2.9. Antioxidant activity by DPPH a

2.9. Antioxidant activity by DPPH assay

The DPPH radical scavenging activity of samples was measured according to a slightly modified method (Yamaguchi et al., 1998). Samples were subjected to determine the least concentration of radical scavenging. Each sample solution (0.5 ml) was added to 1 ml of a freshly prepared 0.1 mM DPPH solution dissolved in methanol. The sample was mixed and incubated in the dark at room temperature for 30 min. Absorbance of the sample was measured at 517 nm using a spectrophotometer against a control. The radical scavenging of DPPH was calculated by using the formula below: Radical scavenging activity (%)=[1−(Abs. sample/Abs. control)]×100. Then results were expressed as an IC50 value, which is the concentration of the extract that scavenges 50% of the DPPH radical scavenging activity.

2.10. Estimation of molecular mass of sericin proteins by SDS-PAGE

The molecular mass of sericin proteins was estimated by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). The separating gel and staking gel were 12.5% and 5%, respectively. The sample solution was mixed with 2x buffer and heated in hot water, then sample was loaded into the well. The electric current of 150 V, 50 mA was applied to the gel. At the end of electrophoresis, the gel was stained with silver staining technique. Standard molecular mass marker was applied for estimating the molecular mass.

2.11. Statistical analysis

All experiments were performed in triplicate and the results were expressed as mean±standard deviation (SD). One-way ANOVA using SPSS software was used to compare the mean values of each treatment. Significant differences (p

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.9 กิจกรรมสารต้านอนุมูลอิสระ ด้วย DPPH assayDPPH scavenging กิจกรรมรุนแรงอย่างโดยวัดตามวิธีการแก้ไขเล็กน้อย (ยามางูจิ et al. 1998) ตัวอย่างถูกต้องเพื่อตรวจสอบความเข้มข้นน้อยของ scavenging รุนแรง 1 มิลลิลิตรของ DPPH แสนอร่อย 0.1 mM ละลายในเมทานอลถูกแก้ปัญหาแต่ละอย่าง (0.5 มล.) ตัวอย่างผสม และได้รับการกกในมืดอุณหภูมิห้องสำหรับ 30 นาทีค่าตัวอย่างโดยวัดที่ 517 nm ใช้สเปคกับตัวควบคุม Scavenging รุนแรงของ DPPH คำนวณ โดยใช้สูตรด้านล่าง: กิจกรรม scavenging รุนแรง (%) = [1− (ตัวควบคุมตัวอย่าง/วันหยุดตามวันหยุดตาม)] × 100 แล้ว ผลลัพธ์ถูกแสดงเป็นค่า IC50 ซึ่งเป็นความเข้มข้นของสารสกัดที่ scavenges 50% ของกิจกรรมการ scavenging อนุมูล DPPH2.10. การประมาณค่าของมวลโมเลกุลของโปรตีนทองบริสุทธิ์โดย SDS-หน้ามวลโมเลกุลของโปรตีนทองบริสุทธิ์ประมาณ โดยโซเดียม dodecyl ซัลเฟตตรวจสอบวิเคราะห์อิ (SDS-หน้า) แยกเจและปักหลักเจได้ 12.5% และ 5% ตามลำดับ อุ่นในน้ำร้อน และผสมกับ 2 x บัฟเฟอร์สารละลายตัวอย่าง แล้วอย่างถูกโหลดลงในดี กระแสไฟฟ้า 150 V, 50 mA กับเจ ปลายอิ เจถูกย้อม ด้วยเทคนิคการย้อมสีเงิน มีใช้เครื่องหมายมวลโมเลกุลมาตรฐานสำหรับการประเมินมวลโมเลกุล2.11. สถิติวิเคราะห์ดำเนินการทดลองทั้งหมดลข้อ และผลลัพธ์ถูกแสดงเป็น mean±standard ค่าเบี่ยงเบน (SD) ทางเดียว ANOVA โดยใช้ซอฟต์แวร์ SPSS ถูกใช้เพื่อเปรียบเทียบค่าเฉลี่ยของการรักษาแต่ละ ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.05) ระหว่างที่ดำเนินการ โดยใช้หลายช่วงทดสอบของ Duncan

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.9 ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ DPPH โดยการทดสอบ

DPPH กิจกรรมต้านอนุมูลอิสระของกลุ่มตัวอย่างได้รับการวัดตามวิธีการแก้ไขเล็กน้อย (ยามากูชิ et al., 1998) ตัวอย่างที่ถูกยัดเยียดให้ตรวจสอบความเข้มข้นน้อยที่สุดของการไล่หัวรุนแรง วิธีการแก้ปัญหาแต่ละตัวอย่าง (0.5 มล.) ถูกบันทึกอยู่ใน 1 มิลลิลิตรของปรุงสดใหม่ 0.1 วิธีการแก้ปัญหามิลลิ DPPH ละลายในเมทานอล กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการผสมและบ่มในที่มืดที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที การดูดกลืนแสงของกลุ่มตัวอย่างได้รับการวัดที่ 517 นาโนเมตรโดยใช้สเปกกับการควบคุม ไล่รุนแรงของ DPPH ที่คำนวณได้จากสูตรดังต่อไปนี้กิจกรรมไล่หัวรุนแรง (%) = [1- (ABS ตัวอย่าง / Abs ควบคุม..)] × 100 จากนั้นผลการวิจัยแสดงเป็นค่า IC50 ซึ่งเป็นความเข้มข้นของสารสกัดที่ scavenges 50% ของกิจกรรม DPPH ในหัวรุนแรง.

2.10 การประมาณค่ามวลโมเลกุลของโปรตีนเซริซินโดยวิธี SDS-PAGE

มวลโมเลกุลของโปรตีนเซริซินได้รับการประเมินโดยโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) เจลเจลแยกและปักหลักอยู่ที่ 12.5% และ 5% ตามลำดับ วิธีการแก้ปัญหาของกลุ่มตัวอย่างได้รับการผสมกับบัฟเฟอร์ 2x และให้ความร้อนในน้ำร้อนแล้วตัวอย่างถูกโหลดลงได้เป็นอย่างดี กระแสไฟฟ้า 150 V, 50 mA ถูกนำไปใช้เจล ในตอนท้ายของอิเลคเจลที่ถูกย้อมด้วยเทคนิคการย้อมสีเงิน มาตรฐานเครื่องหมายมวลโมเลกุลถูกนำมาใช้สำหรับการประเมินมวลโมเลกุล.

2.11 การวิเคราะห์สถิติ

การทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่าและผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (SD) One-way ANOVA โดยใช้ซอฟต์แวร์โปรแกรม SPSS ถูกใช้ในการเปรียบเทียบค่าเฉลี่ยของการรักษาแต่ละครั้ง ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (p <0.05) หมายถึงการได้รับการพิจารณาโดยใช้แบบทดสอบช่วงของดันแคนหลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.9 . ฤทธิ์ต้าน dpph โดยการทดสอบที่เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา dpph กิจกรรมตัวอย่างได้ตามวิธีการแก้ไขเล็กน้อย ( ยามากุจิ et al . , 1998 ) ตัวอย่างจะถูกตรวจสอบความเข้มข้นน้อยที่สุดของการเป็นตัวเร่งปฏิกิริยา . แต่ละตัวอย่างสารละลาย ( 0.5 ml ) คือเพิ่ม 1 มิลลิลิตรของสารละลาย 0.1 มม. เตรียมสด dpph ละลายในเมทานอล ตัวอย่างผสมบ่มในที่มืดอุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที ค่าการดูดกลืนแสงของตัวอย่างถูกวัดที่ 517 nm ใช้วัสดุกับการควบคุม เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาของ dpph โดยใช้สูตรด้านล่าง : เป็นตัวเร่งปฏิกิริยากิจกรรม ( % ) = [ − 1 ( ABS ตัวอย่าง / ABS ควบคุม ] × 100 แล้วผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็น ic50 ค่า ซึ่งมีความเข้มข้นของสารสกัดอย่างมีนัยสำคัญ 50% ของ dpph เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาในกิจกรรม2.10 . การประมาณค่าของมวล โมเลกุลของโปรตีนโปรตีนด้วย SDS-PAGEมวลโมเลกุลของโปรตีนซิริซินถูกประมาณโดยโซเดียมโดเดซิลซัลเฟตโพลีอะคริลาไมด์เจลอิเลคโตรโฟรีซีส ( SDS-PAGE ) การแบ่งมอบ เจลเป็นเจลและ 12.5% และ 5% ตามลำดับ ตัวอย่างสารละลายผสมกับบัฟเฟอร์ 2x และอุ่นในน้ำร้อน แล้วก็ตัวอย่างถูกโหลดเข้าไปด้วย กระแสไฟฟ้า 150 V มา 50 จะใช้เจล ในตอนท้ายของตัวอย่าง เจลที่เปื้อนคราบสีเงิน ) มาตรฐานที่ใช้สำหรับประเมินเครื่องหมายโมเลกุลมวลมวลของโมเลกุล2.11 . สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลทั้งหมดทดลองทั้งสามใบ และผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็น±ค่าเฉลี่ย ค่าความเบี่ยงเบนมาตรฐาน ( SD ) การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียว การใช้โปรแกรม SPSS ใช้เปรียบเทียบค่าของการรักษาแต่ละ ความแตกต่างทางสถิติ ( P < 0.05 ) ระหว่างวิธีวิเคราะห์โดยใช้แบบทดสอบช่วงดันแคน .