2.3. Test for safety considerations of LAB
2.3.1. DNase test
The selected LAB were grown in MRS broth than transferred
onto DNase Agar containing toluidine blue. The DNase activity was
described by observing a clear zone around the colonies.
2.3.2. Hemolytic activity
Fresh cultures of LAB were streaked on Columbia agar plates,
containing 5% (w/v) sheep blood, and incubated for 48 h at 37 C
[23]. Plates were examined for signs of b-hemolysis (clear zones
around colonies), a-hemolysis (green-hued zones around colonies)
or g-hemolysis (no clear zones around colonies). Staphylococcus
aureus ATCC 25923 and Escherichia coli ATCC 35218 were used as
positive control for b - and for a -hemolysis respectively. The assay
was performed twice.
2.3.3. Antibiotics susceptibility of the selected strains
The antibiotic susceptibility of LAB was tested against Penicillin
(6 mg), Amoxycillin (20 mg), Piperacillin (10 mg), Streptomycin
(10 mg), Streptomycin (500 mg), Kanamycin (30 mg), Novobiocin
(5 mg), Rifampicin (30 mg), Ofloxacin (5 mg), Aztreonam (30 mg) and
Cefalotin (30 mg) using the agar disc diffusion assay [24].
Bacterial suspensions (108 CFU/mL) were inoculated in Muller
Hinton agar using sterile cotton swabs. The plates were air dried for
15 min, then discs containing antibiotics were deposited on the
plates.
After 18 h of incubation at 37 C, inhibition zone diameters
around each disc were measured and the strains were categorized
as resistant, intermediate resistant, or susceptible to the antimicrobial
agents based on the inhibition zone size [24,25]. Mean
values of three independent assays were reported.
2.3. ทดสอบสำหรับข้อควรพิจารณาด้านความปลอดภัยของห้องปฏิบัติการ2.3.1. DNase ทดสอบห้องปฏิบัติการเลือกที่ปลูกในน้ำซุป MRS กว่าโอนลง DNase วุ้นที่ประกอบด้วย toluidine สีฟ้า แก้ไขกิจกรรม DNaseอธิบาย โดยสังเกตโซนใสรอบโคโลนี2.3.2. กิจกรรมที่ hemolyticวัฒนธรรมใหม่ของห้องปฏิบัติได้ลายบนแผ่นวุ้นโคลัมเบียที่ประกอบด้วยเลือดแกะ 5% (w/v) และรับการกก 48 ชั่วโมงที่ 37 C[23] . แผ่นถูก examined สัญญาณของ b-hemolysis (โซนที่ชัดเจนทั่วอาณานิคม), มีเม็ดเลือดแดง (สีเขียวจัดโซนทั่วอาณานิคม)หรือ g-hemolysis (โซนไม่ชัดเจนทั่วอาณานิคม) Staphylococcusหมอเทศข้างลาย ATCC 25923 และ Escherichia coli ATCC 35218 ถูกใช้เป็นบวกควบคุม สำหรับ b - และ-เม็ดเลือดแดงตามลำดับ การทดสอบทำสองครั้ง2.3.3. ยาปฏิชีวนะความอ่อนแอของสายพันธุ์ที่เลือกความไวต่อยาปฏิชีวนะของห้องปฏิบัติทดสอบกับยาเพนนิซิลลิน(6 mg), Amoxycillin (20 mg), เดนท์ (10 มิลลิกรัม) Streptomycin(10 มิลลิกรัม), Streptomycin (500mg), กานามัยซิน (30 mg) Novobiocin(5 mg), Rifampicin (30 mg), Ofloxacin (5 mg) Aztreonam (30 มิลลิกรัม) และCefalotin (30 มิลลิกรัม) โดยใช้การกระจายแผ่นวุ้น assay [24]สารแขวนลอยแบคทีเรีย (108 CFU/mL) ถูก inoculated ในมูลเลอร์Hinton วุ้นที่ใช้ฝ้ายที่ผ่านการฆ่าเชื้อ แผ่นถูกอากาศแห้งสำหรับ15 นาที จากนั้นดิสก์ที่ประกอบด้วยยาปฏิชีวนะถูกฝากไว้ในการแผ่นหลังจาก h 18 ของบ่มที่ 37 C เส้นผ่านศูนย์กลางเขตการยับยั้งรอบแต่ละดิสก์ที่มีวัด และมีแบ่งสายพันธุ์ทน ทนปานกลาง หรือไวต่อสารต้านจุลชีพตัวแทนที่ขึ้นอยู่กับขนาดโซนยับยั้ง [24,25] หมายถึงอะไรมีรายงานค่าของ assays อิสระสาม
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3 ทดสอบความปลอดภัยของแล็บ2.3.1 . ทดสอบตรวจหา ADNaseห้องปฏิบัติการที่ถูกปลูกใน MRS broth กว่าโอนไปตรวจหา ADNase วุ้นที่มีโทลูอิดีนสีฟ้า การตรวจหา ADNase กิจกรรมอธิบายการสังเกตบริเวณใสรอบโคโลนี .2.3.2 . หลังกิจกรรมวัฒนธรรมใหม่ของแลปลายบนแผ่นวุ้น โคลัมเบียที่ประกอบด้วย 5% ( w / v ) เลือดแกะและบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง[ 23 ] แผ่นทดสอบสัญญาณของ b-hemolysis ( โซนใสรอบโคโลนี ) , ( โซนสีเขียว a-hemolysis hued รอบโคโลนี )หรือ g-hemolysis ( ไม่ล้างโซนรอบโคโลนี ) สแตฟิโลคอคคัสaureus ATCC 25923 และ Escherichia coli ATCC 35218 ถูกใช้เป็นบวกการควบคุมสำหรับ B - และ - การตามลำดับ แบคทีเรียแบ่งเป็น 2 ครั้ง2.3.3 . ยาปฏิชีวนะกลุ่มของเลือกสายพันธุ์ความไวของห้องปฏิบัติการทดสอบกับยาปฏิชีวนะเพนนิซิลิน( ลิน ( 6 มก. ) 20 มก. ) , พิเพอราซิลลิน ( 10 mg ) , สเตร็ปโตมัยซิน( 10 mg ) , สเตร็ปโตมัยซิน ( 500 mg ) , kanamycin ( 30 มิลลิกรัม ) โนโวไบโอซิน( 5 มิลลิกรัม ) , rifampicin ( 30 มิลลิกรัม ) ออฟลอกซาซิน ( 5 มิลลิกรัม ) , แอซทรีโอนัม ( 30 มิลลิกรัม ) และเซฟาโลติน ( 30 มิลลิกรัม ) โดยใช้แผ่นวุ้นกระจาย ) [ 24 ]จุลินทรีย์แขวนลอย ( 108 CFU / ml ) ข้ มูลเลอร์วุ้น ฮินตัน โดยใช้ผ้าฝ้าย swabs หมัน แผ่นแห้งสำหรับ15 นาที จากนั้นแผ่นดิสก์ที่มียาปฏิชีวนะเป็นฝากบนแผ่นหลังจาก 18 H บ่มที่อุณหภูมิ 37 บริเวณยับยั้งเส้นผ่าศูนย์กลาง ,รอบแต่ละแผ่นจะถูกวัดและจำแนกสายพันธุ์เป็นป้องกัน ต้านทานปานกลาง หรือเสี่ยงต่อการต้านจุลชีพตัวแทนตามขนาด [ การยับยั้ง 24,25 ] หมายถึง3 ) ค่าอิสระคือ รายงาน
การแปล กรุณารอสักครู่..