As two commonly used tool enzymes,

As two commonly used tool enzymes, DNA ligase and polynucleotide kinase/phosphatase (PNKP) play important roles in DNA metabolism. More and more studies show that regulation of their activity represents promising means for cancer therapy. To detect the activity of DNA ligase with high sensitivity and specificity, a G-quadruplex DNAzyme-based DNA ligase sensor was developed. In this sensor, the use of G-quadruplex DNAzyme eliminated the needs for any labeled oligonucleotide probes, thus making label-free detection possible. The introduction of rolling circle amplification (RCA) reaction could lead to the formation of multimeric G-quadruplexes containing thousands of G-quadruplex units, which can provide highly active hemin-binding sites, thus significantly improving the sensitivity of the sensor. The proposed sensor allowed specific detection of T4 DNA ligase with a detection limit of 0.0019. U/mL. By adding a PNKP-triggered 5'-phosphroylation step of the template DNA, the above sensing strategy could be easily extended to the design of PNKP sensor. The established sensor allowed specific detection of T4 PNKP with a detection limit of 0.0018. U/mL. In addition, these two sensors could also be used for the studies on inhibitors of these two enzymes. © 2013 Elsevier B.V.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เป็นสองเครื่องมือที่ใช้โดยทั่วไปเอนไซม์ DNA ligase และ polynucleotide kinase/ฟอสฟา เตส (PNKP) มีบทบาทสำคัญในการเผาผลาญดีเอ็นเอ ศึกษามากแสดงว่า ระเบียบของกิจกรรมของตนแทนหมายถึงสัญญาการรักษาโรคมะเร็ง เซนเซอร์ G quadruplex DNAzyme ใช้ DNA ligase ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อตรวจสอบกิจกรรมของ DNA ligase มีความไวสูงและ specificity ในนี้เซ็นเซอร์ ใช้ของ DNAzyme G quadruplex ตัดความต้องการใด ๆ oligonucleotide ป้ายคลิปปากตะเข้ จึง ทำป้ายชื่อฟรีตรวจให้ได้ แนะนำกลิ้งกลมขยาย (RCA) ปฏิกิริยาอาจนำไปสู่การก่อตัวของ multimeric G quadruplexes พันหน่วย G quadruplex ซึ่งสามารถให้เว็บไซต์ hemin รวมงานสูง ประกอบด้วย จึง เพิ่มความไวของเซนเซอร์มาก เซ็นเซอร์เสนอตรวจเฉพาะ T4 DNA ligase กับ 0.0019 จำกัดตรวจสอบได้ U/mL โดยการเพิ่มขั้นตอน PNKP ทริกเกอร์ 5'-phosphroylation ของดีเอ็นเอต้นแบบ sensing กลยุทธ์ข้างต้นอาจได้ขยายการเซ็นเซอร์ PNKP การสร้างเซ็นเซอร์ตรวจเฉพาะ T4 PNKP กับ 0.0018 จำกัดตรวจสอบได้ U/mL สองเซ็นเซอร์เหล่านี้สามารถยังสามารถใช้ศึกษาใน inhibitors เอนไซม์เหล่านี้สอง © 2013 Elsevier B.V.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เป็นเครื่องมือสองที่ใช้เอนไซม์ไลเกส ดีเอ็นเอพอลินิวคลีโอไทด์ ไคเนส / ฟอสฟาเตส ( pnkp ) มีบทบาทสำคัญในการเผาผลาญ DNA มากขึ้น การศึกษาแสดงให้เห็นว่าการควบคุมกิจกรรมของพวกเขาเป็นวิธีการที่มีแนวโน้มสำหรับการรักษาโรคมะเร็ง ตรวจสอบกิจกรรมของดีเอ็นเอไลเกสที่มีความไวและความจำเพาะสูง เป็น g-quadruplex dnazyme เซ็นเซอร์ที่มีดีเอ็นเอไลเกสได้รับ ในตัวเซ็นเซอร์นี้การใช้ g-quadruplex dnazyme กำจัดความต้องการใด ๆ มีป้าย ซึ่งวิธีการทำให้ป้ายตรวจสอบฟรีเป็นไปได้ การรีดแบบวงกลม ( RCA ) ปฏิกิริยาที่อาจนำไปสู่การก่อตัวของ g-quadruplexes multimeric ที่มีหลายพันหน่วย g-quadruplex ซึ่งสามารถให้การใช้งานสูงจากการเว็บไซต์จึงมีการปรับปรุงความไวของเซ็นเซอร์ เสนอให้ตรวจดีเอ็นเอไลเกส เซ็นเซอร์ T4 กับขีดจำกัดของ 0.0019 ที่เฉพาะเจาะจง % u / โดยการเพิ่ม pnkp ทริกเกอร์ 5 ' - phosphroylation ขั้นตอนของแม่แบบดีเอ็นเอ จากกลยุทธ์ข้างต้นสามารถขยายได้อย่างง่ายดายเพื่อการออกแบบ pnkp เซ็นเซอร์การสร้างเซนเซอร์ตรวจจับ pnkp อนุญาต T4 กับขีดจำกัดของ 0.0018 ที่เฉพาะเจาะจง U / ml นอกจากนี้ ทั้งสองตัวสามารถใช้สำหรับการศึกษาตัวยับยั้งของเอนไซม์ทั้งสองนี้ . สงวนลิขสิทธิ์ปี 2013 ลดลงจาก