VDO รีเอเจนต์ผสมและบ่มเป็นเวลา 30 นาที น
เป็นวัดที่ 595 nm ใช้เครื่อง Spectrophotometer
( พื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( HT , biottek เครื่องมือ , USA ) ตัวอย่าง
จำนวน 3 ซ้ำ . เส้นโค้งมาตรฐานของเหล็ก ( II ) สารละลายซัลเฟต
( 0 – 500 LM ) คือ Y = 0.001x 0.211 ( r = 0.9910 )
ผลแสดงเป็นไอออนมิลลิโมลเฟอร์ต่อน้ำหนักแห้ง
กรัม ( มิลลิโมล Fe ( II ) / g DW ) .
2.8 .Abbr scavenging assay
Abbr การใช้เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาได้ดำเนินการกับ
บางอย่างเพื่อปรับเปลี่ยนวิธีการเดิม ( ซีราม et al . , 2006 ) .
เตรียม 20
20
- azinobis ( 3-ethylbenzothiazline-6-sulfonic acid )
diammonium เกลือ ( Abbr
) หัวรุนแรงไอออนโพแทสเซียม 2.6 มม. persulphate
คือเพิ่ม 7.4 มม. โดยโซลูชั่นหุ้นของ Abbr ในสัดส่วน 1 : 1
( v / v )ส่วนผสมที่ผสมอย่างทั่วถึงและ
อนุญาตให้ยืนเป็นเวลา 12 ชั่วโมงก่อนที่จะใช้ สาร ที่ใช้เป็นมาตรฐานสารต้านอนุมูลอิสระ
ในช่วง 0 - 500 ไมโครเมตร รวมสารสกัดตัวอย่าง
10 จะเพิ่ม 190 จะรุนแรงใน Abbr โซลูชั่นดี
ผสมบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมง นวัดที่
595 nm ใช้พื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( อ่าน Spectrophotometer (
biottek HT , เครื่องมือ , USA )ซีรั่มจำนวน 3 ซ้ำ
Teac ค่าคำนวณจากสารมาตรฐานเส้นโค้งและ
) สารต้าน
เทียบเท่าความจุมิลลิโมห์ต่อน้ำหนักแห้งกรัม ( mmol / g Teac DW ) .
2.9 . สถิติที่ใช้วิเคราะห์
ล้อมสำหรับการรักษาแต่ละ ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็น หมายถึง ±
ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน ( SD )
ความแตกต่างระหว่างวิธีการคำนวณโดย
การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว ( ANOVA ) โดยใช้ Multiple Range test ดันแคนที่
p < 0.05 เพื่อตรวจสอบส่วนสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพของสารประกอบในสารต้านอนุมูลอิสระ
,
) คำนวณค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ของเพียร์สันค่าสัมประสิทธิ์ที่ 1% และความน่าจะเป็น 5% โดยใช้การทดสอบ t
ของนักศึกษา 2 .
3
การแปล กรุณารอสักครู่..
