All C. botulinum culture manipulations were carried out in an anaerobic chamber (Coy Laboratory Products Inc., Grass Lake, MI, USA). Clostridium botulinum 56A (originally obtained from the National Food Processors Association, Washington, DC, USA) spores suspended in sterile distilled water were heat-shocked (80°C, 10 min), inoculated into brain heart infusion (BHI; Difco Laboratories, Detroit, MI, USA) broth (pH 6·5 and 0·5% sodium chloride) to a final concentration of c. 107 spores per ml and incubated at 30°C for various intervals. The culture was then centrifuged and passed through a 0·22 μm filter (Millipore Corporation, Bedford, MA, USA) to obtain spore and cell-free supernatant.
ทั้งหมด C Botulinum วัฒนธรรม manipulations ทดลองในห้องแอโรบิค ( เขินห้องปฏิบัติการผลิตภัณฑ์อิงค์ , ทะเลสาบ , หญ้ามิ , USA ) สีลบ 56A ( จากเดิมที่ได้จากโปรเซสเซอร์อาหารสมาคมแห่งชาติ , Washington , DC , USA ) สปอร์แขวนลอยในน้ำมีความร้อนไม่ตกใจ ( 80 ° C , 10 นาที ) , เชื้อแช่หัวใจสมอง ( BHI ; difco ห้องปฏิบัติการ , ดีทรอยต์มิ , USA ) น้ำ ( pH 6 ด้วย 5 และ 0 ด้วย 5 % โซเดียมคลอไรด์ ) ความเข้มข้นสุดท้ายของ C . 107 สปอร์ต่อมิลลิลิตรบ่มที่ 30 ° C ในช่วงเวลาต่าง ๆ วัฒนธรรมเป็นระดับและผ่าน 0 ด้วย 22 μ M กรอง ( มิลลิ Corporation , ฟอร์ด , MA , USA ) เพื่อขอรับสปอร์และการสังเคราะห์สูง .
การแปล กรุณารอสักครู่..
