Gram-staining was performed as described by Gerhardt et al. (1994) and polyb-hydroxybutyrate granules were observed after staining the cells with Sudan black. Cell morphology and the presence of flagella were observed by light microscopy (model A3000, 61000; Zeiss) and transmission electron microscopy (1200EX; Jeol) by using cells grown for 48 h at 30
u
C on NA. For the latter technique, cells from exponentially growing cultures were negatively stained with 2 % (w/v) uranyl acetate and the grids were examined after being air-dried (see Supplementary Fig. S1 in IJSEM Online). The pH range for growth was determined in NB at 30
u
C, which was adjusted prior to sterilization to pH 3–11 (at 0.5 pH unit intervals) by using appropriate biological buffers (Chung et al., 1995). Growth at 15, 20, 25, 30, 35 and 40
C was measured in NB. The NaCl requirement for growth was determined by using nutrient broth (BD Difco) containing 0, 0.5 and 1.0–20.0 % (w/v) NaCl (at 1.0 % intervals). Anaerobic growth was assessed in NB and NA supplemented with potassium nitrate after incubation in an Oxoid AnaeroGen system (Miller et al., 1995). Growth under these conditions was recorded by measuring the OD
of the cultures after 24, 48 and 72 h. Catalase and oxidase activities
595
u
การย้อมสีแกรมได้ดำเนินการตามที่อธิบาย Gerhardt ตอัล (1994) และไฮดรอกซี Polyb เม็ดถูกตั้งข้อสังเกตหลังจากการย้อมสีเซลล์ที่มีสีดำซูดาน ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์และการแสดงตนของ flagella ถูกสังเกตเห็นโดยการใช้กล้องจุลทรรศน์แสง (รุ่น A3000, 61000; Zeiss) และการส่งผ่านอิเล็กตรอน (1200ex; JEOL) โดยใช้เซลล์ที่ปลูกเป็นเวลา 48 ชั่วโมงวันที่ 30
u
c บน na สำหรับเทคนิคหลังเซลล์จากวัฒนธรรมที่เติบโตชี้แจงมีการย้อมลบกับ 2% (w / v) อะซีเตทกริด uranyl และมีการตรวจสอบหลังจากที่อากาศแห้ง (ดูมะเดื่อเสริม s1. ใน ijsem ออนไลน์) ช่วง ph สำหรับการเจริญเติบโตถูกกำหนดในวันที่ 30 nb
u
c ซึ่งมีการปรับก่อนที่จะฆ่าเชื้อที่มีค่า pH 3-11 (ที่ 0.5 ช่วงเวลาหน่วย ph) โดยใช้บัฟเฟอร์ชีวภาพที่เหมาะสม (Chung et al,., 1995)การเจริญเติบโตที่ 15, 20, 25, 30, 35 และ 40
c วัดใน nb ความต้องการโซเดียมคลอไรด์สำหรับการเจริญเติบโตถูกกำหนดโดยการใช้น้ำซุปสารอาหาร (bd difco) ที่มี 0, 0.5 และ 1.0-20.0% (w / v) โซเดียมคลอไรด์ (ในช่วง 1.0%) การเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ได้รับการประเมินใน nb na และเสริมด้วยโพแทสเซียมไนเตรตหลังจากการบ่มในระบบ anaerogen oxoid (มิลเลอร์และคณะ. 1995)การเจริญเติบโตภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ถูกบันทึกไว้โดยการวัด od
ของวัฒนธรรมหลังจากที่ 24, 48 และ 72 ชั่วโมง catalase และ oxidase กิจกรรม
595
u
การแปล กรุณารอสักครู่..
ย้อมสีกรัมถูกดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดย Gerhardt et al. (1994) และ polyb-hydroxybutyrate เม็ดได้สังเกตหลังจากการย้อมสีเซลล์ซูดานสีดำ สัณฐานวิทยาของเซลล์และของ flagella ถูกตรวจสอบ โดยแสง microscopy (รุ่น A3000, 61000 Zeiss) และส่งอิเล็กตรอน microscopy (1200EX Jeol) โดยเซลล์โต h 48 ที่ 30
u
C บนเรี่ยม เทคนิคหลัง เซลล์จากวัฒนธรรมการเจริญเติบโตเป็นทวีคูณเมื่อได้ส่งสีกับ 2% (w/v) uranyl acetate และกริดถูกตรวจสอบถูก air-dried (ดูฟิกเสริม S1 ใน IJSEM ออนไลน์) ช่วงการวัดการเจริญเติบโตถูกกำหนดใน NB ที่ 30
u
C ซึ่งมีการปรับปรุงก่อนการฆ่าเชื้อการ 3–11 ค่า pH (ในช่วง 0.5 ในหน่วย pH) โดยใช้ข้อมูลทางชีวภาพที่เหมาะสม (Chung et al., 1995) เจริญเติบโตที่ 15, 20, 25, 30, 35 และ 40
C ถูกวัดในจำนวนผู้เข้า NaCl ข้อกำหนดสำหรับการเจริญเติบโตที่ถูกกำหนด โดยการใช้ธาตุอาหารซุป (BD Difco) ประกอบด้วย 0, 0.5 และ 1.0–20.0% (w/v) NaCl (ในช่วง 1.0%) ไม่ใช้ออกซิเจนในการเจริญเติบโตถูกประเมินใน NB และ NA ที่เสริม ด้วยดินประสิวหลังจากฟักตัวใน Oxoid AnaeroGen ระบบ (มิลเลอร์และ al., 1995) เจริญเติบโตภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ได้ถูกบันทึก โดยวัด OD
วัฒนธรรมหลัง 24, 48 และ 72 h. Catalase และ oxidase กิจกรรม
595
u
การแปล กรุณารอสักครู่..