For the isolation of Trichoderma st

For the isolation of Trichoderma strains, soil samples were collected from rice fields located all over Mazandaran province (Figure 1), on the southern coast of the Caspian Sea. Soil was taken with an auger from a depth of 15 cm. Samples were air dried for 3–5 days at room temperature. Trichoderma isolates were obtained by the dilution plate method (Dhingra and Sinclair, 1995) on McFadden & Sutton’s RB-S-F Trichoderma selective medium (Davet and Rouxel, 2000). Sieved soil samples (10 g) were shaken in 90 mL sterile water for 10 minutes. For the isolation of Trichoderma from the rice phyllosphere, the leaves and stems were cut into small pieces (1 cm2), transferred to 500 mL Erlenmeyer flask with 100 mL sterile distilled water and placed on a shaker for one hour. A dilution series up to 10-6 was made from the samples. Aliquots (1 mL) were spread on Petri plates containing a selective medium and were then incubated at 25°C in the dark. Trichoderma isolates were also purified directly from fungal masses on rice debris. Putative Trichoderma colonies (from soil and foliage samples) were purified on PDA plates by the single spore method and deposited in the Microbiological Collection of the University of Szeged (SzMC).sequences in the NCBI GenBank

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สำหรับแยก Trichoderma สายพันธุ์ ตัวอย่างดินจัดเก็บจากข้าวทั่วทั้งจังหวัด Mazandaran (รูปที่ 1), ทางทิศใต้ของทะเลแคสเปียน ดินถูกถ่ายกับชอนจากลึก 15 cm. ตัวอย่างการถูกอากาศแห้ง 3-5 วันที่อุณหภูมิห้อง Trichoderma แยกได้รับ โดยการเจือจางจานวิธี (Dhingra และนแคลร์ 1995) ใน McFadden & ของซัตตั้น Trichoderma RB-S-F เลือกปานกลาง (Davet และ Rouxel, 2000) Sieved ดินตัวอย่าง (10 g) ถูกเขย่าในน้ำฆ่าเชื้อ 90 มล. 10 นาที สำหรับแยกของ Trichoderma จาก phyllosphere ข้าว ใบและลำต้นถูกตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ (1 cm2), โอนย้ายไป 500 mL Erlenmeyer หนาว ด้วยน้ำกลั่น 100 mL ใส่ และวางบนเชคเกอร์เป็นเวลาหนึ่งชั่วโมง ชุดเจือจางขึ้นถึง 10-6 ทำจากตัวอย่าง Aliquots (1 mL) ได้แผ่บนจาน Petri ประกอบด้วยสื่อใช้ และถูก incubated แล้วที่ 25° C ในมืด Trichoderma แยกได้ยังบริสุทธิ์โดยตรงจากมวลชนเชื้อราในข้าวเศษ บริสุทธิ์ โดยวิธีสปอร์เดี่ยวบนแผ่น PDA และฝากในคอลเลกชันทางจุลชีววิทยาของ.sequences มหาวิทยาลัย Szeged (SzMC) ใน NCBI GenBank putative Trichoderma อาณานิคม (จากตัวอย่างดินและใบ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สำหรับการแยกสายพันธุ์เชื้อรา Trichoderma ตัวอย่างดินที่เก็บได้จากนาข้าวที่ตั้งอยู่ทั่วจังหวัด Mazandaran (รูปที่ 1) บนชายฝั่งทางตอนใต้ของทะเลสาบแคสเปียน ดินที่ถูกถ่ายด้วยสว่านจากความลึก 15 เซนติเมตร ตัวอย่างอากาศแห้งประมาณ 3-5 วันที่อุณหภูมิห้อง สายพันธุ์เชื้อรา Trichoderma ที่ได้รับโดยวิธีการเจือจางแผ่น (Dhingra และซินแคล, 1995) ใน McFadden และซัตตัน RB-SF เ​​ชื้อรา Trichoderma กลางเลือก (Davet และ Rouxel, 2000) ร่อนตัวอย่างดิน (10 กรัม) ถูกเขย่า 90 มิลลิลิตรน้ำหมันเป็นเวลา 10 นาที สำหรับการแยกเชื้อรา Trichoderma จาก phyllosphere ข้าวใบและลำต้นถูกตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ (1 cm2) โอนไป 500 มิลลิลิตรขวด Erlenmeyer 100 มิลลิลิตรน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อและวางไว้บนเครื่องปั่นเป็นเวลาหนึ่งชั่วโมง ชุดลดสัดส่วนถึง 10-6 ทำจากกลุ่มตัวอย่าง aliquots (1 มิลลิลิตร) กระจายอยู่บนจานเพาะเชื้อที่มีสื่อที่เลือกและถูกบ่มแล้วที่ 25 ° C ในที่มืด สายพันธุ์เชื้อรา Trichoderma บริสุทธิ์ยังได้โดยตรงจากฝูงเชื้อราบนเศษข้าว อาณานิคมสมมุติเชื้อรา Trichoderma (จากตัวอย่างดินและใบไม้) ถูกนำมาทำให้บริสุทธิ์บนจาน PDA โดยวิธีสปอร์เดียวและฝากไว้ในคอลเลกชันทางจุลชีววิทยาของมหาวิทยาลัยเกด (SzMC) .sequences ใน GenBank NCBI

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สำหรับการแยกเชื้อราสายพันธุ์ เก็บตัวอย่างดินจากนาข้าวอยู่ทั่วจังหวัด ( รูปที่ 1 ) , บนชายฝั่งทางตอนใต้ของทะเลแคสเปี้ยน ดินถ่ายด้วยสว่านจากความลึก 15 เซนติเมตร ตัวอย่างแห้ง 3 - 5 วัน ที่อุณหภูมิห้อง เชื้อราไอโซเลทที่ได้จากการเจือจางวิธีเพลท ( dhingra และ ซินแคลร์1995 ) ของ แม็คฟาดเด้น&ซัตตัน rb-s-f Trichoderma เลือกขนาดกลาง ( davet และ rouxel , 2000 ) ขนาดตัวอย่างดิน ( 10 กรัม ) สั่นสะเทือนใน 90 ml หมันน้ำเป็นเวลา 10 นาที สำหรับการแยกเชื้อราจากผิวใบข้าว ใบและลำต้นมาตัดเป็นชิ้นเล็กๆ ( 1 ตร. ซม. )โอนไป 500 มล. ขวด 100 ml เออร์เลนเมเยอร์ฆ่าเชื้อน้ำและวางไว้บนเครื่องปั่นเป็นเวลาหนึ่งชั่วโมง เจือจางชุดขึ้นไปสามารถถูกสร้างขึ้นจากตัวอย่าง เฉยๆ ( 1 มิลลิลิตรกระจายบนจาน Petri ประกอบด้วยสื่อที่เลือกและบ่มที่อุณหภูมิ 25 ° C ) จากนั้นในที่มืด เชื้อราไอโซเลทยังบริสุทธิ์โดยตรงจากมวลเชื้อราบนเศษข้าวซึ่งเชื้อราอาณานิคม ( จากดินและตัวอย่างใบ ) มีความบริสุทธิ์ใน PDA แผ่นโดยวิธีสปอร์เดี่ยว และฝากในคอลเลกชันทางจุลชีววิทยาของมหาวิทยาลัยเกด ( szmc ลำดับในขนาด ncbi )