2. Materials and methods2.1. Bacter

2. Materials and methods
2.1. Bacterial strains
From June 2000 to December 2001, 500 food samples
obtained from supermarkets and shops selling ready-toeat
food in the Rosario, Argentina, were examined for
E. coli. The samples were randomly collected by
inspectors from the Rosario Food Institute by the
recommended methodology of the International Commission
of Microbiological Specifications for Food.
E. coli strains were isolated and identified as described
previously (Pradel et al., 2000). Briefly, a 25g portion of
each of the samples was homogenized in a stomacher
with 225ml of peptone broth (Merck, Darmstadt,
Germany). After the dilution step, the samples were
pre-enriched in lauryl sulfate broth, incubated for 48 h
at 35 1C and streaked for isolation on Levine agar (Difco
Laboratories, Detroit, Michigan, USA) plates. After
overnight incubation at 37 1C, 10 colonies each of both
lactose-fermenting and non-lactose-fermenting bacteria
were selected and identified, utilizing biochemical tests
(API 20 E, BioMe´rieux SA, France). E. coli O157:H7
ATCC43890 and 933J from the National Institute of
Infectious Diseases (Argentina) which possess the Shiga
toxin gene stx1; ATCC43889 and ATCC43895from the
American Type Culture Collection, which express the
Shiga toxins genes stx2 and both stx1 and stx2,
respectively, and the attaching-and-effacing lesion gene
(eaeA) were used as positive controls. The strain
ATCC43895harbors the enterohemolysin gene encoded
in a 60 Mda plasmid (Schmidt et al., 1994) and the stx2
phage, 933W (Strockbine et al., 1998). Enterotoxigenic
E. coli ATCC35401, which expresses LTI and STI, and
E. coli T149, which express fimbriae P and a-hemolysin
(Balague´ et al., 2002) were also used as positive controls.
E. coli HB101 and ATCC98222 were used as negative
controls.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. แบคทีเรียสายพันธุ์จาก 2000 เดือนมิถุนายนถึง 2544 ธันวาคม ตัวอย่างอาหาร 500ได้รับจากซูเปอร์มาร์เก็ตและร้านค้าที่ขายพร้อม toeatมีการตรวจสอบอาหารในโรซาริโอ อาร์เจนติน่า สำหรับE. coli ตัวอย่างถูกสุ่มเก็บรวบรวมโดยผู้ตรวจสอบจาก สถาบันอาหารโรซาริโอโดยวิธีการแนะนำคณะกรรมการนานาชาติของข้อกำหนดทางจุลชีววิทยาสำหรับอาหารE. coli สายพันธุ์แยกต่างหาก และระบุดังที่ก่อนหน้านี้ (Pradel et al., 2000) สั้น ๆ 25 กรัมส่วนของแต่ละอย่างถูก homogenized เป็นกลุ่มในการแผงประดับหน้าอกมี 225ml ของซุป peptone (เมอร์ค ดาร์มสเยอรมนี) หลังจากขั้นตอนการเจือจาง ตัวอย่างดีเตรียมอุดมไปในซุปซัลเฟต lauryl, incubated สำหรับ 48 hที่ 35 1C และลายสำหรับแยกใน agar Levine (Difcoห้องปฏิบัติการ ดีทรอยต์ มิชิแกน สหรัฐอเมริกา) แผ่น หลังจากฟักตัวแรมที่ 37 1C, 10 อาณานิคมแต่ละทั้งสองอย่างแบคทีเรีย fermenting แล็กโทส และไม่แล็กโทส-fermentingเลือก และระบุ ใช้ทดสอบชีวเคมี(API 20 E, BioMe´rieux SA ฝรั่งเศส) O157:H7 e. coliATCC43890 และ 933J จาก สถาบันแห่งชาติโรคติดเชื้อ (อาร์เจนตินา) ที่มีในชิงะพิษยีน stx1 ATCC43889 และ ATCC43895fromอเมริกันวัฒนธรรมคอลเลกชันชนิด การแสดงการชิงะพิษยีน stx2 และ stx1 และ stx2ตามลำดับ และยีนแผลแนบ และ-effacing(eaeA) ใช้เป็นตัวควบคุมค่าบวก สายพันธุ์การเข้ารหัสยีน enterohemolysin ATCC43895harborsใน plasmid Mda 60 (Schmidt et al., 1994) และ stx2phage, 933W (Strockbine และ al., 1998) EnterotoxigenicATCC35401, e. coli ซึ่งแสดง LTI และ STI และColi E. T149 ที่ fimbriae P และเป็น hemolysin(Balague´ et al., 2002) ยังใช้เป็นตัวควบคุมบวกE. coli HB101 และ ATCC98222 ถูกใช้เป็นค่าลบควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 สายพันธุ์แบคทีเรียตั้งแต่เดือนมิถุนายน 2000 ถึงธันวาคม 2001, 500 ตัวอย่างอาหารที่ได้รับจากซูเปอร์มาร์เก็ตและร้านค้าที่ขายพร้อมtoeat อาหารในโรซาริโอ, อาร์เจนตินามีการตรวจสอบสำหรับอี coli กลุ่มตัวอย่างที่เก็บรวบรวมโดยการสุ่มตรวจสอบจากสถาบันอาหารโรซาริโอโดยวิธีการที่แนะนำของคณะกรรมาธิการระหว่างประเทศของคุณสมบัติทางจุลชีววิทยาสำหรับอาหาร. อี สายพันธุ์ coli ที่แยกและระบุตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Pradel et al., 2000) สั้น ๆ ส่วน 25g ของแต่ละตัวอย่างที่ถูกปั่นในStomacher กับ 225ml ของน้ำซุปเปปโตน (เมอร์ค, ดาร์มสตัด, เยอรมนี) หลังจากขั้นตอนการเจือจางตัวอย่างได้ก่อนที่อุดมด้วยน้ำซุปลอริลซัลเฟต, บ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงที่35 1C และลายแยกบน Levine วุ้น (Difco ห้องปฏิบัติการ, ดีทรอยต์รัฐมิชิแกนสหรัฐอเมริกา) แผ่น หลังจากบ่มค้างคืนที่ 1C 37, 10 โคโลนีในแต่ละของทั้งสองแลคโตสหมักและไม่แลคโตสหมักแบคทีเรียที่ได้รับการคัดเลือกและมีการระบุการใช้การทดสอบทางชีวเคมี(API 20 E, BioMe'rieux SA, ฝรั่งเศส) O157 เชื้อ E. coli: H7 ATCC43890 และ 933J จากสถาบันแห่งชาติของโรคติดเชื้อ(อาร์เจนตินา) ซึ่งมีความ Shiga stx1 ยีนพิษ; ATCC43889 และ ATCC43895from เก็บวัฒนธรรมประเภทอเมริกันซึ่งแสดงShiga สารพิษยีน Stx2 และทั้งสอง stx1 และ Stx2, ตามลำดับและติดและ effacing ยีนแผล(eaeA) ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวก ความเครียดATCC43895harbors ยีน enterohemolysin เข้ารหัสใน60 Mda พลาสมิด (Schmidt et al., 1994) และ Stx2 ทำลายจุลินทรีย์, 933W (Strockbine et al., 1998) enterotoxigenic อี coli ATCC35401 ซึ่งเป็นการแสดงออกถึงความ LTI และ STI และอี coli T149 ซึ่งแสดง fimbriae P และ-hemolysin (Balague' et al., 2002) นอกจากนี้ยังถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมบวก. อี coli HB101 ATCC98222 และถูกนำมาใช้เป็นเชิงลบการควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . แบคทีเรีย
จากเดือนมิถุนายน 2543 ถึงธันวาคม 2544 , 500 ตัวอย่างอาหารได้จากซุปเปอร์มาร์เก็ต และร้านค้าขาย

พร้อมอาหาร toeat ใน Rosario , อาร์เจนตินา , มีวัตถุประสงค์เพื่อ
E . coli . ตัวอย่างสุ่มโดย
ผู้ตรวจสอบจาก โรซาริโอ สถาบันอาหาร โดยวิธีการแนะนำของคณะกรรมาธิการระหว่างประเทศ

คุณสมบัติทางจุลชีววิทยาอาหาร
E . coli สายพันธุ์ที่แยกและระบุตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (
pradel et al . , 2000 ) สั้น , 25g
แต่ละส่วนของจำนวนโฮโมในแผงประดับหน้าอก
กับ 225ml extract broth ( เมอร์คดาร์มสตัดท์ เยอรมนี , ,
) หลังจากการก้าว , จำนวน
Pre อุดมในลอริลซัลเฟต broth บ่ม 48 ชั่วโมง
ที่ 35 c และลายสำหรับแยกบน เลวีน ( difco
ห้องปฏิบัติการ , Detroit , Michigan , USA ) จาน หลังจาก
ค้างคืนบ่มที่ 37 1C , 10 โคโลนีแต่ละของทั้งสอง
แล็กโตสหมักและไม่หมักแบคทีเรียแลคโตส
ถูกเลือกและระบุใช้ชีวเคมีทดสอบ
( API 20 E , ไบโอมใหม่ rieux ซา , ฝรั่งเศส ) E . coli เป็นสมาชิก : H7
atcc43890 933j และจากสถาบัน
โรคติดเชื้อ ( อาร์เจนตินา ) ซึ่งมียีน stx1 สารพิษชิกา

; atcc43889 atcc43895from ประเภทวัฒนธรรมอเมริกันและคอลเลกชันที่แสดงออก
งะ ยีน stx2 ทั้ง stx1 สารพิษและ stx2
และ , ตามลำดับ และแนบ effacing รอยโรคและยีน
( eaea ) ใช้เป็นตัวควบคุมบวก เมื่อย
atcc43895harbors ที่ enterohemolysin ยีนเข้ารหัส
ใน 60 ( พลาสมิด ( ชมิดท์ et al . ,1994 ) และ stx2
ฟา 933w ( strockbine , et al . , 1998 ) E
E . coli atcc35401 ซึ่งแสดงมัลติและ STI และ
E . coli t149 ซึ่งบริการฟิมเบรีย P และ a-hemolysin
( balague ใหม่ et al . , 2002 ) นอกจากนี้ยังใช้เป็นตัวควบคุมบวก .
E . coli และ hb101 atcc98222 ถูกใช้เป็นตัวควบคุมเชิงลบ