Accurate determination of live, dead, and total bacteria is important in many
microbiology applications. Traditionally, viability in bacteria is synonymous with the
ability to form colonies on solid growth medium and to proliferate in liquid nutrient
broths. These traditional, culture-based tests are time-consuming and can work poorly
with slow-growing or viable, but non-culturable organisms. They do not provide
real-time results or timely information that is needed in applications such as industrial
manufacturing
Flow cytometry, a technique first applied to eukaryotic cells, has been adapted to the
analysis of viability, metabolic state, and antigenic markers of bacteria.1-4 In particular,
flow cytometry can be readily applied to the enumeration of viable bacteria in a sample.
Live cells have intact membranes and are impermeable to dyes such as propidium iodide
(PI), which only leaks into cells with compromised membranes. Thiazole orange* (TO)
is a permeant dye and enters all cells, live and dead, to varying degrees. With
gram-negative organisms, depletion of the lipopolysaccharide layer with EDTA greatly
facilitates TO uptake. Thus a combination of these two dyes provides a rapid and
reliable method for discriminating live and dead bacteria. If enumeration of the bacteria
is important, BD Liquid Counting Beads (BD Biosciences, San Jose, CA), a flowcytometry bead standard, can be used to accurately quantify the number of live, dead,
and total bacteria in a sample.
การกำหนดความถูกต้องของชีวิต , ตาย , และแบคทีเรียทั้งหมดที่สำคัญในงานจุลชีววิทยา มากมาย
ประเพณีชีวิตในแบคทีเรียคือตรงกันกับความสามารถในการสร้างอาณานิคมบน
ปานกลางการเจริญเติบโตที่มั่นคงและ proliferate ในสารอาหารเหลว
า . เหล่านี้แบบดั้งเดิม วัฒนธรรมตามการทดสอบจะใช้เวลานาน และอาจทำงานได้ไม่ดี
กับการเติบโตช้าหรือทำงานได้ แต่ไม่ culturable สิ่งมีชีวิตพวกเขาไม่ได้ให้ข้อมูลทันเวลา
เรียลไทม์หรือผลที่จำเป็นในการใช้งาน เช่น อุตสาหกรรมผลิตไหล
( เป็นเทคนิคแรกที่ใช้กับยูคาริโอติกเซลล์ ได้ถูกดัดแปลงเพื่อ
การวิเคราะห์ความมีชีวิตของการเผาผลาญ และเครื่องหมายของรัฐ การศึกษา bacteria.1-4 โดยเฉพาะ
เครื่องนับเซลล์สามารถใช้พร้อมกับการ ใช้แบคทีเรียในตัวอย่าง .
เซลล์มีเยื่อหุ้มอยู่เหมือนเดิม และที่ไม่ได้ย้อม เช่น propidium ไอโอไดด์
( PI ) ซึ่งจะถูกรั่วไหลลงเซลล์ที่มีเยื่อ ไทอะโซลส้ม * ( ต่อ )
เป็นสี permeant และเข้าสู่ทุกเซลล์มีชีวิตและตายเพื่อองศาที่แตกต่าง . กับ
และสิ่งมีชีวิต การพร่องของสีดำเข้มชั้นด้วย EDTA อย่างมาก
อำนวยความสะดวกในการใช้ .ดังนั้นการรวมกันของทั้งสองสีให้อย่างรวดเร็วและวิธีการที่เชื่อถือได้เพื่อจำแนก
อยู่และตาย แบคทีเรีย ถ้าแจงแบคทีเรีย
สำคัญ BD เหลวนับลูกปัด ( BD BIOSCIENCES , San Jose , CA ) , โฟลไซโทเมทรีลูกปัดมาตรฐานสามารถใช้อย่างถูกต้องวัดจำนวนของชีวิต , ตาย ,
และแบคทีเรียทั้งหมดในตัวอย่าง
การแปล กรุณารอสักครู่..