tryptone) were combined in a basal

tryptone) were combined in a basal medium (0.5 g×L-1
KH2
PO4
, 0.2 g×L-1 K2
HPO4
, 0.2 g×L-1 MgSO4
×7H2
O,
0.14g×L-1MnSO4
×H2
O,and1mL×L-1 vitaminsolution
(Blackmores, NSW, Australia). The experiments
were conducted in duplicate. Following this selection,
the influence of 5-6 quantitative factors (sugar
concentration, nitrogen concentration (combination of
nitrogen sources), trace element solution, temperature)
on exobiopolymer production was evaluated using a
fractional factorialdesignat2levels. The experiments
were conducted in duplicating with 3 center points.
The optimal conditions of each fungal strain selected
from the fractional factorial design were evaluated
in a 5-L fermenter production in order to obtain the
exopolysaccharides for further experiments.
2.5 E nt h om o p at h o ge n ic F u n g a l
Exobiopolymer Production
All fungal strains were cultivated in 5-liter
fermenter for exobiopolymer production. The medium
used in a 5-liter fermenter (Marubishi Co., Ltd.,
Pathumthani, Thailand) with a working volume of 4 L
hadthe followingcomposition: for A. samoensis BCC
2466; fructose 40 g×L-1
, malt extract 5 g×L-1
, peptone
7.5g×L-1
, yeastextract5g×L-1
, NH4
H2
PO4 5g×L-1
, for
O. nipponica BCC 2092; mannose60g×L-1
, cornsteep
solid10g×L-1
, NH4
H2
PO4
10g×L-1
, for G. pulchra BCC
2711;Fructose60g×L-1
, maltextract10g×L-1
,peptone
15 g×L-1
, NH4
H2
PO4
10 g×L-1
, yeast extract 10 g×L-1
.
Thebasalmediumcompositionforall recipescontained
the following; 0.5 g×L-1 KH2
PO4
, 0.2 g×L-1 K2
HPO4
,
0.2 g×L-1 MgSO4
×7H2
O, 0.14 g×L-1 MnSO4
×H2
O, and
1mL×L-1vitaminsolution(Blackmores,NSW,Australia).
Vitamin complex consisted of 75 mg vitamin B1
(thiaminehydrochloride),10mgvitaminB2(riboflavin),
50mgnicotinamide,25mgcalciumpantothenate,10mg
vitamin B6 (pyridoxine hydrochloride), 25 mcg
vitamin B12(cyanocobalamin),15 mcgbiotin,500 mg
vitamin C (derived from ascorbic acid 260 mg and
calciumascorbate290.5mg),10mgcholinebitartrate,10mg
inositol, 10 mg zinc amino acid chelate (zinc 2 mg),
175 mg calcium phosphate, and 75 mg magnesium
phosphate. Trace element solution contained (per L)
14.3 g of ZnSO4
•H2
O, 2.5 g of CuSO4
•5H2
O, 0.5 g of
NiCl2
•6H2
Oand13.8gofFeSO4
•H2
O. About10%(v/v)
seedculture was transferredtoeachfermenter. Culture
was agitated at 300 rpm and aerated at 1vvm. pH was
not automatically adjusted.
2.6 Exobiopolymerpurification
Culturefiltrate was mixed with four volumes
of 95% ethanol, stirred vigorously for 10-15 min and
stored at 20 °C for at least 12 h. Precipitated polymer
was sedimentedat10,000gfor20 minandlyophilized.
Polymer was re-dissolved in distilled water and any
insoluble material was removed by centrifugation at
10,000gfor20 min. Supernatant wasdialyzed(2kDa
cut off;Spectrum Laboratories, Inc., USA) against 4 L
of distilled water for 24 h and lyophilized. The aim of
thedialysisistoeliminatesaltsandsugars,whichwould
interfere with biopolymer characterization.
2.7 Molecular weight determination of
the exobiopolymers
Theaveragemolecularweightofthepolymers
was determined by gel-permeation chromatography
(GPC) (Waters600E;Waters, MA, USA); the machine
is equipped witha refractive index(RI)detector andan
Ultrahydrogel linear column (300´7.8 mm ID; Waters,
USA). Universalcalibrationlog(Mp)versusVR,where
Mp is the peak molecular weight, was conducted with
dextran standards of molecular weights ranging from
4,400to401,000. Injectionvolume was20µland flow
rate of the mobile phase (0.05 M sodium bicarbonate
buffer) was 0.6 ml/min.
2.8 Cultivation of L. acidophilus BCC
13839 and B. animalis ATCC 25527

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

tryptone) ถูกรวมในสื่อโรค (0.5 g × L-1KH2PO4, 0.2 g × K2 L-1HPO4, 0.2 กรัม× L 1 MgSO4× 7H 2O0.14 g × L-1MnSO4× H2O, vitaminsolution and1mL × L-1(Blackmores นิวเซาธ์เวลส์ ออสเตรเลีย) การทดลองได้ดำเนินการในซ้ำ ตัวเลือกนี้ ต่อไปนี้อิทธิพลของปัจจัยเชิงปริมาณ 5-6 (น้ำตาลความเข้มข้น ความเข้มข้นไนโตรเจน (ชุดไนโตรเจนแหล่ง), โซลูชันจุลธาตุ อุณหภูมิ)ใน exobiopolymer ผลิตได้ถูกประเมินโดยใช้แบบfactorialdesignat2levels เศษ การทดลองได้ดำเนินการในการทำซ้ำจุดศูนย์ 3เงื่อนไขที่เหมาะสมของแต่ละต้องใช้เชื้อราที่เลือกจากการออกแบบแฟกเศษถูกประเมินในการผลิต 5 L fermenter เพื่อรับการexopolysaccharides สำหรับการทดลองต่อไป 2.5 E nt h ออม o p ที่ h o ge n ic F u n g l เป็นผลิต Exobiopolymer มีปลูกสายพันธุ์เชื้อราทั้งหมดใน 5 ลิตรfermenter สำหรับผลิต exobiopolymer สื่อใช้ใน fermenter 5 ลิตร (Marubishi Co., Ltd.ปทุมธานี ประเทศไทย) ด้วยงาน 4 Lhadthe followingcomposition: สำหรับ samoensis A. สำเนาลับถึง2466 ฟรักโทส 40 กรัม× L 1มอลต์สกัด 5 × g L-1, peptone7.5 g × L-1, yeastextract5g × L-1, NH4H2PO4 5 g × L-1สำหรับโอ nipponica BCC 2092 mannose60g × L-1, cornsteepsolid10g × L-1, NH4H2PO410 g × L-1สำหรับกรัม pulchra สำเนาลับถึง2711Fructose60g ซื้อ L-1, maltextract10g × L-1, peptone15 g × L-1, NH4H2PO410 g × L-1, 10 × g L-1 สารสกัดจากยีสต์.Thebasalmediumcompositionforall recipescontainedต่อไปนี้ 0.5 g × KH2 L-1PO4, 0.2 g × K2 L-1HPO4,0.2 กรัม× L 1 MgSO4× 7H 2โอ 0.14 g × L 1 MnSO4× H2โอ และ1mL×L-1vitaminsolution(Blackmores,NSW,Australia)วิตามินคอมเพล็กซ์ประกอบด้วย 75 มิลลิกรัมวิตามินบี 1(thiaminehydrochloride),10mgvitaminB2(riboflavin)50mgnicotinamide, 25mgcalciumpantothenate, 10 มก.วิตามินบี 6 (ไพริดอกซีนไฮโดรคลอไรด์) 25 ไมโครกรัมวิตามินบี 12 (cyanocobalamin), 15 mcgbiotin, 500 มิลลิกรัมวิตามินซี (กรดแอสคอร์บิคจาก 260 มิลลิกรัม และcalciumascorbate290.5mg), 10mgcholinebitartrate, 10 มก.inositol, 10 มก.สังกะสีกรดอะมิโนแอซิด (สังกะสี 2 mg),175 มิลลิกรัมแคลเซียมฟอสเฟต และ 75 มิลลิกรัมแมกนีเซียมฟอสเฟต โซลูชันจุลธาตุที่มีอยู่ (ต่อ L)14.3 g ของ ZnSO4•H2O, g 2.5 ของ CuSO4•5H2O, g 0.5 ของNiCl2•6H2Oand13.8gofFeSO4•H2โอ About10%(v/v)seedculture เป็น transferredtoeachfermenter วัฒนธรรมมี agitated ที่ 300 รอบต่อนาที และอากาศที่ 1vvm มี pHปรับปรุงโดยอัตโนมัติ2.6 Exobiopolymerpurification Culturefiltrate ถูกผสมกับไดรฟ์ข้อมูล 4ของ 95% เอทานอล กวนโยคะสำหรับ 10-15 นาที และเก็บไว้ที่ 20 ° C สำหรับน้อย 12 h. Precipitated พอลิเมอร์มี sedimentedat10, 000gfor20 minandlyophilizedพอลิเมอร์มีการละลายในน้ำกลั่นและวัสดุที่ไม่ละลายน้ำถูกเอาออก โดย centrifugation ที่10, 000gfor20 ต่ำสุด Supernatant wasdialyzed (2kDaตัดออกไปห้องปฏิบัติการคลื่น Inc., USA) กับ 4 Lน้ำกลั่นสำหรับ 24 h และ lyophilized จุดมุ่งหมายของthedialysisistoeliminatesaltsandsugars, whichwouldinterfere with biopolymer characterization.2.7 Molecular weight determination ofthe exobiopolymers Theaveragemolecularweightofthepolymerswas determined by gel-permeation chromatography(GPC) (Waters600E;Waters, MA, USA); the machineis equipped witha refractive index(RI)detector andanUltrahydrogel linear column (300´7.8 mm ID; Waters,USA). Universalcalibrationlog(Mp)versusVR,whereMp is the peak molecular weight, was conducted withdextran standards of molecular weights ranging from4,400to401,000. Injectionvolume was20µland flowrate of the mobile phase (0.05 M sodium bicarbonatebuffer) was 0.6 ml/min.2.8 Cultivation of L. acidophilus BCC13839 and B. animalis ATCC 25527

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทริปโตน) ได้รับการรวมกันในสื่อพื้นฐาน (0.5 กรัม× L-1
KH2
PO4
, 0.2 กรัม× L-1 K2
HPO4
0.2 กรัม× L-1 MgSO4
× 7H2
O,
0.14g × L-1MnSO4
× H2
O, and1mL × L-1 vitaminsolution
(Blackmores, NSW, ออสเตรเลีย). การทดลอง
ได้ดำเนินการในที่ซ้ำกัน. ต่อไปนี้ตัวเลือกนี้
อิทธิพลของปัจจัยเชิงปริมาณ 5-6 (น้ำตาล
ความเข้มข้นของความเข้มข้นของไนโตรเจน (การรวมกันของ
แหล่งไนโตรเจน), การแก้ปัญหาธาตุอุณหภูมิ)
ในการผลิต exobiopolymer ได้รับการประเมินโดยใช้
factorialdesignat2levels เศษส่วน. การทดลอง
ได้รับการดำเนินการในการทำซ้ำที่มี 3 จุดศูนย์.
สภาวะที่เหมาะสมของแต่ละสายพันธุ์ของเชื้อราที่เลือก
จากการออกแบบปัจจัยบางส่วนได้รับการประเมิน
ในการผลิตถังหมัก 5-L เพื่อให้ได้
exopolysaccharides สำหรับ การทดลองต่อไป.
2.5 E NT ชั่วโมงเกี่ยวกับสหกรณ์ที่โฮ ge n IC F ungal
Exobiopolymer ผลิต
ทุกสายพันธุ์ของเชื้อราได้รับการปลูกฝังใน 5 ลิตร
ถังหมักสำหรับการผลิต exobiopolymer. ขนาดกลาง
ที่ใช้ในการหมัก 5 ลิตร (Marubishi จำกัด
จังหวัดปทุมธานี , ประเทศไทย) มีปริมาณการทำงานของ 4 ลิตร
hadthe followingcomposition: สำหรับ A. samoensis BCC
2466; ฟรุกโตส 40 กรัม× L-1
, สารสกัดจากมอลต์ 5 กรัม× L-1
, เปปโตน
7.5g × L-1
, yeastextract5g × L-1
, NH4
H2
PO4 5g × L-1
สำหรับ
ทุม Nipponica BCC 2092; mannose60g × L-1
, cornsteep
solid10g × L-1
, NH4
H2
PO4
10g × L-1
สำหรับ G. รวี BCC
2711; Fructose60g × L-1
, × maltextract10g L-1
, เปปโตน
15 กรัม× L-1
, NH4
H2
PO4
10 กรัม× L-1
, สารสกัดจากยีสต์ 10 กรัม× L-1
.
Thebasalmediumcompositionforall recipescontained
ดังต่อไปนี้ 0.5 กรัม× L-1 KH2
PO4
, 0.2 กรัม× L-1 K2
HPO4
,
0.2 กรัม× L-1 MgSO4
× 7H2
O, 0.14 กรัม× L-1 MnSO4
× H2
O และ
1 มล× L-1vitaminsolution (Blackmores, NSW , ออสเตรเลีย).
วิตามินที่ซับซ้อนประกอบด้วย 75 มิลลิกรัมวิตามิน B6 (ไฮโดรคลอไพริดอกซิ) 25 ไมโครกรัมวิตามินบี 12 (cyanocobalamin), 15 mcgbiotin, 500 มก. วิตามินซี (มาจากวิตามินซี 260 มิลลิกรัมและcalciumascorbate290.5mg) 10mgcholinebitartrate, 10mg ทอ 10 มิลลิกรัมสังกะสีคีเลตกรดอะมิโน (สังกะสี 2 มก.) , 175 มิลลิกรัมแคลเซียมฟอสเฟตและ 75 มิลลิกรัมแมกนีเซียมฟอสเฟต วิธีการแก้ปัญหาที่มีธาตุ (ต่อลิตร) 14.3 กรัม ZnSO4 • H2 O, 2.5 กรัมของ CuSO4 • 5H2 O, 0.5 กรัมของNiCl2 • 6H2 Oand13.8gofFeSO4 • H2 ทุม About10% (v / v) seedculture เป็น transferredtoeachfermenter วัฒนธรรมถูกตื่นเต้นที่ 300 รอบต่อนาทีและมวลเบาที่ 1vvm พีเอชได้รับการไม่ปรับโดยอัตโนมัติ. 2.6 Exobiopolymerpurification Culturefiltrate ผสมกับสี่เล่มของเอทานอล 95%, กวนอย่างจริงจังประมาณ 10-15 นาทีและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 20 องศาเซลเซียสเป็นเวลาอย่างน้อย 12 ชั่วโมง พอลิเมอตกตะกอนถูก sedimentedat10,000gfor20 minandlyophilized. พอลิเมอเป็นอีกครั้งที่ละลายในน้ำกลั่นและใด ๆวัสดุที่ไม่ละลายน้ำถูกลบออกโดยการหมุนเหวี่ยงที่10,000gfor20 นาที ใส wasdialyzed (2kDa ตัด; Spectrum Laboratories, Inc. , USA) กับ 4 ลิตรของน้ำกลั่นเป็นเวลา 24 ชั่วโมงและแห้ง จุดมุ่งหมายของการthedialysisistoeliminatesaltsandsugars, whichwould . ยุ่งเกี่ยวกับลักษณะ biopolymer 2.7 การกำหนดน้ำหนักโมเลกุลของexobiopolymers Theaveragemolecularweightofthepolymers ถูกกำหนดโดยโคเจลซึมผ่าน(GPC) (Waters600E; น้ำ, MA, USA); เครื่องจะติดตั้ง witha ดัชนีหักเห (RI) เครื่องตรวจจับ Andan Ultrahydrogel คอลัมน์เชิงเส้น (300'7.8 มม ID; น้ำ, USA) Universalcalibrationlog (MP) versusVR ที่MP เป็นน้ำหนักโมเลกุลสูงสุดได้ดำเนินการกับมาตรฐาน dextran ของน้ำหนักโมเลกุลตั้งแต่4,400to401,000 Injectionvolume was20μlandไหลอัตราเฟสเคลื่อนที่ (0.05 M โซเดียมไบคาร์บอเนตบัฟเฟอร์) เป็น 0.6 มล. / นาที2.8 การเพาะปลูกของ L. acidophilus BCC 13839 และ B animalis ATCC 25527

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ทริพโทน ) ถูกรวมในอาหารพื้นฐาน ( 0.5 กรัม× L-1


kh2 po4 0.2 กรัม× L-1 K2

hpo4 0.2 กรัม× L-1 MgSO4 ใ
× 7h2
O

l-1mnso4 0.14g ×× H2
O and1ml × L-1 vitaminsolution
( แบลคมอร์ส , NSW , ออสเตรเลีย ) การทดลอง
มีวัตถุประสงค์ในที่ซ้ำกัน ต่อไปนี้การเลือกนี้
อิทธิพลของปัจจัยเชิงปริมาณ ( น้ำตาล
ความเข้มข้น และปริมาณไนโตรเจน ( การรวมกันของ
แหล่งไนโตรเจน )ติดตามแก้ปัญหาของอุณหภูมิต่อการผลิต exobiopolymer )

ส่วนประเมินการใช้ factorialdesignat2levels . การทดลองได้ดำเนินการในโรเนียวด้วย
3
จุดศูนย์ สภาวะที่เหมาะสมของแต่ละปี เลือกจากการออกแบบการทดลองเศษส่วน

ในอาหารเหลว ได้แก่ ถังหมักในการผลิตเพื่อให้ได้

exopolysaccharides สำหรับการทดลองต่อไป2.5 e h o p ที่ NT โอม H O N IC GE F u n g L

exobiopolymer การผลิตสายพันธุ์เชื้อราทั้งหมดที่ปลูกใน 5-liter
ถังหมักเพื่อผลิต exobiopolymer . สื่อที่ใช้ใน 5-liter
ถังหมัก ( marubishi Co . , Ltd .
ปทุมธานี ) กับปริมาณการทำงานของ 4 followingcomposition ( l
: . samoensis BCC
การเรียนรู้ ฟรักโทส 40 กรัม× L-1
, malt extract extract 5 กรัม× L-1

7.5g × L-1
,yeastextract5g × L-1


po4 NH4 H2 5 × L-1
,
O nipponica BCC 2092 ; mannose60g × L-1

เมื่อ solid10g × L-1



po4 NH4 H2 10 × L-1
, G . พัลชรา BCC
หน้าต่าง ; fructose60g × L-1


maltextract10g × L-1 เปปโตน 15 กรัม× L-1


po4 NH4 H2
10 กรัม× L-1
, สารสกัดจากยีสต์ 10 กรัม× L-1
.
thebasalmediumcompositionforall recipescontained
ดังต่อไปนี้ 0.5 กรัม× L-1 kh2

po4 0.2 กรัม× L-1 K2
hpo4

0.2 กรัม×× 7h2 L-1 MgSO4 ใ

o 0 .14 กรัม× L-1 mnso4 × H2
o
,
1ml × l-1vitaminsolution ( แบลคมอร์ส , NSW , ออสเตรเลีย )
วิตามินรวมจำนวน 75 มิลลิกรัม วิตามิน B1
( thiaminehydrochloride ) 10mgvitaminb2 ( Riboflavin )
50mgnicotinamide 25mgcalciumpantothenate 10mg
, , วิตามิน B6 ( pyridoxine ไฮโดรคลอไรด์ ) , 25 mcg
วิตามินบี 12 ( ไซยาโนโคบาลามิน ) , 15 mcgbiotin
วิตามินซี 500 มิลลิกรัม ( ได้มาจากกรดแอสคอร์บิค 260 มิลลิกรัมและ
calciumascorbate290.5mg )10mgcholinebitartrate 10mg
, Inositol , 10 มก. ซิงค์ อะมิโนแอซิด คีเลต ( สังกะสี 2 มิลลิกรัม )
175 มิลลิกรัม แคลเซียม ฟอสเฟต และ 75 มก. แมกนีเซียม
ฟอสเฟต ธาตุโซลูชั่นที่มีอยู่ ( 14.3 กรัมต่อลิตร )

znso4 - H2
O
- 2.5 กรัมของ CuSO4 5h2
O
0.5 กรัม nicl2
-

- 6h2 oand13.8goffeso4 H2
O about10 เปอร์เซ็นต์ ( v / v )
seedculture คือ transferredtoeachfermenter . วัฒนธรรม
กระวนกระวายที่ 300 รอบต่อนาทีและอากาศที่ 1vvm . pH
ไม่ได้โดยอัตโนมัติปรับ exobiopolymerpurification

2.6 culturefiltrate ผสมกับสี่เล่ม
เอทานอล 95% กวนชะมัด 10-15 นาทีและเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 20 ° C
อย่างน้อย 12 ชั่วโมง ตกตะกอน โพลีเมอร์เป็น sedimentedat10000gfor20 minandlyophilized
.
พอลิเมอร์เป็นอีกครั้งที่ละลายในน้ำกลั่นและน้ำวัสดุใด ๆ

10000gfor20 ออกด้วย 3 ที่ มินนำ wasdialyzed ( 2kda
ตัด ; สเปกตรัมห้องปฏิบัติการ , Inc . , USA ) กับ 4 L
น้ำกลั่นตลอด 24 ชม. และแห้ง . จุดมุ่งหมายของ thedialysisistoeliminatesaltsandsugars whichwould
,
รบกวนแบบตัวละคร
2.7 โมเลกุลการหา

theaveragemolecularweightofthepolymers exobiopolymers
ถูกกำหนดโดยวิธีเจลซึม
( GPC ) ( waters600e ;น้ำ , MA , USA ) ; เครื่อง
ติดตั้งกับดรรชนีหักเห ( RI ) คอลัมน์เครื่องละ
ultrahydrogel เชิงเส้น ( 300 ใหม่ 7.8 mm ID ; น้ำ
สหรัฐอเมริกา ) universalcalibrationlog ( MP ) versusvr ที่
MP เป็นยอดเขาโมเลกุลน้ำหนักจำนวน
มาตรฐาน dextran น้ำหนักโมเลกุลตั้งแต่
4400to401000 . injectionvolume was20 µไหล
ที่ดินอัตราของเฟสเคลื่อนที่ ( 0.05 M
โซเดียมไบคาร์บอเนตบัฟเฟอร์ ) คือ 0.6 มิลลิลิตร / นาที

L 2.8 การเพาะปลูกวันมี BCC และสัตว์โดย 25527 13839 B