2.8. Fluorescence microscopic exami

2.8. Fluorescence microscopic examination
The morphological characterisation of HT-29 cells was performed
by using propidium iodide (PI) and acridine orange (AO)
double staining according to the method described by Ng et al.
(2013) and observed under a fluorescence microscope. Briefly,
HT-29 cells were plated at a density of 1  106 cells/ml in a
25 ml culture flask and treated with the IC50 concentration of
WTE determined from MTT assay at varying time points of incubation.
The cells were incubated in an atmosphere of 5% CO2 at 37 C
for 8, 12 and 24 h. Then the cells were harvested and washed twice
using PBS after centrifuging at 1800 rpm for 5 min to remove the
remaining media. An equal volume of fluorescent dye (AO/PI) containing
AO (10 lg/ml) and PI (10 lg/ml) were added to the cellular
pellet and freshly stained cells were observed under a UVfluorescence
microscope within 30 min before the fluorescence
colour started to fade.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.8 การ fluorescence ตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ทำการตรวจลักษณะเฉพาะของของเซลล์เอชที-29โดยไอโอไดด์ propidium (PI) และ acridine orange (อ่าว)คู่ย้อมสีตามวิธีที่อธิบายโดย Ng et al(2013) และสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์ fluorescence สั้น ๆเซลล์เอชที-29 ถูกชุบที่ความหนาแน่นของเซลล์ 1 106 ml ในการ25 ml วัฒนธรรมหนาว และรักษา ด้วย IC50 ความเข้มข้นของWTE กำหนดจาก MTT assay ณจุดเวลาต่าง ๆ ของคณะทันตแพทยศาสตร์เซลล์ถูก incubated ในบรรยากาศ 5% CO2 ที่ 37 C8, 12 และ 24 h เซลล์ถูกเก็บเกี่ยว แล้วล้างสองครั้งใช้ PBS หลัง centrifuging ที่ 1800 rpm สำหรับ 5 นาทีในการเอาการสื่อที่เหลือ มีปริมาตรเท่าประกอบด้วยสีเรืองแสง (อ่าว/PI)อ่าว (10 lg/ml) และพาย (10 lg/มล.) จะเคลื่อนเม็ดและสดทิ้งคราบเซลล์ที่สังเกตภายใต้การ UVfluorescenceภายใน 30 นาทีก่อนการ fluorescence กล้องจุลทรรศน์สีเริ่มจาง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.8 . โดยศึกษาลักษณะทางสัณฐานวิทยาของกล้องจุลทรรศน์

ht-29 เซลล์ได้โดยใช้ propidium ไอโอไดด์ ( PI ) และเรือโว้ย ( อ่าว )
4 คู่ตามวิธีการที่อธิบายโดย NG et al .
( 2013 ) และสังเกตการภายใต้กล้องจุลทรรศน์ สั้น ๆ ,
ht-29 เซลล์มีการชุบที่ความหนาแน่น 1  106 เซลล์ / มิลลิลิตรใน
25 ml ขวดวัฒนธรรมและปฏิบัติกับ ic50 ความเข้มข้นของ MTT assay
wte กำหนดจากจุดของเวลาที่แตกต่างกัน 4 .
เซลล์ถูกบ่มในบรรยากาศของ CO2 ร้อยละ 5 ที่ 37  C
8 , 12 และ 24 ชั่วโมง จากนั้นเซลล์เก็บล้างสองครั้ง
ใช้ PBS หลังจากวรรณนาที่ 1800 รอบต่อนาที 5 นาทีเพื่อลบ
เหลือสื่อ ปริมาณเท่ากับสีเรืองแสง ( อ่าว / pi
) ที่มีอ่าว ( 10 LG / มิลลิลิตร ) และพี ( 10 ) ต่อมิลลิลิตร ) มีการเพิ่มของเซลล์เม็ดสีและเซลล์ใหม่

uvfluorescence พบภายใต้กล้องจุลทรรศน์ภายใน 30 นาทีก่อนที่จะเรืองแสง
สีเริ่มจางหาย