Volvariella volvacea V14 was obtained from the culture collection of the Centre for International Services to Mushroom Biotechnology located at The Chinese Univer- sity of Hong Kong (accession no. CMB002). Escherichia coli DH5a was used for cloning and Pichia pastoris KM71H was used for protein expression. The pGEM-T vector (Promega, Madison, WI, USA) was used to subclone DNA fragments for sequencing. The pPICZaB vector (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) was used for construction of yeast expression vector. For extraction of RNA, the fungus was cultured in rice straw compost as described previously [10]. The xylans from beechwood, birchwood, and oat spelt, q-nitrophenyl-glucopyranoside (PNPG), q-nitrophenyl-xylopyranoside (PNPX), q-nitrophenyl-ara- binofuranoside (PNPA) carboxymethylcellulose (CMC), locust bean gum, and chitin were purchased from Sigma- Aldrich (St. Louis, MO, USA), and xylose (X1), xylobiose (X2), xylotriose (X3), xylotetraose (X4), xylopentaose (X5), xylohexaose (X6) were purchased from Megazyme (Bray, Ireland). Soluble and insoluble xylan from oat spelt xylan were prepared as described by Mora¨ıs et al. [25]. De-starched wheat bran was prepared according to the method as described by Lamsal et al. [22].
Volvariella volvacea V14 ได้รับจากการรวบรวมวัฒนธรรมศูนย์กลางสำหรับบริการเทคโนโลยีชีวภาพเห็ดนานาชาติตั้งอยู่ที่จีน Univer - sity ของ Hong Kong (ทะเบียนไม่ CMB002) Escherichia coli DH5a ถูกใช้สำหรับโคลน และ Pichia pastoris KM71H ถูกใช้ในนิพจน์โปรตีน เวกเตอร์ pGEM T (Promega เมดิสัน WI สหรัฐอเมริกา) ถูกใช้เพื่อ subclone ชิ้นส่วนดีเอ็นเอในลำดับ เวกเตอร์ pPICZaB (Invitrogen คาร์ลส CA, USA) ใช้สำหรับการก่อสร้างของเวกเตอร์นิพจน์ยีสต์ สำหรับสกัดอาร์เอ็นเอ เชื้อรามีอ่างในปุ๋ยข้าวฟางอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [10] Xylans บีชวู้ด เบิร์ชวู้ด และข้าวโอ๊ต spelt คิว-nitrophenyl-glucopyranoside (PNPG), คิว-nitrophenyl-xylopyranoside (PNPX), คิว-nitrophenyl-ara-binofuranoside (PNPA) carboxymethylcellulose (CMC), โลคัสท์ถั่วหมากฝรั่ง และ chitin ซื้อจากซิก - Aldrich (St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา), และ xylose (X 1) xylobiose (X 2) xylotriose (X 3) xylotetraose (X 4) xylopentaose (X 5) xylohexaose (X 6) ซื้อจาก Megazyme (Bray ไอร์แลนด์) Xylan ละลายน้ำ และไม่ละลายน้ำจากข้าวโอ๊ต spelt xylan ถูกจัดเตรียมตามที่อธิบายไว้โดย Mora¨ıs et al. [25] รำข้าวสาลี de-starched ถูกจัดเตรียมตามวิธีตามที่อธิบายไว้โดย Lamsal et al. [22]
การแปล กรุณารอสักครู่..
Volvariella volvacea V14 ที่ได้รับจากคอลเลกชันวัฒนธรรมของศูนย์บริการระหว่างประเทศเพื่อเห็ดเทคโนโลยีชีวภาพอยู่ที่ Sity สากลจีนแห่งฮ่องกง (ภาคยานุวัติไม่มี. CMB002) อีโค DH5a ที่ใช้สำหรับการโคลนและ Pichia pastoris KM71H ที่ใช้สำหรับการแสดงออกของโปรตีน เวกเตอร์ pGEM-T (Promega เมดิสันวิสคอนซินสหรัฐอเมริกา) ถูกใช้ในการ subclone ดีเอ็นเอสำหรับลำดับ เวกเตอร์ pPICZaB (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) ถูกนำมาใช้ในการก่อสร้างของยีสต์เวกเตอร์แสดงออก ในการสกัดอาร์เอ็นเอเชื้อราที่ถูกเลี้ยงในปุ๋ยหมักฟางข้าวตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [10] xylans จากสายใจ, Birchwood และข้าวโอ๊ตสะกด Q-Nitrophenyl-glucopyranoside (PNPG) Q-Nitrophenyl-xylopyranoside (PNPX) Q-Nitrophenyl-ara- binofuranoside (PNPA) carboxymethylcellulose (CMC) เหงือกถั่วตั๊กแตนและไคติน ที่ซื้อมาจาก Sigma- ดิช (เซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) และไซโลส (X1) xylobiose (X2) xylotriose (X3) xylotetraose (X4) xylopentaose (X5) xylohexaose (X6) ที่ซื้อมาจาก Megazyme (เบรย์, ไอร์แลนด์) ไซแลนที่ละลายน้ำและไม่ละลายน้ำจากข้าวโอ๊ตสะกดไซแลนได้จัดทำตามที่อธิบาย Morais et al, [25] De-แป้งรำข้าวสาลีถูกจัดทำขึ้นตามวิธีการตามที่อธิบายไว้โดย Lamsal et al, [22]
การแปล กรุณารอสักครู่..
เห็ดฟาง v14 ได้จากวัฒนธรรมคอลเลกชันของศูนย์บริการระหว่างประเทศเพื่อเห็ดชีวภาพตั้งอยู่ที่จีน ม - sity ของฮ่องกง ( เข้าไม่ cmb002 ) Escherichia coli dh5a ถูกนำมาใช้สำหรับการโคลนและ pichia pastoris km71h ถูกใช้สำหรับการแสดงออกของโปรตีน เวกเตอร์ที่ pgem-t ( promega Madison , WI , ,สหรัฐอเมริกา ) ใช้เศษต้องการโคลนย่อย DNA ของ เวกเตอร์ที่ ppiczab ( Invitrogen Carlsbad , CA , USA ) ใช้สำหรับสร้างเวกเตอร์การแสดงออกของยีสต์ สำหรับการสกัดอาร์เอ็นเอ , เชื้อราที่เลี้ยงในปุ๋ยหมักฟางข้าวตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 10 ] ส่วนไซแลนด์จาก Beechwood , birchwood และสะกดโอ๊ต q-nitrophenyl-glucopyranoside ( pnpg ) q-nitrophenyl-xylopyranoside ( pnpx )q-nitrophenyl-ara - binofuranoside ( pnpa ) ผู้ป่วยใน ( CMC ) ถั่วฝรั่ง ตั๊กแตน และไคติน ซื้อมาจากซิกมา - อัลดริช ( St . Louis , MO , USA ) และ B ( , 1 ) , xylobiose ( X2 ) xylotriose ( x3 ) xylotetraose ( X4 ) xylopentaose ( x5 ) xylohexaose ( X6 ) ซื้อจาก megazyme ( เบรย์ , ไอร์แลนด์ )ละลายละลายและไซแลนจากข้าวโอ๊ตไซเตรียมสะกดตามที่อธิบายไว้โดยโมรา¨ı s et al . [ 25 ] เดอ ต้นรําข้าวสาลีได้ตามวิธีการที่อธิบายไว้โดย lamsal et al .
[ 22 ]
การแปล กรุณารอสักครู่..