Sample determinations using the official method were carried out in triplicate, according to the AOCS Ca 5a-40 procedure (AOCS, 2004). For values lower than 0.1% oleic acid, the titration solution used was 0.05 M. The results were REPORTED as an average of three values, with a tolerance of 5% for the coefficient of variation (CV).
Analyses with the kits were performed in triplicate and the CV values were not to exceed 10%, according to the manufacturer's recommendations. The reagents used for the FaSafe™ STD kit are different from those for the FaSafe™ HSY kit, except for the preparation reagent and reagents A and B (see descriptions below), but the procedures are the same. They were described by Osawa (2005) and Osawa and Gonçalves (2006), and consisted of the following steps: (i) construction of a calibration curve, with reagents called calibrators; (ii) test with standard solutions of known concentrations, called controls; and (iii) test with samples, diluted or not with a specific preparation reagent. Each test was done with 100 μL of sample, diluted samples, calibrators or controls; addition of 2.35 mL of reagent A (solvent) and 150 μL of reagent B (xylenol-orange indicator) in that sequence; and the absorbance values at 570 nm read after 10 min of reaction under agitation by inversion in a vortex mixer.
The results in absorbance units were converted into the unit of the analite measured (% oleic acid) by a portable and programmable colorimeter (MicroChemTM Analyser, Source Scientific, USA), which also prints the results. The averages and values for the CVS among the repetitions, were calculated by the equipment.
The FaSafe™ kits consist of two reagents (A and B) plus calibrators, controls, preparation reagent, colorimeter, dispensers, pipette and tips, glass tubes (12×75 mm) and caps, vortex mixer, grinder, heating block, membrane filters, filter holders, and vacuum pump (DiaMed AG, Switzerland). The grinder, filters, filter holders, and vacuum pump are only REQUIRED for lipid extractions and were not used in these experiments.
Sample determinations using the official method were carried out in triplicate, according to the AOCS Ca 5a-40 procedure (AOCS, 2004). For values lower than 0.1% oleic acid, the titration solution used was 0.05 M. The results were REPORTED as an average of three values, with a tolerance of 5% for the coefficient of variation (CV).Analyses with the kits were performed in triplicate and the CV values were not to exceed 10%, according to the manufacturer's recommendations. The reagents used for the FaSafe™ STD kit are different from those for the FaSafe™ HSY kit, except for the preparation reagent and reagents A and B (see descriptions below), but the procedures are the same. They were described by Osawa (2005) and Osawa and Gonçalves (2006), and consisted of the following steps: (i) construction of a calibration curve, with reagents called calibrators; (ii) test with standard solutions of known concentrations, called controls; and (iii) test with samples, diluted or not with a specific preparation reagent. Each test was done with 100 μL of sample, diluted samples, calibrators or controls; addition of 2.35 mL of reagent A (solvent) and 150 μL of reagent B (xylenol-orange indicator) in that sequence; and the absorbance values at 570 nm read after 10 min of reaction under agitation by inversion in a vortex mixer.The results in absorbance units were converted into the unit of the analite measured (% oleic acid) by a portable and programmable colorimeter (MicroChemTM Analyser, Source Scientific, USA), which also prints the results. The averages and values for the CVS among the repetitions, were calculated by the equipment.The FaSafe™ kits consist of two reagents (A and B) plus calibrators, controls, preparation reagent, colorimeter, dispensers, pipette and tips, glass tubes (12×75 mm) and caps, vortex mixer, grinder, heating block, membrane filters, filter holders, and vacuum pump (DiaMed AG, Switzerland). The grinder, filters, filter holders, and vacuum pump are only REQUIRED for lipid extractions and were not used in these experiments.
การแปล กรุณารอสักครู่..
การตรวจวัดตัวอย่างใช้วิธีการอย่างเป็นทางการได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่าตามที่ AOCS Ca 5a-40 ขั้นตอน (AOCS, 2004) สำหรับค่าต่ำกว่า 0.1% กรดโอเลอิก, การแก้ปัญหาการไตเตรทที่ใช้เป็น 0.05 เมตรผลที่ได้รับรายงานเป็นค่าเฉลี่ยของค่าที่สามที่มีความอดทน 5% สำหรับค่าสัมประสิทธิ์ของความแปรปรวน (CV) การวิเคราะห์กับชุดที่ได้รับการดำเนินการใน เพิ่มขึ้นสามเท่าและค่า CV ได้ไม่เกิน 10% ตามคำแนะนำของผู้ผลิต สารเคมีที่ใช้สำหรับชุด FaSafe ™ STD แตกต่างจากที่สำหรับชุด FaSafe ™ HSY ยกเว้นน้ำยาเตรียมการและน้ำยา A และ B (ดูรายละเอียดด้านล่าง) แต่ขั้นตอนจะเหมือนกัน พวกเขาได้รับการอธิบายโดย Osawa (2005) และ Osawa และGonçalves (2006), และมีขั้นตอนดังต่อไปนี้: (i) การก่อสร้างของเส้นโค้งการสอบเทียบกับสารเคมีที่เรียกว่าเทียบ; (ii) การทดสอบกับการแก้ปัญหามาตรฐานของความเข้มข้นที่รู้จักกันที่เรียกว่าการควบคุม; และ (iii) การทดสอบกับกลุ่มตัวอย่างเจือจางหรือไม่กับการเตรียมสารที่เฉพาะเจาะจง การทดสอบแต่ละคนได้ทำกับ 100 ไมโครลิตรของตัวอย่างตัวอย่างเจือจางสอบเทียบหรือการควบคุม; นอกจากนี้จาก 2.35 มิลลิลิตรของสาร (ตัวทำละลาย) และ 150 ไมโครลิตรของสาร B (ตัวแสดง xylenol ส้ม) ในลำดับที่; และค่าดูดกลืนแสงที่ 570 นาโนเมตรอ่านหลังจาก 10 นาทีของการเกิดปฏิกิริยาภายใต้ความปั่นป่วนโดยผกผันในกระแสน้ำวนผสมผลในหน่วยดูดกลืนแสงถูกแปลงเป็นหน่วยของ analite วัด (กรดโอเลอิก%) โดย colorimeter แบบพกพาและโปรแกรม (MicroChemTM วิเคราะห์ ที่มาทางวิทยาศาสตร์, ประเทศสหรัฐอเมริกา) ซึ่งยังพิมพ์ผล ค่าเฉลี่ยและค่าสำหรับ CVS หมู่ซ้ำถูกคำนวณโดยอุปกรณ์ชุด FaSafe ™ประกอบด้วยสองน้ำยา (A และ B) บวกเทียบ, การควบคุม, การเตรียมน้ำยา colorimeter, ซูปิเปตและเคล็ดลับหลอดแก้ว (12 × 75 มิลลิเมตร) และหมวกผสมน้ำวน, เครื่องบด, บล็อกความร้อนกรองเมมเบรนของผู้ถือกรองและปั๊มสูญญากาศ (Diamed AG, วิตเซอร์แลนด์) เครื่องบดกรองผู้ถือกรองและปั๊มสูญญากาศที่จำเป็นสำหรับการสกัดไขมันและไม่ได้ใช้ในการทดลองเหล่านี้
การแปล กรุณารอสักครู่..
ตัวอย่างข้างต้นโดยใช้วิธีการทางการศึกษาทั้งสามใบไปตาม aocs CA 5a-40 ขั้นตอน ( aocs , 2004 ) สำหรับค่าต่ำกว่า 0.1% กรดโอเลอิก , ไทเทรตสารละลายที่ใช้คือ 0.05 เมตร ผลลัพธ์ที่ได้รายงานเป็นค่าเฉลี่ยของค่า 3 , มีความอดทนต่อ 5 ( NIOSH ) .
วิเคราะห์ด้วยชุดแสดงทั้งสามใบและ CV มีค่าไม่เกิน 10% ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ที่สามารถใช้สำหรับ fasafe ™ STD ชุดแตกต่างจากเหล่านั้นสำหรับ fasafe ™ hsy ชุด ยกเว้นการเตรียมรีเอเจนต์และ สารเคมี A และ B ( ดูรายละเอียดด้านล่าง ) แต่ขั้นตอนจะเหมือนกันมันถูกก่อตั้งโดย โอซาวะ ( 2005 ) และ โอซาวะ กอนทาและ Alves ( 2549 ) ประกอบด้วยขั้นตอนต่อไปนี้ : ( i ) สร้างเป็นรูปโค้ง มีสารเคมีที่เรียกว่า เทียบ 2 ) ทดสอบด้วยโซลูชั่นมาตรฐานของความเข้มข้นที่รู้จักกันเรียกว่า การควบคุม และ ( 3 ) แบบทดสอบกับตัวอย่างที่เจือจางหรือไม่ กับการกระทำที่เฉพาะเจาะจง แต่ละแบบก็ทำμ 100 ลิตรตัวอย่างที่เจือจางตัวอย่างการปรับเทียบหรือการควบคุม ; นอกจากนี้ 2.35 ml ของรีเอเจนต์ ( ตัวทำละลาย ) และ 150 μลิตร 3 B ( ตัวสีส้ม xylenol ) ในลำดับ และค่าการดูดกลืนแสงที่ 570 nm อ่านหลังจาก 10 นาทีของปฏิกิริยาในการกวนโดยผกผันใน vortex mixer
ผลลัพธ์ในหน่วยค่าถูกแปลงเป็นหน่วยของการวัด ( analite % กรดโอเลอิก ) โดยแบบพกพาและแบบระบบดิจิตอล ( เครื่อง microchemtm แหล่ง , วิทยาศาสตร์ , USA ) ซึ่งยังพิมพ์ผลลัพธ์ ค่าเฉลี่ยและค่าสำหรับ CVS ของ repetitions คำนวณด้วยอุปกรณ์ .
fasafe ™ชุดประกอบด้วยสองชนิด ( A และ B ) รวมทั้งการปรับเทียบ ตัวควบคุมการเตรียมรีเอเจนต์ คัลเลอริมิเตอร์ , Dispensers เปตและเคล็ดลับ , ท่อแก้ว ( 12 × 75 มม. ) และหมวก , เครื่องผสม , เครื่องบด , เครื่องป้องกันเยื่อกรองผู้ถือกรอง vortex และปั๊มสูญญากาศ ( diamed AG , สวิตเซอร์แลนด์ ) เครื่องบด , ตัวกรอง , ผู้ถือกรองและปั๊มสูญญากาศจะต้องสกัดไขมัน และไม่ได้ถูกใช้ในการทดลองเหล่านี้
การแปล กรุณารอสักครู่..