2.5. Ferric reducing/anti-oxidant power (FRAP) assay
FRAP assay was based on the reduction of Fe3+–TPTZ to a blue
coloured.
Fe2+–TPTZ (Benzie & Strain, 1996). The FRAP assay was adapted
from Benzie and Strain (1996) and Moyer, Hummer, Finn, Frei, and
Wrolstad (2002). The anti-oxidant potential of the extract from citrus
peel was determined against a standard curve of ferrous sulphate
(FeII, 0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 and 3.0 mM) in Milli-Q water
or methanol with 0.1% (v/v) HCl.
The FRAP reagent was freshly prepared by mixing 100 ml of acetate
buffer (300 mM, pH 3.6), 10 ml TPTZ solution (10 mM TPTZ in
40 mM HCl), 10 ml FeCl36H2O (20 nM) in a ratio of 10:1:1 and
12 ml distiled water, at 37 C. To perform the assay, 1.8 ml of FRAP
reagent, 180 ll Milli-Q water and 60 ll sample, standard or blank
were then added to the same test tubes, and incubated at 37 C for
4 min; absorbance was measured at 593 nm, using the FRAP working
solution as a blank. The reading of relative absorbance should
be within the range 0–2.0; otherwise, the sample should be diluted.
In the FRAP assay, the anti-oxidant potential of sample was determined
from a standard curve plotted using the FeSO47H2O linear
regression equation to calculate the FRAP values of the sample.
2.6. Determination of total phenolics contents
Total phenolics content was determined using Folin–Ciocalteu
reagent as followed by Abu Bakar et al. (2009) as adapted from
Velioglu, Mazza, Gao, and Oomah (1998). Briefly, 300 ll of extract
was mixed with 2.25 ml of Folin–Ciocalteu reagent (previously diluted
10-fold with distiled water) and allowed to stand at room
temperature for 5 min; 2.25 ml of sodium carbonate (60 g/l) solution
was added to the mixture. After 90 min at room temperature,
absorbance was measured at 725 nm using a spectrophotometer.
Results were expressed as mg gallic acid equivalents in 1 g of dried
sample (mg GAE/g).
2.5. แหล่งลด/ป้องกัน-oxidant จ่ายไฟ (FRAP) assayFRAP assay ตามการลดลงของ Fe3 + – TPTZ ไปสีฟ้าสีของมันFe2 + – TPTZ (Benzie และสายพันธุ์ 1996) FRAP assay การแก้ไขดัดแปลงจาก Benzie และสายพันธุ์ (1996) และ Moyer, Hummer, Finn, Frei และWrolstad (2002) มีศักยภาพต่อต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดจากส้มกำหนดเส้นโค้งมาตรฐานของซัลเฟตเหล็กกับเปลือก(FeII, 0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 และ 3.0 มม.) ในน้ำหนึ่ง-Qหรือเมทานอลกับ 0.1% (v/v) HClรีเอเจนต์ FRAP ถูกสด ๆ ผสม 100 มล.ของอะซิเตทบัฟเฟอร์ 10 มล. TPTZ โซลูชัน (300 mM, pH 3.6), (10 mM TPTZ ใน40 มม. HCl), 10 ml FeCl3 6H2O (20 นาโนเมตร) ในอัตราส่วน 10:1:1 และน้ำ 12 ml distiled ที่ 37 c การทดสอบ 1.8 มิลลิลิตร FRAPน้ำยา น้ำ ll หนึ่งคิว 180 และ 60 ll ตัว อย่าง มาตรฐาน หรือเปล่าแล้วลงในหลอดทดลองเดียวกัน และรับการกกที่ 37 C สำหรับ4 นาที โดยวัดค่าที่ 593 นาโนเมตร ใช้งาน FRAPแก้ปัญหาเป็นว่างเปล่า ควรอ่านค่าสัมพัทธ์ภายในระยะ 0 – 2.0 มิฉะนั้น ควรเจือจางตัวอย่างกำหนดศักยภาพต่อต้านอนุมูลอิสระของตัวอย่างในการ FRAP assayจากพล็อต 7H2O FeSO4 เชิงเส้นโดยใช้เส้นโค้งมาตรฐานสมการถดถอยเพื่อคำนวณค่า FRAP ตัวอย่าง2.6. การกำหนดเนื้อหา phenolics รวมPhenolics รวมเนื้อหากำหนดใช้ท่อง – Ciocalteuรีเอเจนต์ดังโดย Abu Bakar et al. (2009) ดัดแปลงมาจากVelioglu, Mazza เกา และ Oomah (1998) สั้น ๆ 300 ll ของสารสกัดถูกผสมกับรีเอเจนต์ท่อง – Ciocalteu (ก่อนหน้านี้เจือจาง 2.25 มิลลิลิตร10-fold distiled น้ำ) และอนุญาตให้ยืนที่ห้องอุณหภูมิ 5 นาที 2.25 มิลลิลิตรของสารละลายโซเดียมคาร์บอเนต (60 กรัม/ลิตร)ถูกส่วนผสม หลังจาก 90 นาทีที่อุณหภูมิห้องโดยวัดค่าที่ 725 nm ใช้สเปคผลลัพธ์ถูกแสดงเป็นรายการเทียบเท่ากรด gallic มิลลิกรัมใน 1 กรัมของแห้งตัวอย่าง (mg/g อยู่)
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.5 Ferric ลดอำนาจ / สารต้านอนุมูลอิสระ (FRAP) ทดสอบ
FRAP ทดสอบอยู่บนพื้นฐานของการลดลงของ Fe3 + -TPTZ เพื่อสีฟ้า
สี.
Fe2 + -TPTZ (Benzie และความเครียด, 1996) การทดสอบ FRAP ถูกดัดแปลง
จาก Benzie และความเครียด (1996) และ Moyer, Hummer, ฟินแลนด์, ฟรีและ
Wrolstad (2002) ที่มีศักยภาพในการต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดจากส้ม
เปลือกก็ตั้งใจกับเส้นโค้งมาตรฐานของเฟอรัสซัลเฟต
(FeII, 0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 และ 3.0 มิลลิเมตร) ในน้ำ Milli-Q
หรือเมทานอล 0.1% (V / v) HCl.
น้ำยา FRAP ถูกปรุงสดใหม่โดยการผสม 100 มล. ของอะซิเตต
บัฟเฟอร์ (300 มิลลิเมตรมีค่า pH 3.6), 10 มิลลิลิตร TPTZ (10 มิลลิ TPTZ ใน
40 มิลลิเมตร HCl), 10 มล. FeCl3? 6H2O (20 nM) ใน อัตราส่วน 10: 1: 1 และ
12 มล. น้ำ distiled ที่ 37 องศาเซลเซียสในการดำเนินการทดสอบที่ 1.8 มิลลิลิตร FRAP
น้ำยา 180 LL น้ำ Milli-Q และตัวอย่าง LL 60 มาตรฐานหรือเปล่า
นั้นก็เพิ่มให้กับการทดสอบเดียวกัน ท่อและบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา
4 นาที; การดูดกลืนแสงวัดที่ 593 นาโนเมตรโดยใช้การทำงาน FRAP
วิธีการแก้ปัญหาเป็นที่ว่างเปล่า การอ่านการดูดกลืนแสงของญาติควร
จะอยู่ในช่วง 0-2.0 นั้น มิฉะนั้นตัวอย่างควรจะเจือจาง.
ในการทดสอบ FRAP ที่มีศักยภาพต้านอนุมูลอิสระของกลุ่มตัวอย่างถูกกำหนด
จากเส้นโค้งมาตรฐานพโดยใช้เส้น FeSO4? 7H2O
สมการถดถอยในการคำนวณค่า FRAP ของกลุ่มตัวอย่าง.
2.6 ความมุ่งมั่นของเนื้อหาฟีนอลรวม
เนื้อหาฟีนอลทั้งหมดถูกกำหนดโดยใช้ Folin-Ciocalteu
น้ำยาดังต่อไปนี้โดยอาบูบาการ์, et al (2009) ขณะที่ดัดแปลงมาจาก
Velioglu, Mazza, Gao และ Oomah (1998) สั้น ๆ , 300 LL ของสารสกัด
ผสมกับ 2.25 มิลลิลิตร Folin-Ciocalteu น้ำยา (ก่อนหน้านี้ปรับลด
10 เท่าด้วยน้ำ distiled) และได้รับอนุญาตให้ยืนอยู่ที่ห้อง
อุณหภูมิ 5 นาที; 2.25 มล. โซเดียมคาร์บอเนต (60 กรัม / ลิตร) วิธีการแก้ปัญหา
ถูกบันทึกอยู่ในส่วนผสม หลังจาก 90 นาทีที่อุณหภูมิห้อง
การดูดกลืนแสงวัดที่ 725 นาโนเมตรโดยใช้สเปก.
ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นมิลลิกรัมเทียบเท่ากรดฝรั่งเศสใน 1 กรัมแห้ง
ตัวอย่าง (MG GAE / g)
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.5 ลด / พลังต่อต้านอนุมูลอิสระเฟอร์ริก ( VDO ) การทดสอบVDO วิธีขึ้นอยู่กับการลดลงของ fe3 + – tptz เป็นสีฟ้าสีfe2 + – tptz ( benzie และความเครียด , 1996 ) ใน VDO ใช้ ถูก ปรับจาก benzie และความเครียด ( 1996 ) และ มอยเออร์ Hummer , ฟิน , ฟรี , และwrolstad ( 2002 ) ต่อต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพของสารสกัดจากส้มเปลือกมุ่งมั่นกับเส้นโค้งมาตรฐานของเฟอร์รัสซัลเฟต( หลง , 0 , 0.5 , 1.0 , 1.5 , 2.0 , 2.5 และ 3.0 มิลลิเมตร ) ใน milli-q น้ำหรือเมทานอลกับ 0.1 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) HCL .ที่ใช้ก็สดใหม่ ปรุงโดยผสม Frap 100 มิลลิลิตรของอะซิเตตบัฟเฟอร์ ( 300 มม. , pH 3.6 ) , 10 โซลูชั่น tptz มิลลิลิตร ( 10 มม. tptz ใน40 มม. HCl ) 10 ml fecl36h2o ( 20 nm ) ในอัตราส่วน 10:1:1 และ12 ml distiled น้ำที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เพื่อทำการตรวจสอบและ VDO 1.8 มิลลิลิตร3 , 180 จะ milli-q น้ำ 60 จะใช้มาตรฐานหรือเปล่าแล้วเพิ่มหลอดทดสอบเดียวกันและบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา4 นาที ; การดูดกลืนแสง คือ วัดที่ 593 nm ใช้ Frap ทํางานโซลูชั่นที่เป็นช่องว่าง การอ่านค่าสัมพัทธ์ ควรอยู่ในช่วง 0 - 2.0 ; มิฉะนั้นตัวอย่างควรเจือจางใน VDO ) , ต่อต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพของกลุ่มตัวอย่างถูกกำหนดจากกราฟมาตรฐานวางแผนใช้ feso47h2o เชิงเส้นสมการถดถอยเพื่อคำนวณหาค่าของ VDO ตัวอย่าง2.6 การหาปริมาณ total phenolics เนื้อหาเนื้อหาที่ใช้วิเคราะห์ปริมาณ total phenolics folin – ciocalteuการกระทำตามโดย Abu Bakar et al . ( 2009 ) โดยดัดแปลงจากvelioglu Mazza , Gao และ oomah ( 1998 ) สั้น ๆ , 300 จะสกัดผสมกับ 2.25 กรัม folin – ciocalteu รีเอเจนต์ ( ก่อนหน้านี้ ทั้งนี้10 เท่า ด้วย distiled น้ำ ) และได้รับอนุญาตให้อยู่ในห้องอุณหภูมิ 5 นาที ; 2.25 กรัม โซเดียม คาร์บอเนต ( 60 กรัม / ลิตร ) โซลูชั่นถูกเพิ่มลงในส่วนผสม หลังจาก 90 นาที ที่อุณหภูมิห้องวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 725 nm ใช้วัสดุผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นมิลลิกรัม เทียบเท่าเพิ่มขึ้นใน 1 กรัม แห้งตัวอย่าง ( mg เก / กรัม )
การแปล กรุณารอสักครู่..
