2. Experimental
2.1. Materials
Dry fruit of Gardenia jasminoides Ellis was purchased from the local market
in Nakhon Pathom, Thailand. Geniposide (as white powders) was purchased
from Shaanxi Taiji Huqing Technology Co., Ltd. (Shaanxi, China). Genipin (as
crystal-like powders, reagent grade) was obtained from Challenge Bioproducts Co.,
Ltd. (Taichung, Taiwan). Commercial cellulase from Aspergillus niger (EC 3.2.1.4,
1.3 U/mg) was from Sigma (St. Louis, MO, USA). All other chemicals were of analytical
grade from Merck (Darmstadt, Germany). Distilled water was used to prepare
all solutions.
2.2. Enzyme-assisted extraction and optimization
Dry gardenia fruit was finely ground and sieved through 150 mesh. The resulting
powder was then dried at 50 ◦C for 12 h and kept in a desiccator until used.
To perform the enzyme-assisted extraction and investigate the optimal conditions,
cellulase was prepared as the solutions in 50 mM citric acid-NaOH buffer
with different pH (3, 3.5, 4, 4.5 and 5) at various enzyme concentrations (2.5, 5, 10
and 50 mg/mL). To 100 mg of dry plant powder placed in a 2 mL microcentrifuge
tube, 1.5 mL of the enzyme solution was added by using micropipettes (Finnpipette,
Finland). The reaction was shaken on a shaking incubator (Optic ivymen system,
Spain) at 300 rpm for a period of time (12, 18, 24, 30 and 36 h) at 50 ◦C. After the
treatment, the suspension was centrifuged (Microfuge 16, Germany) at 14,500×g
2. ทดลอง2.1. วัสดุผลไม้แห้งของพุดเอลลิสที่ซื้อจากตลาดท้องถิ่นในนครปฐม ไทย ร้าน Geniposide (เป็นผงสีขาว)จากมณฑลส่านซี Taiji Huqing Technology Co., Ltd. (มณฑลส่านซี จีน) Genipin (เป็นผงคริสตัลเหมือน รีเอเจนต์เกรด) ได้รับจากความท้าทาย Bioproducts Co.จำกัด (ไทจง ไต้หวัน) Cellulase พาณิชย์จาก Aspergillus ไนเจอร์ (EC 3.2.1.41.3 U/mg) จากซิก (St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) สารเคมีอื่น ๆ ได้วิเคราะห์เกรดจากเมอร์ค (ดาร์มส เยอรมนี) ใช้น้ำกลั่นในการเตรียมการแก้ไขปัญหาทั้งหมด2.2. เอนไซม์ช่วยสกัดและเพิ่มประสิทธิภาพผลไม้แห้งพุดถูกดินประณีต และ sieved ผ่านตาข่าย 150 การส่งผลผงถูกแห้งที่ 50 ◦C สำหรับ 12 h แล้วเก็บไว้ใน desiccator จนใช้ในการสกัดเอนไซม์ช่วย และตรวจสอบเงื่อนไขที่เหมาะสมcellulase ถูกเตรียมไว้เป็นโซลูชั่นในบัฟเฟอร์กรดซิตริก NaOH 50 มม.มีแตกต่างกัน pH (3, 3.5, 4, 4.5 และ 5) ที่ความเข้มข้นเอนไซม์ต่าง ๆ (2.5, 5, 10ก 50 mg/mL) ถึง 100 มิลลิกรัมของผงพืชแห้งวางไว้ใน microcentrifuge 2 mLหลอด 1.5 mL ของเอนไซม์ถูกเพิ่ม โดยใช้ micropipettes (Finnpipetteฟินแลนด์) ปฏิกิริยามีผลสะเทือนใน incubator งก ๆ (ระบบ ivymen จักษุสเปนที่ 300 rpm สำหรับรอบระยะเวลา (12, 18, 24, 30 และ 36 h) ที่ 50 ◦C หลังจากการรักษา การระงับได้ centrifuged (Microfuge 16 เยอรมนี) ที่ 14, 500 × g
การแปล กรุณารอสักครู่..
2. การทดลอง
2.1 วัสดุไม้แห้งของพุดซ้อนเอลลิสที่ซื้อมาจากตลาดท้องถิ่นในจังหวัดนครปฐมประเทศไทย Geniposide (เป็นผงสีขาว) ที่ซื้อมาจากมณฑลส่านซีTaiji Huqing เทคโนโลยี จำกัด (มณฑลส่านซีประเทศจีน) Genipin (เป็นผงผลึกเหมือนเกรดสาร) ที่ได้รับจากความท้าทายไบโอ จำกัดจำกัด (Taichung, Taiwan) เซลลูเลสจากเชื้อรา Aspergillus พาณิชย์ไนเจอร์ (EC 3.2.1.4, 1.3 U / มก.) จากซิกม่า (เซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) สารเคมีอื่น ๆ ทั้งหมดเป็นของการวิเคราะห์ชั้นประถมศึกษาปีจากเมอร์(ดาร์มสตัด, เยอรมนี) น้ำกลั่นถูกใช้ในการเตรียมความพร้อมการแก้ปัญหาทั้งหมด. 2.2 สกัดเอนไซม์ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพและผลไม้พุดแห้งเป็นพื้นดินอย่างประณีตและร่อนผ่าน 150 ตาข่าย ส่งผลให้ผงแห้งแล้วที่ 50 ◦Cเป็นเวลา 12 ชั่วโมงและเก็บไว้ในเดซิจนใช้. เพื่อดำเนินการสกัดเอนไซม์ที่ช่วยในการตรวจสอบและสภาวะที่เหมาะสมที่เซลลูเลสถูกจัดทำขึ้นเป็นการแก้ปัญหาใน 50 มิลลิบัฟเฟอร์กรดซิตริก NaOH กับที่แตกต่างกัน พีเอช (3, 3.5, 4, 4.5 และ 5) ที่ระดับความเข้มข้นของเอนไซม์ต่างๆ (2.5, 5, 10 และ 50 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) 100 มิลลิกรัมของผงแห้งพืชอยู่ใน 2 มิลลิลิตรไมโครหลอด1.5 ml ของสารละลายเอนไซม์ถูกบันทึกโดยใช้ไมโคร (Finnpipette, ฟินแลนด์) ปฏิกิริยาถูกเขย่าในศูนย์บ่มเพาะสั่น (ออปติก ivymen ระบบสเปน) ที่ 300 รอบต่อนาทีสำหรับช่วงระยะเวลาหนึ่ง (12, 18, 24, 30 และ 36 ชั่วโมง) ที่ 50 ◦C หลังจากที่การรักษาที่ถูกระงับการหมุนเหวี่ยง (microfuge 16 เยอรมนี) ที่ 14,500 ×กรัม
การแปล กรุณารอสักครู่..