AFLP AnalysisAFLP, or Amplified Fra

AFLP Analysis
AFLP, or Amplified Fragment Length Polymorphism, is a DNA fingerprinting technique which detects multiple DNA restriction fragments by means of PCR amplification. The AFLP technology usually comprises of the following steps:
•the restriction of the DNA with two restriction enzymes, preferably a hexa-cutter and a tetra-cutter;
•the ligation of double-stranded adapters to the ends of the restriction fragments;
•the amplification of a subset of the restriction fragments using two primers complementary to the adapter and restriction site sequences, and extended at their 3' ends by "selective" nucleotides (Figures 1 and 2);
•gel electrophoresis of the amplified restriction fragments on denaturing slab gels or capillaries;
•the visualization of the DNA fingerprints by means of auto-radiography, phospho-imaging, or other methods.


















The amplification primers, known as AFLP primers, are generally 17 - 21 nucleotides in length and anneal perfectly to their target sequences; i.e. the adapter and restriction sites, and a small number of nucleotides adjacent to the restriction sites (Figure 2). This renders AFLP a very reliable and robust technique, which is unaffected by small variations in amplification parameters (e.g. thermal cyclers, template concentration, PCR cycle profile).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การวิเคราะห์ AFLPAFLP หรือขยายส่วนความยาวโพลิมอร์ฟิซึม เป็น DNA fingerprinting เทคนิคซึ่งตรวจพบชิ้นส่วนจำกัดดีเอ็นเอหลาย โดยปลัก เทคโนโลยี AFLP มักจะประกอบด้วยขั้นตอนต่อไปนี้:•the ข้อจำกัดของดีเอ็นเอด้วยเอนไซม์จำกัดสอง ควรเป็นเฮกซ่า-เครื่องตัด และเครื่องเตตร้า ตัด•the ligation ควั่นคู่อะแดปเตอร์ไปยังปลายของส่วนของข้อจำกัดขยาย •the ของชุดย่อยของข้อจำกัดที่ชิ้นส่วนโดยใช้ไพรเมอร์สองการลำดับไซต์การ์ดและจำกัด และขยายที่ปลาย 3' ของนิวคลีโอไทด์ "เลือก" (ตัวเลข 1 และ 2);อิ •gel ของส่วนขยายข้อจำกัดบน denaturing แผ่นเจลหรือฝอยแสดง •the ของดีเอ็นเอการบันทึกลายนิ้วมือ โดยอัตโนมัติ radiography, phospho-ภาพ หรือวิธีการอื่น ๆไพรเมอร์ขยาย เรียกว่าไพรเมอร์ AFLP มักมีนิวคลีโอไทด์ 17-21 ยาว และหลอมอย่างสมบูรณ์ให้ลำดับของพวกเขาเป้าหมาย เช่นไซต์การ์ดและจำกัด และจำนวนนิวคลีโอไทด์ที่อยู่ติดกับจำกัด (รูป 2) นี้ทำ AFLP มากเชื่อถือได้ และแข็งแกร่งเทคนิค ซึ่งได้รับผลกระทบ โดยการแตกขยายพารามิเตอร์ (แบกแพคเช่นความร้อน ความเข้มข้นของแม่ PCR วงจรโปรไฟล์)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

AFLP วิเคราะห์
AFLP หรือขยายความยาวส่วนความแตกต่างเป็นเทคนิคการพิมพ์ลายนิ้วมือดีเอ็นเอที่ตรวจพบชิ้นส่วนข้อ จำกัด หลายดีเอ็นเอโดยใช้วิธีการขยาย PCR เทคโนโลยี AFLP
มักจะประกอบด้วยขั้นตอนดังต่อไปนี้•ข้อจำกัด ของดีเอ็นเอที่มีสองเอนไซม์ข้อ จำกัด โดยเฉพาะอย่างเฮกซ่าตัดและ Tetra ตัด;
• ligation ของอะแดปเตอร์เกลียวคู่ไปจนสุดปลายของชิ้นส่วนข้อ จำกัด
นั้นได้• การขยายของส่วนหนึ่งของชิ้นส่วนข้อ จำกัด การใช้สองไพรเมอร์ประกอบกับอะแดปเตอร์และลำดับเว็บไซต์ข้อ จำกัด และขยายที่ 3 ของพวกเขาจบลงโดยนิวคลีโอ "เลือก" (1 ตัวเลขและ 2)
•ข่าวคราวของชิ้นส่วนข้อ จำกัด ขยายบนแผ่น denaturing เจลหรือเส้นเลือดฝอย;
•การสร้างภาพของลายนิ้วมือดีเอ็นเอโดยใช้วิธีการอัตโนมัติการถ่ายภาพรังสี, phospho ถ่ายภาพหรือวิธีการอื่น ๆ . ไพรเมอร์ขยายที่เรียกว่าไพรเมอร์ AFLP โดยทั่วไป 17-21 นิวคลีโอในความยาวและหลอมอย่างดีเพื่อลำดับเป้าหมายของพวกเขา ; เช่นอะแดปเตอร์และเว็บไซต์ข้อ จำกัด และจำนวนเล็ก ๆ ของนิวคลีโอที่อยู่ติดกับข้อ จำกัด เว็บไซต์ (รูปที่ 2) นี้ทำให้ AFLP เทคนิคน่าเชื่อถือมากและมีประสิทธิภาพซึ่งเป็นผลกระทบจากการเปลี่ยนแปลงเล็ก ๆ ในการขยายพารามิเตอร์ (เช่น cyclers ความร้อนเข้มข้นแม่แบบรายละเอียดรอบ PCR)