Clostridium thermocellum 27405 (from David Levin, Univ. of
Manitoba) was maintained at 55 C by routinely transferring
10% (v/v) inocula into fresh ATCC 1191 medium [23], supplemented
with avicel cellulose (0.5%, w/v) as the sole carbon
substrate. Fermentation experiments were carried out in
a fermentor (Electrolab 2400, Gloucestershire, UK) containing
600 ml of 1191 medium continuously sparged with N2 gas
(10 ml/min) at 50 C (Electrolab 240 Temperature Control).
Approximately 0.25% (dry w/v) of either pre-treated corn
stover lignocellulose or cellobiose was added to the fermentor,
followed by inoculation with 100 mL of C. thermocellum. The
stirring rate was maintained at 120 rpm, and pH at 6.8 (Electrolab
260 pH Control Module) using an anaerobic NaOH
solution (1 N). Hydrogen, CO2, and N2 gas measurements were
recorded every hour in triplicate according to Datar et al. [6]
using an online GC (Varian, Palo Alto, CA) connected to the
fermenter. Concentrations of H2 and CO2 were calculated
based on the continuous flow rate of N2 gas (10 ml/min) and its
content in the sample gas, after correcting for the altitude (0.82
atmosphere at 5280 ft) and the laboratory and reactor
temperatures. At the end of fermentation, the supernatant
was collected by centrifugation at 3800 g for 10 min to
remove the cells along with any residual solid biomass.
Clostridium thermocellum 27405 (จากเดวิดเลวิน Univ. ของ
แมนิโทบา) ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 55 องศาเซลเซียสโดยการถ่ายโอนเป็นประจำ
10% (v / v) inocula เป็น ATCC สดขนาดกลาง 1191 [23], เสริม
ด้วยเซลลูโลส Avicel (0.5% w / v ) เป็นคาร์บอน
สารตั้งต้น การทดลองหมักได้ดำเนินการใน
ถังหมัก (Electrolab 2400, กลอสเตอร์, สหราชอาณาจักร) ที่มี
600 มลจาก 1191 กลางอย่างต่อเนื่อง sparged ด้วยก๊าซ N2
(10 มล. / นาที) ที่ 50 องศาเซลเซียส (240 Electrolab ควบคุมอุณหภูมิ).
ประมาณ 0.25% (แห้งก / v) ทั้งข้าวโพดก่อนรับการรักษา
ซังลิกโนเซลลูโลสหรือ cellobiose ถูกบันทึกอยู่ในถังหมัก,
ตามด้วยการฉีดวัคซีน 100 มิลลิลิตรซี thermocellum
อัตราการกวนถูกเก็บรักษาไว้ที่ 120 รอบต่อนาทีและมีค่า pH ที่ 6.8 (Electrolab
260 ค่า pH ควบคุม Module) โดยใช้ NaOH แบบไม่ใช้ออกซิเจน
การแก้ปัญหา (1 N) ไฮโดรเจน, CO2, N2 และการตรวจวัดก๊าซถูก
บันทึกทุกชั่วโมงในเพิ่มขึ้นสามเท่าตาม Datar และคณะ [6]
โดยใช้ออนไลน์ GC (Varian, พาโลอัลโต, แคลิฟอร์เนีย) เชื่อมต่อกับ
ถังหมัก การกระจุกตัวของ H2 และ CO2 จะถูกคำนวณ
ขึ้นอยู่กับอัตราการไหลอย่างต่อเนื่องของก๊าซ N2 (10 มล. / นาที) และของ
เนื้อหาในก๊าซตัวอย่างหลังจากการแก้ไขสำหรับระดับความสูง (0.82
บรรยากาศที่ 5280 ฟุต) และห้องปฏิบัติการและเครื่องปฏิกรณ์
อุณหภูมิ ในตอนท้ายของการหมักใส
ถูกเก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 3800? กรัมเป็นเวลา 10 นาทีเพื่อ
ขจัดเซลล์พร้อมกับชีวมวลของแข็งที่เหลือ
การแปล กรุณารอสักครู่..
