Many plus-strand RNA viruses encode

Many plus-strand RNA viruses encode a viral RNA polymerase and capping enzymes to synthesize a 5’-capped RNA genome. However, how these two activities are coordinated during viral replication is not understood. In flaviviruses, polymerase and capping enzymes are encoded in a single multifunctional protein, where separate domains within the polypeptide are responsible for these activities; flavivirus NS5, composed of the polymerase and methyltransferase domains, carries out viral RNA synthesis, 5’-RNA capping, and RNA cap methylations. Previous NS5 monomer structures were unable to provide mechanistic insight into how the two domains communicate or the quaternary organization of the functional enzyme. We have determined the crystal structure of dengue virus NS5 and show that the NS5 dimer is likely the biological assembly of NS5, and RNA synthesis and RNA capping may be coordinated by the dimer. We found that essential interactions between the two NS5 domains can be maintained either within a monomer or via inter-molecular interactions within a dimer, and thus NS5 can adopt multiple conformations while preserving necessary interactions between the methyltransferase and polymerase domains. Using dengue virus, we additionally determined that such specific interaction between the two NS5 domains is the major determinant of viral replication.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บวก Strand ไวรัส RNA หลายเข้ารหัสโพลิเมอร์อาร์เอ็นเอไวรัสและ capping เอนไซม์สังเคราะห์ 5'ปกคลุมอาร์เอ็นเอจีโนม แต่วิธีการเหล่านี้สองกิจกรรมมีการประสานงานระหว่างการจำลองแบบของไวรัสจะไม่เข้าใจ ใน flaviviruses โพลิเมอร์และ capping เอนไซม์จะถูกเข้ารหัสในโปรตีนมัลติฟังก์ชั่เดียวที่โดเมนที่แยกต่างหากภายใน polypeptide มีความรับผิดชอบในกิจกรรมเหล่านี้; flavivirus NS5 ประกอบด้วยโพลิเมอร์และใบพัดโดเมนดำเนินการสังเคราะห์ไวรัส RNA, 5'-RNA สูงสุดที่กำหนดและ RNA methylations หมวก ก่อนหน้า NS5 โครงสร้างโมโนเมอร์ไม่สามารถที่จะให้ข้อมูลเชิงลึกกลไกในวิธีการที่สองโดเมนการสื่อสารหรือองค์กรที่สี่ของการทำงานของเอนไซม์ เราได้พิจารณาโครงสร้างผลึกของไวรัสไข้เลือดออก NS5 และแสดงให้เห็นว่า dimer NS5 มีแนวโน้มการชุมนุมทางชีวภาพของ NS5 และการสังเคราะห์ RNA และ RNA Capping อาจจะประสานงานโดย dimer เราพบว่าการมีปฏิสัมพันธ์ที่สำคัญระหว่างสองโดเมน NS5 สามารถรักษาได้ทั้งในโมโนเมอร์หรือผ่านการมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างโมเลกุลภายใน dimer และทำให้ NS5 สามารถนำมาใช้หลาย conformations ในขณะที่รักษาปฏิสัมพันธ์ที่จำเป็นระหว่างใบพัดและโพลิเมอร์โดเมน โดยใช้ไวรัสไข้เลือดออกเรายังระบุว่าการมีปฏิสัมพันธ์ที่เฉพาะเจาะจงเช่นระหว่างสองโดเมน NS5 เป็นปัจจัยสำคัญของการจำลองแบบของไวรัส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลายเส้นอาร์เอ็นเอไวรัสพลัสเข้ารหัสไวรัสอาร์เอ็นเอพอลิเมอเรสและ capping เอนไซม์สังเคราะห์ 5 " - ปกคลุมอาร์เอ็นเอยีโนมของ อย่างไรก็ตาม วิธีการเหล่านี้สองกิจกรรมจะประสานงานระหว่างเชื้อไวรัสไม่เข้าใจ ในผู้ใหญ่และ capping เอนไซม์จะถูกใช้ในครั้งเดียวโดยโดเมนโปรตีนที่แยกต่างหากภายในพอลิเปปไทด์เป็นผู้รับผิดชอบกิจกรรมต่างๆเหล่านี้ ไวรัส NS5 ประกอบด้วยการ methyltransferase โดเมนและการสังเคราะห์ RNA ไวรัส ประกอบออก , 5 " - RNA capping และ rna หมวก methylations . โครงสร้างมอนอ NS5 ก่อนหน้านี้ไม่สามารถที่จะให้กลไกลึกลงไปว่าสองโดเมนการสื่อสารหรือองค์กรวิชาการของเอนไซม์หน้าที่ เราได้กำหนดโครงสร้างผลึกของไวรัสไข้เลือดออก NS5 และแสดงที่ NS5 เมอร์อาจประกอบทางชีวภาพของ NS5 และการสังเคราะห์ RNA และ DNA สูงสุดอาจจะประสานงานโดยเมอร์ . เราพบว่าปฏิสัมพันธ์ที่สำคัญระหว่างสอง NS5 โดเมนสามารถรักษาได้ทั้งภายในหรือระหว่างมอนอเมอร์ ผ่านปฏิสัมพันธ์โมเลกุลภายในเมอร์และดังนั้นจึงสามารถนำบุตรหลาย NS5 ในขณะที่รักษาความ methyltransferase และการปฏิสัมพันธ์ระหว่างโดเมน การใช้ไวรัสไข้เลือดออกเรายังกำหนดว่าเฉพาะปฏิสัมพันธ์ระหว่างสองโดเมนคือตัวกำหนดหลัก NS5 ของเชื้อไวรัส .