Preparation of conidial suspension

Preparation of conidial suspension and samples
The strain used was A. niger ATCC 1015. Conidia (1  103) were
grown in minimal agar plates for five days at 30 C. The composition
of the culture medium was as described elsewhere [33]. After
formation of the conidia, the cells were harvested with liquid minimal
medium, separated in a shaker and counted in a hemocytometer
(Bright-Line, Cambridge Instruments Inc., Buffalo, NY, USA) to
reach a concentration of 5  104 conidia per ml. Samples included
1  104 conidia and 10 lg of plasmid DNA in a total volume of
200 ll. Using these parameters the colonies were easily detected
and the number of transformants obtained was sufficient for propagation
and manipulation [22]. Furthermore, to analyze viability
changes of conidia, aliquots of 200 ll of conidia without DNA
and without shock wave treatment were incubated for 2 h at
23 C and plated on selective growth medium. All aliquots were
placed inside 15 mm  10 mm heat sealed bags, made out of commercial
polyethylene (Ziploc™, SC Johnson, Racine, WI, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เตรียมระงับ conidial และตัวอย่างพันธุ์ที่ใช้คือ อ.ไนเจอร์ ATCC 1015 Conidia (1 103) ได้ปลูกใน agar น้อยแผ่นห้าวันที่ 30 ซี องค์ประกอบของสื่อวัฒนธรรมถูกดังที่อื่น [33] หลังจากก่อตัวของ conidia เซลล์เก็บเกี่ยว มีของเหลวน้อยที่สุดกลาง แยกในการเชคเกอร์ และนับในการ hemocytometer(สดใสสาย เคมบริดจ์เครื่อง อิงค์ ควาย NY สหรัฐอเมริกา) เพื่อความเข้มข้นของ conidia 5 104 ต่อ ml. ตัวอย่างรวมถึง1 104 conidia และ lg 10 ของ plasmid DNA ในปริมาณรวมของ200 จะใช้พารามิเตอร์เหล่านี้ได้พบอาณานิคมหมายเลข transformants ได้รับไม่เพียงพอสำหรับการเผยแพร่และจัดการ [22] นอกจากนี้ การวิเคราะห์ชีวิตการเปลี่ยนแปลงของ conidia, aliquots 200 จะของ conidia โดยดีเอ็นเอและไม่รักษาคลื่นกระแทกถูก incubated สำหรับ h 2 ที่23 C และชุบในเชื้อที่ใช้ Aliquots ทั้งหมดได้วางอยู่ภายในถุงปิดผนึกความร้อน 10 มม. 15 มม. ทำจากไทยพาณิชย์เอทิลีน (Ziploc ™ SC Johnson, Racine, WI สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เตรียมระงับเชื้อราและตัวอย่าง
สายพันธุ์ที่ใช้เป็น A. ไนเจอร์ ATCC 1015 สปอร์ (1? 103) ได้รับการ
ปลูกในแผ่นวุ้นน้อยที่สุดเป็นเวลาห้าวันที่ 30 องศาเซลเซียส องค์ประกอบ
ของอาหารเลี้ยงเชื้อก็อธิบายว่าที่อื่น ๆ [33] หลังจาก
การก่อตัวของสปอร์เซลล์ได้รับการเก็บเกี่ยวที่มีน้อยที่สุดของเหลว
กลางแยกออกจากกันในเครื่องปั่นและนับ hemocytometer
(Bright-Line, เคมบริดจ์ Instruments Inc. , บัฟฟาโล, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) เพื่อ
เข้าถึงความเข้มข้นของ 5? 104 สปอร์ต่อมิลลิลิตร ตัวอย่างรวม
1? 104 สปอร์และ 10 LG พลาสมิดดีเอ็นเอในปริมาณรวมของ
200 LL การใช้พารามิเตอร์เหล่านี้อาณานิคมถูกตรวจพบได้ง่าย
และจำนวน transformant ที่ได้ก็เพียงพอสำหรับการขยายพันธุ์
และการจัดการ [22] นอกจากนี้ในการวิเคราะห์ศักยภาพใน
การเปลี่ยนแปลงของสปอร์, aliquots 200 LL ของสปอร์โดยไม่ต้องดีเอ็นเอ
และไม่มีการรักษาช็อกคลื่นถูกบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่
23 องศาเซลเซียสและชุบในสื่อการเจริญเติบโตที่เลือก ส่วนลงตัวทั้งหมดถูก
วางอยู่ภายใน 15 มม? 10 มมความร้อนถุงปิดผนึกที่ทำจากเชิงพาณิชย์
(Polyethylene Ziploc ™, SC จอห์นสัน, ไซน์, WI, USA)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเตรียมการและตัวอย่าง
สายพันธุ์เดียใช้ A . niger ATCC ในที่สุด . โคนิเดีย ( 1  103 )
โตในจานวุ้นน้อย 5 วัน ที่ 30  C องค์ประกอบ
ของวัฒนธรรมอาหารตามที่อธิบายไว้ในที่อื่น [ 33 ] หลังจาก
สร้างโคนิเดีย เซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยวกับของเหลวที่น้อยที่สุด
กลางแยกในเครื่องปั่นและนับใน hemocytometer
( สว่างสายเคมบริดจ์เครื่องมืออิงค์ , ควาย , NY , USA )

ถึงความเข้มข้น 5  เดียต่อ 104 ตัวอย่างมล. รวม
1  104 ชนิดของพลาสมิดดีเอ็นเอและ 10 ) ในปริมาตรรวมของ
200 ll การใช้พารามิเตอร์เหล่านี้อาณานิคมถูกตรวจพบได้อย่างง่ายดายและหมายเลขของพลาสมิด

ได้รับเพียงพอสำหรับการขยายพันธุ์และการจัดการ [ 22 ] นอกจากนี้ เพื่อวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงของโคนิเดีย 1
,เฉยๆของ 200 จะสร้างดีเอ็นเอ
และไม่มีการรักษาโดยคลื่นช็อกถูกบ่ม 2 H ที่
23  C และชุบบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่เลือก ทั้งหมดถูกวางไว้ภายในเฉยๆ
 10 มม. 15 มม. ความร้อนปิดผนึกถุงทำจากพลาสติกเชิงพาณิชย์
( Ziploc ™ , SC Johnson , ราก , WI , USA )