Absorption of dietary protein can b

Absorption of dietary protein can be mediated through the uptake of AA as free AA or small peptides. A H+-coupled, peptide transport protein, PepT1, is responsible for the absorption of small peptides arising from digestion of dietary proteins in the small intestine. The magnitude of peptide absorption and the nutritional significance of PepT1 are unknown for many food-producing animals; thus, the objective of this study was to clone and determine the functional characteristics of the pig PepT1 (pPepT1). Two cDNA-encoding pPepT1 were isolated, which contain alternative polyadenylation sites. The predicted pPepT1 is a 708-AA protein, which shows 82.8, 85.7, and 64.7% AA identity to human, sheep, and chicken PepT1, respectively. On northern blots, two pPepT1 mRNA of approximately 2.9 and 3.5 kb were detected in the duodenum, jejunum, and ileum of the small intestine and are presumed to result from alternative polyadenylation. Uptake of [3H]-Gly-Sar was measured in Chinese hamster ovary cells transiently transfected with a pPepT1 expression vector to study the functional expression of pPepT1. Peptide transport was H+-dependent, with an optimal pH of 6.0 to 6.5. The ability of pPepT1 to transport various peptides was assayed by calculating the concentration of unlabeled peptide that inhibited 50% of [3H]-Gly-Sar uptake (IC50) in transfected cells. Eleven dipeptides and two tripeptides had IC50 values that ranged from 0.004 to 0.53 mM. Three peptides, Lys-Lys, Arg-Lys, and Lys-Trp-Lys, had IC50 values greater than 1. 38 mM and seem to be poor substrates for pPepT1. For all three tetrapeptides examined, uptake of Gly-Sar was too small to measure, even at a concentration of 10 mM tetrapeptide; therefore, IC50 values could not be calculated. These results demonstrate that pPepT1 can transport a variety of dipeptides and tripeptides but not tetrapeptides.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การดูดซึมของอาหารโปรตีนสามารถถูก mediated ผ่านการดูดซับของ AA เป็น AA ฟรีหรือเปปไทด์ขนาดเล็ก H + -ควบคู่ เพปไทด์โปรตีนขนส่ง PepT1 รับผิดชอบสำหรับการดูดซึมของเปปไทด์ขนาดเล็กที่เกิดจากการย่อยอาหารของอาหารโปรตีนในลำไส้เล็ก ขนาดของเพปไทด์ดูดซึมและความสำคัญทางโภชนาการของ PepT1 คือรู้จักสัตว์ในการผลิตอาหารมาก ดังนั้น วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้คือการ โคลน และการทำงานลักษณะของหมู PepT1 (pPepT1) สอง cDNA เข้ารหัส pPepT1 ได้แยก ซึ่งประกอบด้วย polyadenylation ทดแทนอเมริกา PPepT1 คาดการณ์คือ โปรตีน 708-AA ซึ่ง แสดง 82.8, 85.7 และ 64.7% AA ตัวตนมนุษย์ แกะ ไก่ PepT1 ตามลำดับ บนกันบล็อทเหนือ สอง pPepT1 mRNA ของฐานประมาณ 2.9 แล้วพบใน duodenum, jejunum และลำไส้เล็กส่วน ileum และ presumed เป็นผล polyadenylation อื่น ของ [3H] - Gly - เขตบริหารพิเศษถูกวัดในเซลล์รังไข่ของหนูแฮมสเตอร์จีน transiently transfected กับเวกเตอร์นิพจน์ pPepT1 ศึกษาค่าการทำงานของ pPepT1 ขนส่งเพปไทด์มี H + - ขึ้นอยู่กับ pH 6.0-6.5 เหมาะสม ความสามารถของ pPepT1 เพื่อการขนส่งต่าง ๆ เปปไทด์ถูก assayed โดยการคำนวณความเข้มข้นของเพปไทด์ไม่ที่ห้าม 50% ดูดซับ [3H] - Gly - เขตบริหารพิเศษ (IC50) ในเซลล์ transfected Dipeptides 11 และ tripeptides สองมีค่า IC50 ที่อยู่ในช่วงจาก 0.004 0.53 มม. เปปไทด์สาม Lys Lys อาร์กิวเมนต์ของค่า Lys และ Lys-Trp-Lys มีค่า IC50 มากกว่า 1 38 มม. และดูเหมือน พื้นผิวที่ดีสำหรับ pPepT1 สำหรับทั้งหมดสาม tetrapeptides ตรวจสอบ ของเขตบริหารพิเศษ Gly เล็กเกินไปวัด แม้ที่ความเข้มข้นของ 10 มม. tetrapeptide ดังนั้น ค่า IC50 ไม่สามารถคำนวณ ผลเหล่านี้แสดงให้เห็นถึง pPepT1 ที่สามารถขนส่ง dipeptides และ tripeptides แต่ tetrapeptides ไม่หลากหลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การดูดซึมของโปรตีนสามารถพึ่งผ่านการดูดซึมของ AA เป็นอิสระ AA หรือเปปไทด์ขนาดเล็ก H + -coupled โปรตีนเปปไทด์การขนส่ง, PepT1 เป็นผู้รับผิดชอบในการดูดซึมของเปปไทด์ขนาดเล็กที่เกิดจากการย่อยโปรตีนในอาหารในลำไส้เล็ก ความสำคัญของการดูดซึมเปปไทด์และอย่างมีนัยสำคัญทางโภชนาการของ PepT1 ไม่เป็นที่รู้จักสำหรับสัตว์อาหารการผลิตหลาย; ดังนั้นวัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้คือการโคลนและกำหนดลักษณะการทำงานของหมู PepT1 (pPepT1) สอง cDNA เข้ารหัส pPepT1 ถูกแยกซึ่งมีเว็บไซต์ Polyadenylation ทางเลือก ทำนาย pPepT1 เป็นโปรตีน 708-AA ซึ่งแสดงให้เห็น 82.8, 85.7, 64.7 และเอกลักษณ์% AA ถึงมนุษย์แกะและไก่ PepT1 ตามลำดับ ในภาคเหนือของ blots สอง pPepT1 mRNA ประมาณ 2.9 และ 3.5 กิโลถูกตรวจพบในลำไส้เล็กส่วนต้น, jejunum และ ileum ของลำไส้เล็กและมีการสันนิษฐานว่าเป็นผลมาจาก Polyadenylation ทางเลือก การดูดซึมของ [3H] -Gly-Sar วัดในเซลล์รังไข่จีนหนูแฮมสเตอร์ transfected transiently กับเวกเตอร์แสดงออก pPepT1 เพื่อศึกษาการแสดงออกของการทำงานของ pPepT1 การขนส่งเพปไทด์เป็น H + -dependent มีค่า pH ที่เหมาะสมของ 6.0-6.5 ความสามารถในการ pPepT1 การขนส่งเปปไทด์ต่าง ๆ ได้รับการวิเคราะห์โดยการคำนวณความเข้มข้นของเปปไทด์ที่ไม่มีป้ายกำกับที่ยับยั้ง 50% ของ [3H] ดูดซึม -Gly-Sar (IC50) ในเซลล์ transfected Eleven dipeptides และสอง tripeptides มีค่า IC50 ที่อยู่ระหว่าง 0.004-0.53 มิลลิ สามเปปไทด์, ลิซลี, หาเรื่องลิซและลิซ-TRP-ลิซมีค่า IC50 สูงกว่า 1. 38 มิลลิเมตรและดูเหมือนจะเป็นพื้นผิวที่ดีสำหรับ pPepT1 สำหรับทั้งสาม tetrapeptides ตรวจสอบการดูดซึมของ Gly-Sar มีขนาดเล็กเกินไปที่จะวัดได้ที่ความเข้มข้น 10 มิลลิ tetrapeptide; ดังนั้นค่า IC50 ไม่สามารถคำนวณ ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่า pPepT1 สามารถส่งความหลากหลายของ dipeptides และ tripeptides แต่ไม่ tetrapeptides

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การดูดซึมของอาหารโปรตีนที่สามารถผ่านผ่านการดูดซึมของ AA ฟรี AA หรือเปปไทด์ขนาดเล็ก H - คู่ , เปปไทด์การขนส่งโปรตีน pept1 , รับผิดชอบเกี่ยวกับการดูดซึมของเปปไทด์ขนาดเล็กที่เกิดจากการย่อยอาหารของอาหารโปรตีนในลำไส้ ขนาดของการดูดซึมเปปไทด์และความสำคัญทางโภชนาการของ pept1 ไม่รู้หลายอาหาร การผลิตสัตว์ ดังนั้นวัตถุประสงค์ของการศึกษานี้คือ การโคลนและศึกษาลักษณะการทำงานของหมู pept1 ( ppept1 ) สองสายพันธุ์ที่แยกได้ ppept1 การเข้ารหัสซึ่งประกอบด้วยเว็บไซต์เพิ่มทางเลือก ทำนาย ppept1 เป็น 708-aa โปรตีนที่แสดง 82.8 85.7% และเอกลักษณ์ AA 64.7 ) มนุษย์แกะและไก่ pept1 ตามลำดับ ในภาคเหนือของกรรไกร , สอง ppept1 ประมาณ 29 และ 3.5 kb ถูกตรวจพบในลำไส้เล็ก ลำไส้เล็ก , และส่วนของลำไส้เล็ก และสันนิษฐานว่า ผลจากการเพิ่มทางเลือก การดูดซึม [ 3 ] - GLY และวัดในจีนหนูแฮมสเตอร์รังไข่เซลล์บุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราว transfected กับ ppept1 เพื่อศึกษาการแสดงออกทางสีหน้าเวกเตอร์การทำงานของ ppept1 . เปปไทด์การขนส่งเป็น H - ขึ้นอยู่กับที่เหมาะสม pH 6.0 - 6.5 .ความสามารถของ ppept1 เปปไทด์ซีรั่มเพื่อการขนส่งต่าง ๆโดยการคำนวณความเข้มข้นของเปปไทด์ที่ใกล้เคียงยับยั้ง 50% [ 3 ] - การใช้ GLY SAR ( ic50 ) ใน transfected เซลล์ ไดเพปไตด์สิบเอ็ดและสองไตรเปปไตด์มี ic50 ค่าที่มีค่าตั้งแต่ 0.004 ถึง 0.53 มิลลิเมตร 3 ดู . . , ไม่ดี . . . ก และมี ic50 ค่ามากกว่า 138 มม. และดูเหมือนจะทำให้ยากจน ppept1 . ทั้งสาม tetrapeptides ตรวจสอบ , การดูดใช้ GLY ซาร์ก็เล็กเกินไปที่จะวัด แม้มีความเข้มข้นของเตตระเพปไทด์ 10 มิลลิเมตร ดังนั้น ic50 ค่าไม่สามารถคำนวณ . ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า ppept1 สามารถขนส่งและความหลากหลายของไดเปบไทด์ไตรเปปไตด์ แต่ไม่ tetrapeptides .