The quality and physiological state

The quality and physiological state of micropropagated shoots
are of great importance both in the subsequent adventitious
organ development (rooting, adventitious shoot regeneration) and
acclimatization when transferring the micropropagated plantlets
from artificial in vitro (mixotroph) to natural, ex vitro (autotroph)
conditions (Hazarika, 2006; Ziv and Chen, 2008; Dobránszki and
Teixeira da Silva, 2010; Magyar-Tábori et al., 2010; Magyar-Tábori
et al., 2011).Artificialfactors andmedia components applied during
in vitro propagation influence both the morphology and function of
the photosynthetic apparatus of the in vitro shoots and plantlets
∗ Corresponding author. Tel.: [phone]; fax: [phone].
E-mail addresses: [e-mail], [e-mail]
(J. Dobránszki).
(Yue et al., 1992; Desjardins, 1995; Triques et al., 1997; ValeroAracama
et al., 2006).
Cytokinins (CKs), N6-substituted derivates of adenine, are
widely applied during axillary and adventitious shoot cultures of
plants in themediumas themain regulators of growth and development
of shoots (George and Debergh, 2008; Van Staden et al., 2008;
Magyar-Tábori et al., 2010; Dobránszki and Teixeira da Silva, 2010).
They play an important role in the development and structural differentiation
of the chloroplasts and they were shown to induce
genes involved in chloroplast development also in tissue culture
(Synková et al., 1999; Kubo and Kakimoto, 2000; Kulaeva et al.,
2002; Cortleven et al., 2011). Moreover, developed chloroplasts and
their gene expression are necessary for the normal response to CK
as shown by Kulaeva et al. (2002) using the mutant line albostrians
of Hordeum vulgare L. ‘Haisa’, which is impaired in its chloroplast
development.
Maintenance of chloroplast activity, decrease in chlorophyll
degradation and alleviation in leaf senescence under stress
http://dx.doi.org/10.1016/j.jplph.2014.06.015
0176-1617/© 2014 Elsevier GmbH. All rights reserved.
J. Dobránszki, N. Mendler-Drienyovszki / Journal of Plant Physiology 171 (2014) 1472–1478 1473
conditions were observed after exogenous application of CKs to
different plants in vivo (Wingler et al., 1998; Liu et al., 2002; Zhang
and Erwin, 2004; Stirk and Van Staden, 2010). CKs were proven to
regulate also the stomatal behaviour in vivo including the opening
and conductance of stomata, transpiration, photorespiration and
thereby also the photosynthesis (Reeves and Emery, 2007; Haisel
et al., 2008; Rivero et al., 2009). Our knowledge about photosynthetic
efficiency and capacity of in vitro leafy shoots or plantlets
grown photomixotrophically (the main source of energy for growth
and development is the sugar added in the culture media) is still
limited and inconsistent (Hazarika, 2006). There are recently some
indirect evidences, such as differences in photosynthetic pigment
profiles, chlorophyllase activity, structural and ultra-structural
characteristics of leaves, in stomatal conductance and intercellular
CO2 concentration in in vitro apple leaves, which indicate that the
developmental state of the photosynthetic apparatus in in vitro
plants is affected by CKs applied in the medium (Genkov et al.,
1997; Dobránszki et al., 2005; Magyar-Tábori et al., 2010; Aremu
et al., 2012; Dobránszki and Mendler-Drienyovszki, 2014). However,
up to now the effects of exogenously applied CKs has not been
studied on photosynthetic capacity of in vitro plantlets stringently
yet.
Structural differences in aromatic CKs modify their effects on
growth and development in tissue culture. Their effects are not
limited for the subculture of propagation or shoot induction when
they were applied but they have post-effects in the next propagation
cycle (axillary or adventitious) or rooting and acclimatization
processes, as well. Although mostly benzyl-adenine (BA) has been
used in apple micropropagation because of their high stability and
efficiency, there are a number of recent reports on applying its
structural analogues, such as 6-benzyal-adenine riboside (BAR) and
meta-topolin (TOP). These structural analogues have been reported
to be a successful alternative in apple shoot multiplication for
avoiding harmful side-effects of BA (reviewed in Dobránszki and
Teixeira da Silva, 2010; Magyar-Tábori et al., 2010; Magyar-Tábori
et al., 2011).
Chlorophyll fluorescence measurementis a useful, non-invasive
and rapid tool for examining the photosynthetic efficiency of plants
and the fluorescence of PSII (photosystem II) have been reported to
correlate tightly with the changes in CO2 assimilation (Baker, 2008).
The maximum, potential and actual, achieved quantum efficiency
of PSII measured at open and closed reaction centres of PSII can
rapidly characterize the function of the photosynthetic apparatus
(Rohácek, ˇ 2002; Baker, 2008).
CKs applied in the medium play important role in the regulation
of in vitro growth and development. They affect the quality
of in vitro shoots and plantlets and recent indirect experimental
evidences suggested their importance in the function of photosynthetic
apparatus. Therefore the aim of this study included
examining how different structural types of aromatic CKs applied
at different concentrations in the culture medium of in vitro apple
shoots affect the chlorophyll a and b content of the leaves and the
capacity of their photosynthetic apparatus by using chlorophyll
fluorescence measurements after 3 weeks of cultivation.
Materials and methods
Plant materials and treatments
Apple (Malus × domestica Borkh.) scion cv. Royal Gala was used
in the experiments, as an apple cultivar often applied as model
cultivar in in vitro experiments (Dobránszki and Teixeira da Silva,
2010; Magyar-Tábori et al., 2010). 4-week-old in vitro shoots
grown previously on MS (Murashige and Skoog, 1962) proliferation
medium supplemented with 3% (w/v) sucrose, 0.7% (w/w)
agar-agar, 1.0 mg l
−1 6-benzyl-adenine riboside (BAR), 0.3 mg l
−1
indole-3-butyric acid (IBA) and 0.2 mg l
−1 gibberellic acid (GA3)
were used for the experiments. Five in vitro shoots were placed vertically
in Killner jars (400 ml in volume) on 40 ml of different media
contained the same components as the proliferation medium,
except CK supply.
Different types of CKs were applied, as single or dual CK
source of the media. BA, its N9-riboside, benzyl-adenine riboside
(BAR), and its hydroxylated derivate, meta-topolin (3-hydroxybenzyladenine,
TOP) was applied as single CK source in the
medium; moreover dual CK effect was studied using TOP and
BA, where the level of BA was constant of 2.2 M and the
concentrations of TOP were different. Extremely low concentration
of 0.5 M (LC-treatment), concentrations of 2.0 M and
6.0 M commonly used in axillary shoot cultures of apple (CU2-
and CU6-treatments, respectively), and high concentration of
25.0 M (HC-treatment) were applied for single CK supply and
for TOP in treatments of dual CK source in the medium (Fig. 1).
Cultures were grown at 22 ◦C, 16 h photoperiod provided by
cool-white fluorescent lamps (400–700 nm) at photosynthetic
photon flux (PPF) of 57 mol m−2 s−1 for 3 weeks before measurements.
Measurement and evaluation of chlorophyll fluorescence
Chlorophyll fluorescence of the second apical, fully developed
leaves of 3-week-old in vitro shoots wasmeasured using OS5pModulated
Fluorometer (Opti-Sciences, USA). Chlorophyll fluorescence
was measured both in dark-adapted and in light-adapted samples
using dark-adapted Fv/Fm test for the determination of maximum
quantum yield and light adapted yield of photosynthetic efficiency
of PSII for the determination of effective quantum photochemical
yield, respectively.
The maximum quantum yield of PSII in the samples was measured
after 30-min-long dark adaptation of the leaves using Fv/Fm
protocol. Fv/Fm ratio is used for estimation ofthe maximum portion
of absorbed quanta used in PSII reaction centres. Dark adaptation
allows the re-oxidation of PSII and to relax non-photochemical
quenching. Minimum and maximum fluorescence (F0, and Fm,
respectively) of dark-adapted leaves were measured in the same
leaves after 0.8 second for saturation pulse (35W halogen lamp
with 690 nm short pass filter) in previously dark-adapted samples.
Variable fluorescence (Fv = Fm − F0) and maximum quantum yield
of PSII (Fv/Fm) were calculated by the software of the Fluorometer,
moreover maximal efficiency of the photochemical process in PSII
(Fv/F0) was counted.
Actual quantum yield of PSII(Y(II))in the samples was measured
using Yield protocol which is a light adapted (no dark-adaptation
is required) steady-state test of photosynthesis measuring the
ratio of light amount used in photochemistry in PSII to the light
amount adsorbed by chlorophylls of PSII. Leaf samples were tested
under steady-state photosynthetic conditions therefore this protocol
shows the achieved efficiency of PSII under this lighting
condition. Steady-state fluorescence (Fs), and maximum fluorescence
(Fms) of light-adapted leaves were measured and actual
quantum yield of PSII (Y(II) = (Fms − Fs)/Fms)) and estimated relative
electron transport rate (ETR) were calculated by the software
of the Fluorometer.
Measurement and evaluation of the chlorophyll content in leaves
Samples were collected from the apical two, fully developed
leaves and their chlorophyll a and b (chl a and chl b) contents were
measured using spectrophotometric method described by Felföldy
(1987). According to this method absorbances of the prepared
samples were measured at 653, 666, and 750 nm and chlorophyll

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

คุณภาพและสภาวะสรีรวิทยาของถ่ายภาพ micropropagatedมีความสำคัญอย่างยิ่งทั้งในซึ่งต่อมา adventitiousพัฒนาอวัยวะ (rooting ยิง adventitious ฟื้นฟู) และacclimatization เมื่อโอนย้าย micropropagated plantletsจากประดิษฐ์การเพาะเลี้ยง (mixotroph) กับธรรมชาติ อดีตหลอด (ออโตทรอพ)เงื่อนไข (Hazarika, 2006 Ziv และเฉิน 2008 Dobránszki และTeixeira da Silva, 2010 Magyar Tábori et al., 2010 Magyar Táboriร้อยเอ็ด al., 2011) คอมโพเนนต์ andmedia Artificialfactors ที่ใช้ในระหว่างเผยแพร่การเพาะเลี้ยงมีผลต่อสัณฐานวิทยาและหน้าที่ของเครื่องถ่ายภาพในและ plantlets photosyntheticผู้ Corresponding ∗ โทร.: [phone] โทรสาร: [phone]ที่อยู่อีเมล: [e-mail], [e-mail](J. Dobránszki)(หยู et al., 1992 Desjardins, 1995 Triques และ al., 1997 ValeroAracamaและ al., 2006)มี cytokinins (CKs), แทน N6 derivates ของ adenineใช้กันอย่างแพร่หลายในระหว่างยิงรักแร้ และ adventitious วัฒนธรรมของเร็คกูเลเตอร์ themain themediumas การเจริญเติบโตของพืชของการถ่ายภาพ (จอร์จและ Debergh, 2008 รถตู้ Staden et al., 2008Magyar Tábori et al., 2010 Dobránszki ก Teixeira da Silva, 2010)พวกเขามีบทบาทสำคัญในการพัฒนาและสร้างความแตกต่างทางโครงสร้างของ chloroplasts พวกเขาได้แสดงเพื่อก่อให้เกิดยีนในคลอโรพลาสต์พัฒนานอกจากนี้ในเนื้อเยื่อ(Synková et al., 1999 คุโบะและ Kakimoto, 2000 Kulaeva et al.,2002 Cortleven et al., 2011) นอกจากนี้ พัฒนา chloroplasts และยีนของพวกเขาจำเป็นสำหรับการตอบสนองต่อปกติ CKแสดงโดย Kulaeva et al. (2002) ใช้ albostrians บรรทัดกลายพันธุ์ของ Hordeum vulgare L. 'Haisa" ซึ่งมีความบกพร่องทางด้านในของคลอโรพลาสต์การพัฒนาลดการบำรุงรักษาของคลอโรพลาสต์กิจกรรม คลอโรฟิลล์ลดและบรรเทาในใบไม้ senescence ภายใต้ความเครียดhttp://dx.doi.org/10.1016/j.jplph.2014.06.0150176-1617 / © 2014 Elsevier GmbH สงวนลิขสิทธิ์ทั้งหมดเจ Dobránszki, N. Mendler-Drienyovszki / สมุดรายวันของสรีรวิทยาของพืช 171 (2014) 1472 – 1478 1473เงื่อนไขได้สังเกตหลังจากใช้บ่อย CKs เพื่อต้นไม้ในสัตว์ทดลอง (Wingler et al., 1998 หลิวและ al., 2002 จางแอร์ 2004 และ Stirk กแวน Staden, 2010) มีพิสูจน์ CKsนอกจากนี้ยังควบคุมพฤติกรรม stomatal ในสัตว์ทดลองรวมถึงการเปิดความต้านทานของ stomata, transpiration, photorespiration และนอกจากนี้ยังทำการสังเคราะห์ด้วยแสง (บ้าเป็นหลังและกากกะรุน 2007 Haiselร้อยเอ็ด al., 2008 Rivero et al., 2009) ความรู้ของเราเกี่ยวกับ photosyntheticประสิทธิภาพและความจุของการเพาะเลี้ยงใบอ่อนหรือ plantletsปลูก photomixotrophically (หลักแหล่งพลังงานสำหรับการเติบโตและพัฒนาเป็นน้ำตาลในสื่อวัฒนธรรม) ยังคงจำกัด และไม่สอดคล้องกัน (Hazarika, 2006) ล่าสุดมีบางหลักฐานทางอ้อม เช่นความแตกต่างใน photosynthetic pigmentโพรไฟล์ chlorophyllase กิจกรรม โครงสร้าง และโครงสร้างพิเศษลักษณะของใบ ต้านทาน stomatal และ intercellularความเข้มข้นของ CO2 ในใบในแอปเปิ้ล ซึ่งบ่งชี้ว่า การรัฐพัฒนาเครื่อง photosynthetic ในการเพาะเลี้ยงพืชที่ได้รับผลกระทบ โดย CKs ใช้ในสื่อ (Genkov et al.,1997 Dobránszki et al., 2005 Magyar Tábori et al., 2010 Aremuร้อยเอ็ด al., 2012 Dobránszki และ Mendler-Drienyovszki, 2014) อย่างไรก็ตามถึงตอนนี้ ผลของ CKs exogenously ใช้ไม่ได้ศึกษาบน photosynthetic จุ plantlets ในเข้มงวดยังความแตกต่างของโครงสร้างใน CKs หอมปรับเปลี่ยนลักษณะพิเศษของพวกเขาในเจริญเติบโตและพัฒนาในเนื้อเยื่อ ไม่มีผลของพวกเขาจำกัดสำหรับวัฒนธรรมของการเผยแพร่หรือยิงเมื่อถูกนำไปใช้ แต่จะมีผลหลังในการเผยแพร่ต่อไปวงจร (รักแร้ หรือ adventitious) หรือ rooting และ acclimatizationกระบวน เช่นกัน แม้ว่า (BA) การ benzyl สินค้าการ adenine สินค้าส่วนใหญ่ได้รับใช้ในแอปเปิ้ล micropropagation เนื่องจากความมีเสถียรภาพสูง และประสิทธิภาพ มีจำนวนรายงานล่าสุดเกี่ยวกับการใช้ของโครงสร้าง analogues เช่น riboside 6-benzyal-adenine (บาร์) และmeta-topolin (บน) รายงาน analogues โครงสร้างเหล่านี้จะ เป็นทางเลือกที่ประสบความสำเร็จในแอปเปิ้ลยิงคูณหลีกเลี่ยงอันตรายด้านของ BA (ทานใน Dobránszki และTeixeira da Silva, 2010 Magyar Tábori et al., 2010 Magyar Táboriร้อยเอ็ด al., 2011)ประโยชน์ measurementis fluorescence คลอโรฟิลล์ไม่รุกรานและเครื่องมืออย่างรวดเร็วในการตรวจสอบประสิทธิภาพของพืช photosyntheticและ fluorescence ของ PSII (photosystem II) ได้รับรายงานสร้างความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับการเปลี่ยนแปลงในการผสานกลืน CO2 (เบเกอร์ 2008)ประสิทธิภาพสูงสุด เป็นไปได้ และเกิดขึ้นจริง ทำได้ควอนตัมของวัดที่ศูนย์กลางปฏิกิริยาที่เปิด และปิดของ PSII PSII สามารถลักษณะการทำงานของเครื่อง photosynthetic อย่างรวดเร็ว(Rohácek, 2002 ˇ เบเกอร์ 2008)CKs ใช้ในกลางเล่นบทบาทสำคัญในข้อบังคับการเพาะเลี้ยงการเจริญเติบโตและพัฒนา พวกเขามีผลต่อคุณภาพถ่ายภาพในและ plantlets และล่าสุดทางอ้อมทดลองความสำคัญในการทำงานของ photosynthetic แนะนำหลักฐานเครื่องมือการ ดังนั้นจุดมุ่งหมายของการศึกษานี้รวมตรวจสอบว่าโครงสร้างแบบหอม CKs ใช้ที่ความเข้มข้นแตกต่างกันในสื่อวัฒนธรรมของแอปเปิ้ลในถ่ายภาพต่อคลอโรฟิลล์ a และ b เนื้อหาของใบไม้และกำลังการผลิตของเครื่องของ photosynthetic โดยคลอโรฟิลล์วัด fluorescence หลังสัปดาห์ที่ 3 ของการเพาะปลูกวัสดุและวิธีการโรงงานผลิตและบริการใช้พันธุ์ไซออนแอปเปิ้ล (Malus domestica × Borkh.) งานรอยัลในการทดลอง เป็น cultivar แอปเปิ้ลที่ใช้มักจะเป็นรูปแบบcultivar ในการทดลองเพาะเลี้ยง (Dobránszki และ Teixeira da Silva2010 Magyar-Tábori et al., 2010) อายุ 4 สัปดาห์การถ่ายภาพในปลูกก่อนหน้านี้ใน MS (Murashige และ Skoog, 1962) การแพร่หลายสื่อเสริม ด้วย 3% (w/v) ซูโครส 0.7% (w/w)agar-agar, l 1.0 มิลลิกรัม−1 6 benzyl adenine riboside (บาร์), 0.3 mg l−1กรดอินโดล-3-butyric (อิบา) และ l 0.2 มิลลิกรัม−1 กแอ (GA3)ใช้สำหรับการทดลอง ถ่ายภาพในที่ห้าถูกวางในแนวตั้งใน Killner ขวด (ปริมาณ 400 ml) บน 40 ml ของสื่อต่าง ๆประกอบด้วยส่วนประกอบเดียวกันเป็นแพร่หลายสื่อยกเว้น CK ซัพพลายชนิดต่าง ๆ ของ CKs ใช้ เป็น CK เดี่ยว หรือคู่แหล่งของสื่อ BA ของ N9-riboside, benzyl adenine riboside(บาร์), และเป็น hydroxylated derivate, meta-topolin (3-hydroxybenzyladenineด้านบน) ถูกใช้เป็นแหล่งเดียวของ CK ในการสื่อ นอกจากนี้ ผล CK คู่ได้ศึกษาการใช้ด้านบน และBA ที่ระดับของ BA คง 2.2 เมตรและความเข้มข้นด้านบนแตกต่างกันได้ ความเข้มข้นต่ำมาก0.5 เมตร (LC-บำบัด), ความเข้มข้น 2.0 เมตร และใช้ในวัฒนธรรมยิงรักแร้ของแอปเปิ้ล (CU2-M 6.0และ รักษา CU6 ตามลำดับ), และความเข้มข้นสูงของ25.0 M (HC-บำบัด) ถูกนำไปใช้สำหรับการจัดหาเดียว CK และสำหรับสุดยอดในการรักษาแหล่ง CK คู่ในระดับปานกลาง (Fig. 1)วัฒนธรรมถูกปลูกที่ 22 ◦C, 16 ชั่วโมง h โดยเย็นขาวหลอดฟลูออเรสเซนต์ (400-700 nm) ที่ photosyntheticโฟตอน (PPF) ฟลักซ์ของ s−1 m−2 โมล 57 3 สัปดาห์ก่อนการประเมินวัดและประเมินผลของคลอโรฟิลล์ fluorescenceFluorescence คลอโรฟิลล์ของสองปลายยอด พัฒนาเต็มใบไม้ใช้ OS5pModulated wasmeasured ถ่ายภาพการเพาะเลี้ยงอายุ 3 สัปดาห์Fluorometer (Opti-วิทยาศาสตร์ สหรัฐอเมริกา) Fluorescence คลอโรฟิลล์มีวัดทั้งใน dark-adapted และตัวอย่างปรับแสงใช้ทดสอบ Fv/Fm dark-adapted กำหนดสูงสุดควอนตัมผลผลิตและผลตอบแทนปรับแสง photosynthetic ประสิทธิภาพของ PSII สำหรับกำหนดประสิทธิภาพควอนตัม photochemicalผลผลิต ตามลำดับมีวัดผลผลิตสูงสุดควอนตัมของ PSII ในตัวอย่างหลังจากปรับมืดยาว 30 นาทีของใบไม้ใช้ Fv/Fmโพรโทคอลการ ใช้อัตราส่วน Fv/Fm สำหรับการประเมินส่วนสูงสุดของ quanta ดูดซึมที่ใช้ในศูนย์ปฏิกิริยา PSII ปรับความมืดช่วยให้ re-ออกซิเดชัน PSII และผ่อนคลายไม่ใช่ photochemicalชุบ ต่ำสุดและสูงสุด fluorescence (F0 และ Fmตามลำดับ) ของใบ dark-adapted มีวัดเดียวใบหลังสอง 0.8 สำหรับชีพจรความเข้ม (35W เจนมีตัวกรอง 690 nm ผ่านสั้น) ในตัวอย่างก่อนหน้านี้ dark-adaptedFluorescence ผันแปร (Fv = Fm − F0) และผลตอบแทนสูงสุดควอนตัมของ PSII (Fv/Fm) คำนวณได้ โดยซอฟต์แวร์ของ Fluorometerนอกจากนี้สูงสุดประสิทธิภาพของกระบวนการ photochemical ใน PSII(Fv/F0) ถูกนับผลตอบแทนจริงของควอนตัมของ PSII(Y(II)) ในตัวอย่างถูกวัดโดยใช้โพรโทคอลผลผลิตซึ่งเป็นไฟดัดแปลง (ไม่ dark-adaptationจำเป็น) -ท่อนทดสอบวัดการสังเคราะห์ด้วยแสงการอัตราส่วนของยอดอ่อนที่ใช้ในเคมีแสงใน PSII จะแสงจำนวน adsorbed โดย chlorophylls PSII ทดสอบตัวอย่างใบไม้ภายใต้ท่อน photosynthetic เงื่อนไขดังนี้โพรโทคอลแสดง PSII ประสิทธิภาพทำได้ภายใต้แสงสว่างนี้เงื่อนไขการ -ท่อน fluorescence (Fs), และ fluorescence สูงสุด(Fms) ของใบปรับแสงได้ตามจริง และวัดผลตอบแทนควอนตัมของ PSII (Y(II) = (Fms − Fs) / Fms)) และญาติประมาณมีคำนวณอัตราการขนส่งอิเล็กตรอน (ETR) ซอฟต์แวร์ของ Fluorometerวัดและประเมินผลของเนื้อหาคลอโรฟิลล์ในใบตัวอย่างที่ถูกเก็บรวบรวมจากทั้งสองปลายยอด พัฒนาเต็มใบ และคลอโรฟิลล์ a และ b (chl และ chl b) เนื้อหาได้วัดโดยใช้วิธี spectrophotometric โดย Felföldy(1987) ตามนี้ absorbances วิธีของเตรียมไว้ตัวอย่างที่วัดที่ 653, 666 และ 750 nm และคลอโรฟิลล์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ที่มีคุณภาพและรัฐทางสรีรวิทยาของหน่อเนื้อเยื่อของมีความสำคัญมากทั้งในบังเอิญต่อมาการพัฒนาอวัยวะ(ขจัดฟื้นฟูยิงบังเอิญ) และเคยชินกับสภาพเมื่อโอนต้นเนื้อเยื่อของจากเทียมในหลอดทดลอง(mixotroph) ที่จะเป็นธรรมชาติอดีตหลอดทดลอง (autotroph) เงื่อนไข ( Hazarika 2006; Ziv และ Chen, 2008; DobránszkiและTeixeira ดาซิลวา, 2010; Magyar-Tábori et al, 2010;. Magyar-Tábori. et al, 2011) .Artificialfactors ส่วนประกอบ andmedia นำไปใช้ในช่วงในหลอดทดลองที่มีอิทธิพลต่อการขยายพันธุ์ทั้งลักษณะทางสัณฐานวิทยาและการทำงานของอุปกรณ์การสังเคราะห์แสงของหน่อในหลอดทดลองและต้น* ผู้รับผิดชอบ Tel .: [phone]; แฟ็กซ์: 36 430 42 009. ที่อยู่ E-mail: [e-mail], [e-mail] (เจDobránszki). (ยู et al, 1992; จาร์แดงส์, 1995; Triques et al, 1997; ValeroAracama.. .. et al, 2006) cytokinins (CKs) N6-แทนสารอนุพันธ์ของ adenine มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในช่วงออกที่ซอกใบและวัฒนธรรมถ่ายบังเอิญของพืชในthemediumas หน่วยงานกำกับดูแล themain ของการเจริญเติบโตและการพัฒนาของหน่อ(จอร์จและ Debergh 2008; Van Staden et อัล, 2008. Magyar-Tábori et al, 2010;.. Dobránszkiและ Teixeira ดาซิลวา, 2010) พวกเขามีบทบาทสำคัญในการพัฒนาและความแตกต่างของโครงสร้างของคลอโรพลาและพวกเขามีการแสดงที่จะทำให้เกิดยีนที่เกี่ยวข้องในการพัฒนาchloroplast ยังอยู่ใน การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ(Synková et al, 1999;. คูโบะและ Kakimoto 2000; Kulaeva, et al. 2002;. Cortleven et al, 2011) นอกจากนี้ยังมีการพัฒนาและคลอโรพลาการแสดงออกของยีนของพวกเขาเป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการตอบสนองปกติ CK ที่แสดงโดย Kulaeva et al, (2002) โดยใช้เส้น albostrians กลายพันธุ์ของHordeum vulgare L. 'Haisa' ซึ่งเป็นความบกพร่องในคลอโรพลาของการพัฒนา. การบำรุงรักษาของกิจกรรม chloroplast ลดลงในคลอโรฟิลการย่อยสลายและบรรเทาใบชราภาพภายใต้ความเครียดhttp://dx.doi.org /10.1016/j.jplph.2014.06.015 0176-1617 / 2014 ©เอลส์ GmbH สงวนลิขสิทธิ์. เจ Dobránszkiเอ็น Mendler-Drienyovszki / วารสารสรีรวิทยาพืช 171 (2014) 1472-1478 1473 สภาพถูกตั้งข้อสังเกตหลังจากการประยุกต์ใช้ภายนอกของ CKs เพื่อพืชที่แตกต่างกันในร่างกาย(Wingler et al, 1998;. หลิว, et al., 2002; Zhang และ เออร์วิน, 2004; Stirk และ Van Staden 2010) CKs ถูกพิสูจน์แล้วว่าสามารถควบคุมพฤติกรรมยังปากใบในร่างกายรวมทั้งการเปิดและสื่อกระแสไฟฟ้าของปากใบ, คาย, photorespiration และจึงยังสังเคราะห์(รีฟส์และ Emery, 2007; Haisel et al, 2008;.. ริเว et al, 2009) ความรู้ของเราเกี่ยวกับการสังเคราะห์แสงที่มีประสิทธิภาพและความจุของในหลอดทดลองหน่อหรือต้นอ่อนใบเติบโตphotomixotrophically (แหล่งที่มาของพลังงานสำหรับการเจริญเติบโตและการพัฒนาเป็นน้ำตาลเพิ่มในสื่อวัฒนธรรม) ยังคงจำกัด และไม่สอดคล้องกัน (Hazarika 2006) นอกจากนี้เมื่อเร็ว ๆ นี้บางหลักฐานทางอ้อมเช่นความแตกต่างในสีสังเคราะห์รูปแบบกิจกรรมchlorophyllase โครงสร้างและอัลตร้าโครงสร้างลักษณะของใบในสื่อกระแสไฟฟ้าปากใบและอยู่ระหว่างความเข้มข้นของCO2 ในในหลอดทดลองใบแอปเปิ้ลซึ่งแสดงให้เห็นว่ารัฐพัฒนาการของเครื่องสังเคราะห์แสงในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชได้รับผลกระทบโดย CKs นำไปใช้ในสื่อ (Genkov, et al. 1997; Dobránszki et al, 2005;. Magyar-Tábori et al, 2010;. Aremu et al, 2012;. Dobránszkiและ Mendler-Drienyovszki 2014 ) แต่ถึงตอนนี้ผลกระทบของการประยุกต์ CKs จากภายนอกไม่ได้รับการศึกษาความสามารถในการสังเคราะห์แสงของต้นอ่อนในหลอดทดลองอย่างเข้มงวดยัง. ความแตกต่างในโครงสร้าง CKs หอมแก้ไขผลกระทบต่อการเจริญเติบโตและการพัฒนาในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ผลกระทบของพวกเขาจะไม่ได้จำกัด สำหรับวัฒนธรรมของการขยายพันธุ์การเหนี่ยวนำหรือยิงเมื่อพวกเขาถูกนำไปใช้แต่พวกเขามีผลกระทบที่โพสต์ในการขยายพันธุ์ต่อไปวงจร (ออกที่ซอกใบหรือบังเอิญ) หรือการขจัดและเคยชินกับสภาพกระบวนการเช่นเดียวกับ แม้ว่าส่วนใหญ่ benzyl-adenine (BA) ได้รับการใช้ในการขยายแอปเปิ้ลเพราะมีความมั่นคงสูงและมีประสิทธิภาพมีจำนวนรายงานล่าสุดเกี่ยวกับการประยุกต์ใช้ของanalogues โครงสร้างเช่น 6 benzyal-adenine riboside (BAR) และเมตาtopolin (TOP) เหล่านี้ analogues โครงสร้างที่ได้รับรายงานจะเป็นทางเลือกที่ประสบความสำเร็จในการคูณแอปเปิ้ลยิงสำหรับการหลีกเลี่ยงผลข้างเคียงที่เป็นอันตรายของบริติชแอร์เวย์(สอบทานในDobránszkiและTeixeira ดาซิลวา, 2010; Magyar-Tábori et al, 2010;. Magyar-Tábori., et al, 2011). การเรืองแสงคลอโรฟิล measurementis ที่มีประโยชน์ไม่รุกรานเครื่องมือและอย่างรวดเร็วสำหรับการตรวจสอบประสิทธิภาพการสังเคราะห์แสงของพืชและการเรืองแสงของPSII นี้ (photosystem II) ได้รับรายงานว่าจะมีความสัมพันธ์อย่างแน่นหนากับการเปลี่ยนแปลงในการดูดซึมCO2 (เบเกอร์ 2008). สูงสุดที่เกิดขึ้นจริงที่มีศักยภาพและประสบความสำเร็จอย่างมีประสิทธิภาพควอนตัมของ PSII วัดปฏิกิริยาที่ศูนย์เปิดและปิดของ PSII สามารถอย่างรวดเร็วลักษณะการทำงานของเครื่องสังเคราะห์แสง(Rohácek 2002; เบเคอร์, 2008). CKs นำไปใช้ในการเล่นกลางบทบาทสำคัญในการ กฎระเบียบของในหลอดทดลองเติบโตและการพัฒนา พวกเขาส่งผลกระทบต่อคุณภาพของหน่อในหลอดทดลองและต้นกล้าและการทดลองที่ผ่านมาทางอ้อมหลักฐานชี้ให้เห็นความสำคัญของพวกเขาในการทำงานของสังเคราะห์แสงอุปกรณ์ ดังนั้นจุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้รวมถึงการตรวจสอบว่าชนิดที่มีโครงสร้างที่แตกต่างกันของ CKs หอมนำไปใช้ที่ความเข้มข้นที่แตกต่างกันในสื่อวัฒนธรรมของในหลอดทดลองแอปเปิ้ลยอดส่งผลกระทบต่อคลอโรฟิลและเนื้อหาขของใบและความจุของเครื่องสังเคราะห์แสงของพวกเขาโดยการใช้คลอโรฟิลวัดเรืองแสงหลังจาก 3 สัปดาห์ที่ผ่านมาของการเพาะปลูก. วัสดุและวิธีการวัสดุอาคารและการรักษาแอปเปิ้ล(Malus domestica × Borkh.) พันธุ์การปลูกถ่ายอวัยวะ รอยัลกาล่าถูกนำมาใช้ในการทดลองเป็นพันธุ์แอปเปิ้ลมักใช้เป็นแบบจำลองพันธุ์ในหลอดทดลองการทดลองใน(Dobránszkiและ Teixeira ดาซิลวา, 2010. Magyar-Tábori et al, 2010) 4 สัปดาห์เก่าในหลอดทดลองหน่อเติบโตขึ้นก่อนหน้านี้ในMS (Murashige และ Skoog, 1962) การขยายขนาดกลางเสริมด้วย3% (w / v) ซูโครส 0.7% (w / w) วุ้น 1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร-1 6 benzyl-adenine riboside (BAR) 0.3 มิลลิกรัมต่อลิตร-1 กรดอินโดล-3-butyric (IBA) และ 0.2 มิลลิกรัมต่อลิตร-1 กรด Gibberellic (GA3) ถูกนำมาใช้สำหรับการทดลอง ห้าในหน่อหลอดทดลองถูกวางไว้ในแนวตั้งในขวด Killner (400 มล. ปริมาณ) 40 มล. ของสื่อที่แตกต่างกันที่มีส่วนประกอบเดียวกันเป็นสื่อกลางในการขยายการยกเว้นอุปทานCK. รูปแบบต่างๆของ CKs ถูกนำไปใช้เป็น CK เดียวหรือสองแหล่งที่มาของสื่อ บริติชแอร์เวย์ของ N9-riboside, riboside-benzyl adenine (BAR) และ derivate hydroxylated ของเมตา topolin (3 hydroxybenzyladenine, TOP) ถูกนำมาใช้เป็นแหล่ง CK เดียวในขนาดกลาง ยิ่งไปกว่านั้นผล CK คู่ได้ศึกษาโดยใช้ TOP และบริติชแอร์เวย์ที่ระดับของบริติชแอร์เวย์ได้อย่างต่อเนื่องของ2.2 M และความเข้มข้นของTOP ที่แตกต่างกัน ความเข้มข้นต่ำมาก0.5 M (LC-รักษา) ความเข้มข้น 2.0 M และ6.0 M ที่ใช้กันทั่วไปในวัฒนธรรมที่ยิงออกที่ซอกใบแอปเปิ้ล (CU2- และ CU6 การรักษา-ตามลำดับ) และความเข้มข้นสูงของ25.0 M (HC-รักษา) เป็น นำไปใช้สำหรับการจัดหา CK เดียวและสำหรับTOP ในการรักษาแหล่ง CK คู่ในระดับปานกลาง (รูปที่ 1).. วัฒนธรรมได้รับการเติบโตที่ 22 ◦C, 16 ชั่วโมงช่วงแสงให้โดยหลอดเย็นสีขาว(400-700 นาโนเมตร) ที่สังเคราะห์แสงโฟตอนฟลักซ์ (PPF) 57 mol ม-2 s-1 เป็นเวลา 3 สัปดาห์ก่อนที่จะวัด. การวัดและประเมินผลของการเรืองแสงคลอโรฟิลเรืองแสงคลอโรฟิลของยอดที่สองการพัฒนาอย่างเต็มที่ใบ3 สัปดาห์เก่าในหลอดทดลองหน่อ wasmeasured ใช้ OS5pModulated fluorometer (Opti -Sciences สหรัฐอเมริกา) เรืองแสงคลอโรฟิลวัดทั้งในที่มืดและปรับแสงในตัวอย่างปรับใช้การทดสอบเข้มดัดแปลงFv / Fm สำหรับความมุ่งมั่นสูงสุดผลผลิตควอนตัมและผลผลิตดัดแปลงแง่ของประสิทธิภาพการสังเคราะห์แสงของPSII สำหรับการวัดแสงที่มีประสิทธิภาพควอนตัมผลผลิตตามลำดับควอนตัมผลผลิตสูงสุดของ PSII ในตัวอย่างวัดหลังจากที่ปรับตัวมืด30 นาทียาวของใบใช้ Fv / Fm โปรโตคอล Fv / Fm อัตราส่วนที่ใช้สำหรับการประมาณค่า ofthe ส่วนสูงสุดของควอนตั้มดูดซึมได้ใช้ในศูนย์ปฏิกิริยาPSII การปรับตัวความมืดช่วยให้เรื่องการเกิดออกซิเดชันของ PSII และเพื่อการพักผ่อนที่ไม่แสงดับ เรืองแสงต่ำสุดและสูงสุด (F0 และ Fm, ตามลำดับ) ของใบเข้มปรับตัวอยู่ในวัดเดียวกันใบหลัง0.8 วินาทีชีพจรอิ่มตัว (35W หลอดฮาโลเจนที่มีตัวกรองผ่าน690 นาโนเมตรสั้น) ในตัวอย่างเข้มปรับตัวก่อนหน้านี้. เรืองแสงตัวแปร ( fv = Fm - F0) และผลผลิตควอนตัมสูงสุดของPSII (Fv / Fm) จะถูกคำนวณโดยซอฟต์แวร์ของ fluorometer ที่ยิ่งไปกว่านั้นมีประสิทธิภาพสูงสุดของกระบวนการเคมีในPSII (Fv / F0) นับ. อัตราผลตอบแทนที่ควอนตัมที่เกิดขึ้นจริงของ PSII (Y (II)) ในตัวอย่างวัดโดยใช้โปรโตคอลผลผลิตซึ่งเป็นแสงที่ปรับตัว(ไม่ปรับตัวมืดเป็นสิ่งจำเป็น) การทดสอบความมั่นคงของรัฐในการสังเคราะห์แสงการวัดอัตราส่วนของปริมาณแสงที่ใช้ในการเคมีในPSII แสงจำนวนเงินที่ดูดซับโดยchlorophylls ของ PSII ตัวอย่างใบได้รับการทดสอบภายใต้เงื่อนไขการสังเคราะห์แสงที่มั่นคงของรัฐจึงโปรโตคอลนี้แสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพของการประสบความสำเร็จภายใต้แสงไฟPSII นี้สภาพ เรืองแสงมั่นคงของรัฐ (เอฟเอ) และการเรืองแสงสูงสุด(Fms) ของใบแสงดัดแปลงวัดจริงและอัตราผลตอบแทนที่ควอนตัมของPSII (Y (II) = (Fms - Fs) / Fms)) และคาดญาติอิเล็กตรอนอัตราการขนส่ง(ETR ) จะถูกคำนวณโดยซอฟต์แวร์ของfluorometer ได้. การวัดและการประเมินผลของเนื้อหาที่คลอโรฟิลในใบเก็บตัวอย่างจากปลายทั้งสองได้รับการพัฒนาอย่างเต็มที่ใบและคลอโรฟิลของพวกเขาและข(CHL และ CHL ข) เนื้อหาถูกวัดโดยใช้วิธีสเปกอธิบายโดยFelföldy (1987) ตามนี้ absorbances วิธีการเตรียมตัวอย่างวัดที่653, 666 และ 750 นาโนเมตรและคลอโรฟิล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คุณภาพและสภาพทางสรีรวิทยาของ micropropagated หน่อ
เป็นสำคัญ ทั้งใน ภายหลังการพัฒนาอวัยวะปากดี
( ราก , ปากดียิง regeneration ) และ
กอดคอเมื่อโอน micropropagated ต้น
จากเทียมในหลอดทดลอง ( mixotroph ) ธรรมชาติ อดีตเด็ก ( โตโทรฟ )
เงื่อนไข ( hazarika , 2006 ; ซีฟ และ เฉิน พ.ศ. 2551 nszki และ
; dobr . kgmTEIXEIRA ดา ซิลวา , 2010 ; magyar-t . kgm โพริ et al . , 2010 ; magyar-t . kgm โพริ
et al . , 2011 ) artificialfactors พบชิ้นส่วนที่ใช้ในระหว่างการแผ่อิทธิพล
ทั้งโครงสร้างและการทำงานของกลไกการสังเคราะห์แสงของ

∗ในหลอดทดลองและเพาะเลี้ยงหน่อที่สอดคล้องกันของผู้เขียน โทร : 36 42 413 316 ; โทรสาร : 36 42 430 009 .
อีเมล์ : [e-mail] [e-mail]
,( J . dobr . kgm nszki )
( Yue et al . , 1992 ; desjardins , 1995 ; triques et al . , 1997 ; valeroaracama
et al . , 2006 ) .
ไซโตไคนิน ( CKS ) n6 ทดแทน derivates ของเพศตรงข้าม มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในช่วงรักแร้ และ ปากดี

ยิงวัฒนธรรมของพืชใน themediumas หลักสารควบคุมการเจริญเติบโตและการพัฒนา
ของยอด ( จอร์จ และ debergh , 2008 ; รถตู้ staden et al . , 2008 ;
magyar-t . kgm โพริ et al . , 2010และ dobr . kgm nszki TEIXEIRA ดา ซิลวา , 2010 ) .
พวกเขามีบทบาทสำคัญในการพัฒนาและ
ความแตกต่างโครงสร้างของคลอโรพลาสต์และพวกเขาแสดงเพื่อให้เกิด
ยีนที่เกี่ยวข้องในการพัฒนาคลอโรพลาสต์ ในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ (
synkov . kgm et al . , 1999 ; คูโบะและ kakimoto , 2000 ; kulaeva et al . ,
2002 ; cortleven et al . , 2011 ) นอกจากนี้ การพัฒนาคลอโรพลาสต์และ
การแสดงออกของยีนของพวกเขาเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับปกติเพื่อตอบสนองต่อ CK
ที่แสดงโดย kulaeva et al . ( 2002 ) ใช้สายพันธ์ albostrians
ของ hordeum vulgare L ' haisa ' ซึ่งเป็นความบกพร่องในการพัฒนาคลอ
.
รักษากิจกรรมคลอ ลดปริมาณการเกิดการย่อยสลายในใบและ


http://dx.doi.org/10.1016/j.jplph.2014.06.015 ภายใต้ความเครียด0176-1617 / สงวนลิขสิทธิ์ 2014 บริษัท Gmbh สงวนลิขสิทธิ์ .
J dobr . kgm nszki N Mendler drienyovszki / วารสารสรีรวิทยา 171 ( 2014 ) สภาพแสง– 212 ทํา
พบหลังจากใช้ภายนอกของพืชที่แตกต่างกันโดย CKS

( wingler et al . , 1998 ; Liu et al . , 2002 ; จาง
และ เออร์วิน , 2004 ; stirk และรถตู้ staden , 2010 ) CKS ถูกพิสูจน์

ควบคุมพฤติกรรมในสัตว์ทดลอง รวมทั้งยังไม่เปิด
ความนำของการคายน้ำและใบ , และการหายใจแสง
จึงยังการสังเคราะห์แสง ( รีฟส์ ) และ ช่วงเวลา ; haisel
et al . , 2008 ; รีเวโร et al . , 2009 ) ความรู้ของเราเกี่ยวกับการสังเคราะห์ด้วยแสง
ประสิทธิภาพและความจุของการยิงใบหรือต้น
โต photomixotrophically ( แหล่งที่มาหลักของพลังงานสำหรับการเจริญเติบโต
และพัฒนาเป็นเติมน้ำตาลในวัฒนธรรมสื่อ ) ยังคง
จำกัด และไม่สอดคล้องกัน ( hazarika , 2006 ) มีเมื่อเร็ว ๆนี้บาง
ทางอ้อม หลักฐาน เช่น ความแตกต่างในการสังเคราะห์ด้วยแสงรงควัตถุ
โปรไฟล์คลอโรฟิลเลส กิจกรรม โครงสร้างและลักษณะโครงสร้างของใบอัลตร้า

และ ในไม่มีอิทธิพลต่อ intercellular CO2 ความเข้มข้นในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อแอปเปิ้ลใบซึ่งบ่งชี้ว่าสถานะของอุปกรณ์
พัฒนาการในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชสังเคราะห์แสง
ได้รับผลกระทบโดย CKS ใช้ในสื่อ ( genkov et al . ,
1997 ; dobr . kgm nszki et al . , 2005 ; magyar-t . kgm โพริ et al . , 2010 ; aremu
et al . , 2012 ; และ nszki Mendler dobr . kgm drienyovszki 2014 ) อย่างไรก็ตาม
ถึงตอนนี้ผลของ exogenously ประยุกต์ CKS ไม่ได้
ศึกษาการสังเคราะห์ด้วยแสงความจุในหลอดทดลองต้นอย่างเคร่งครัด

ยัง . ความแตกต่างทางโครงสร้างใน CKS หอมแก้ไขผลกระทบ
การเจริญเติบโตและพัฒนาการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ผลของพวกเขาจะไม่ จำกัด สำหรับวัฒนธรรมของการขยายพันธุ์

หรือยิงแบบเมื่อพวกเขาใช้ แต่พวกเขาได้โพสต์ผลใน
ขยายพันธุ์ต่อไปรอบรักแร้หรือปากดี ) หรือรากและกระบวนการการ
เช่นกัน แม้ว่าส่วนใหญ่เบนซิลอะดีนีน ( BA ) ถูกใช้ในการขยายพันธุ์ เพราะแอปเปิ้ล

ประสิทธิภาพและเสถียรภาพสูงของพวกเขา มีตัวเลขรายงานล่าสุดในการใช้โครงสร้างของ
analogues เช่น 6-benzyal-adenine ไรโบไซด์ ( บาร์ ) และ
Meta topolin ( ด้านบน ) ซึ่งโครงสร้างเหล่านี้ได้ถูกรายงาน
เป็นทางเลือกที่ประสบความสำเร็จในแอปเปิ้ลยิงการคูณ
หลีกเลี่ยงเป็นอันตรายผลข้างเคียงของ BA ( ดูใน dobr . kgm nszki และ
TEIXEIRA ดา ซิลวา , 2010 ; magyar-t . kgm โพริ et al . , 2010 ; magyar-t . kgm โพริ
et al . , 2011 ) .
คลอโรฟิลล์ฟลูออเรสเซนซ์ measurementis มีประโยชน์ ไม่
และเครื่องมือตรวจอย่างรวดเร็ว ประสิทธิภาพการสังเคราะห์แสงของพืช
และการเรืองแสงของ psii ( photosystem II ) ได้รายงาน
สัมพันธ์แน่นกับการเปลี่ยนแปลงในการดูดซึม CO2 ( Baker , 2008 ) .
สูงสุดและศักยภาพที่แท้จริง ความ
ประสิทธิภาพควอนตัมของ psii วัดที่เปิดและปิดปฏิกิริยาศูนย์ psii สามารถ
อย่างรวดเร็ว ลักษณะการทำงานของอุปกรณ์ ( ROH
1 เซ้ค . kgm ˇ 2002 ; , Baker , 2551 ) .
CKS ประยุกต์ในปานกลาง มีบทบาทในการควบคุมการเจริญเติบโตของหลอด
ในการพัฒนาและ พวกเขาส่งผลกระทบต่อคุณภาพของหน่อไม้
สารต้นและล่าสุดทางอ้อมทดลอง
หลักฐานชี้ให้เห็นความสำคัญในการทำงานของการสังเคราะห์แสง
อุปกรณ์ ดังนั้นวัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้ คือ การตรวจสอบว่าประเภทของโครงสร้างที่แตกต่างกัน

หอม CKS ประยุกต์ที่ความเข้มข้นต่าง ๆ ในสื่อวัฒนธรรมของการยิงแอปเปิ้ล
มีผลต่อปริมาณคลอโรฟิลล์ เอ และ บี เนื้อหาของใบและการสังเคราะห์แสงของ
ความจุเครื่องมือใช้วัดสารคลอโรฟิลล์
หลังจาก 3 สัปดาห์ของการเพาะปลูก .

วัสดุวัสดุและวิธีการปลูกและการรักษา
แอปเปิ้ล ( malus × domestica borkh ) เชื้อสายพันธุ์ รอยัล กาล่าใช้
ในการทดลองเป็นพันธุ์แอปเปิ้ลมักจะใช้เป็นโมเดล
พันธุ์ในหลอดทดลอง การทดลอง ( dobr . kgm nszki TEIXEIRA และ ดา ซิลวา
2010 magyar-t . kgm โพริ et al . , 2010 ) 4-week-old ในหลอดทดลองยิง
โตก่อนหน้านี้บนอาหารสูตร MS ( Murashige และ Skoog , 1962 ) ที่เติมมาก
3 % ( w / v ) ร้อยละ 0.7 % ( w / w )
วุ้น 1.0 mg L
− 1 6-benzyl-adenine ไรโบไซด์ ( บาร์ ) , 0.3 mg L
− 1
Increase ( และอื่น ๆ ) และ 02 mg L
− 1 เรลลิค แอซิด ( GA3 )
ถูกใช้เพื่อการทดลอง ห้าในการยิงถูกวางแนวตั้ง
ใน killner ( 400 ml ในขวดปริมาตร 40 ml )
สื่อต่าง ๆที่มีอยู่ส่วนประกอบเช่นเดียวกับการแพร่กระจายกลาง ,

ยกเว้น CK จัดหาชนิดที่แตกต่างกันของ CKS ถูกนำมาใช้เป็นแหล่งเดียวหรือสอง CK
ของสื่อ BA ของ N9 ไรโบไซด์เบนซิลอะดีนีน , ไรโบไซด์
( บาร์ )และ hydroxylated derivate meta ( 3-hydroxybenzyladenine
topolin , ด้านบน ) ถูกใช้เป็นแหล่งเดียวในกลาง 1
; นอกจากนี้ CK คู่ผล การเปลี่ยนแปลงด้านบนและ
ที่ระดับของ BA และคงที่ของ 2.2 M
ความเข้มข้นของด้านบน แตกต่างกัน
ความเข้มข้นต่ำมากประมาณ 0.5 เมตร ( LC รักษา ) , ความเข้มข้นของ 2.0 M
60 M ที่ใช้กันทั่วไปในรักแร้ยิงวัฒนธรรมของแอปเปิ้ล ( CU2 -
cu6 และรักษาตามลำดับ ) และความเข้มข้นสูงของ
25.0 m ( HC รักษา ) ใช้สำหรับใส่ CK เดียว
สำหรับสุดยอดในการรักษาแหล่ง CK คู่กลาง ( รูปที่ 1 ) .
วัฒนธรรมปลูกที่ 22 ◦ c แสง ช่วงแสง 16 ชั่วโมง โดย
เย็นหลอดขาว ( 400 - 700 nm ) ที่สังเคราะห์แสง
โฟตอนฟลักซ์ ( PPF ) 57 mol m − 2 s − 1 สำหรับ 3 สัปดาห์ก่อนการวัด การวัดและประเมินผลของคลอโรฟิลล์ฟลูออเรสเซนซ์

คลอโรฟิลล์ฟลูออเรสเซนซ์ของ 2 ยอด พร้อมพัฒนา
ใบ 3-week-old ในหลอดทดลอง พบว่า ยอดการใช้ os5pmodulated
ฟลู โรมิเตอร์ ( USA OPTI วิทยาศาสตร์ ) คลอโรฟิลล์ฟลูออเรสเซนซ์
วัดทั้งในที่มืดและสว่าง ปรับ ตัวอย่าง
ดัดแปลงใช้สีเข้มเหมาะ FV / FM ทดสอบหาปริมาณผลผลิตสูงสุดและปรับปรุงผลผลิตควอนตัมแสง

psii สังเคราะห์แสงประสิทธิภาพของการหาประสิทธิภาพควอนตัมเคมี

ผลผลิตตามลำดับ ผลผลิตสูงสุดของควอนตัม psii ในตัวอย่างถูกวัด
หลังจาก 30 นาทียาวชะตาขาดของใบใช้ FV / FM
โปรโตคอลอัตราส่วน FM FV / ใช้สำหรับการประมาณค่าของส่วนของการดูดซึมสูงสุด
Quanta ที่ใช้ใน psii ปฏิกิริยาศูนย์ ชะตาขาด
ช่วย Re ออกซิเดชันของ psii และผ่อนคลาย ปลอดเคมี
ดับ ต่ำสุดและสูงสุด ( นี้ละ และ FM ,
2 ) ใบสีเข้มเหมาะทำการวัดเดียวกัน
ใบหลัง 0.8 วินาทีสำหรับชีพจรอิ่มตัว ( 35W หลอดฮาโลเจน
กับ 690 nm กรองสั้นผ่าน ) ที่เคยเข้มปรับตัวอย่าง .
ตัวแปรเรืองแสง ( FV = FM −ละ ) และผลผลิตสูงสุด psii
ควอนตัม ( FV / FM ) คำนวณโดยซอฟต์แวร์ของฟลู โรมิเตอร์
สูงสุด , และประสิทธิภาพของกระบวนการเคมีใน psii
( FV / ละ
) นับ ผลผลิตที่เกิดขึ้นจริงของ psii ควอนตัม ( X ( , 2 ) ) ในตัวอย่างถูกวัด
การใช้ผลผลิตของโปรโตคอลซึ่งเป็นแสงที่ดัดแปลง ( ไม่ชะตาขาด
เป็น ) แบบคงที่ของการสังเคราะห์แสงวัดอัตราส่วนของปริมาณที่ใช้ในแสง

โฟโตเคมีใน psii กับแสงปริมาณดูดซับโดยคลอโลฟิลล์ของ psii . ตัวอย่างใบทดสอบภายใต้เงื่อนไขนี้จึงสังเคราะห์แสง
ภายใต้พิธีสาร
แสดงความประสิทธิภาพของแสง
psii ภายใต้เงื่อนไขการคงตัว ( FS )
เรืองแสงและสูงสุด ( FMS ) วัดแสงปรับใบและผลผลิต
จำนวนที่แท้จริงของ psii ( X ( 2 ) = ( − FS FMS ) / FMS ) และคาดว่าญาติ
การขนส่งอิเล็กตรอนเท่ากัน ( ETR ) คำนวณโดยซอฟต์แวร์

วัดของฟลู โรมิเตอร์ . และการประเมินผลของปริมาณคลอโรฟิลล์ในใบ
ตัวอย่างจากยอด 2 , การพัฒนาอย่างเต็มที่
ใบและปริมาณคลอโรฟิลล์ เอ และบี ( CHL และ CHL b )
) วิธีการวัดโดยใช้เนื้อหาอธิบายโดยเสนอö ldy
( 1987 ) ตามวิธีนี้ absorbances ของเตรียม
จำนวนวัดที่ตรง 666 , และ , 750 นาโนเมตร และคลอโรฟิลล์