3.5. Effect of inhibitors, surfacta

3.5. Effect of inhibitors, surfactant agents and oxidising agent on
purified amylase
Based on the results shown in Table 2, the chelating agent EDTA
and b-mercaptoethanol did not display any significant (p < 0.05)
effect on the amylase activity, thus indicating that the amylase is
not a metalloenzyme or a disulphide-stabilized protein. It should
be noted that some of the amylase enzymes from plant sources
such as yam (Pachyrhizus erosus L.) tuber and mung (Vigna radiata)
beans have been demonstrated to be completely inhibited in the
presence of EDTA, even at a low concentration (Noman, Hoquea,
Sen, & Karim, 2006; Tripathi, Leggio, Mansfield, Ulbrich-
Hofmann, & Kayastha, 2007). The present results may be due to
the structural rigidity of amylase and the tight bounding of calcium
ions and other divalent cations to the enzyme such that removal by
EDTA treatment of cations from the enzyme is difficult. There have
been similar observations reported by Savchenko, Vieille, Kang,
and Zeikus (2002), who reported the difficulty of removing calcium
ions from the extracellular amylase from Pyrococcus furiosus using
EDTA at below 70 C due to tight bounding of the enzyme. The
enzyme was completely inhibited in the presence of other inhibitors,
i.e., DTAB, DTNB and p-hydroxymercuribenzoate except PMSF.
The stability of the enzyme was also investigated in the presence of
surfactants (SDS, Triton X-100, and Tween-80). The enzyme was
highly stable in the presence of the non-ionic surfactants such as
Triton X-100 and Tween-80 (Table 2). The enzyme also displayed
great stability in the presence of a strong ionic surfactant (SDS).
The enzyme retained 82% of its initial activity when the enzyme
was incubated in a reaction mixture with 5% SDS. The enzyme also
displayed good stability in the presence of an oxidising agent
(H2O2), retaining 53% of initial activity after being incubated with
2 M (v/v) hydrogen peroxide for 60 min (Table 2). The lack of enzyme sensitivity to the reagents could indicate that the protein
has a well-packed structure and rigid native confirmation
(Chakraborty et al., 2011; Wang, Chen, Jeng, & Sung, 2011).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.5. Effect of inhibitors, surfactant agents and oxidising agent onpurified amylaseBased on the results shown in Table 2, the chelating agent EDTAand b-mercaptoethanol did not display any significant (p < 0.05)effect on the amylase activity, thus indicating that the amylase isnot a metalloenzyme or a disulphide-stabilized protein. It shouldbe noted that some of the amylase enzymes from plant sourcessuch as yam (Pachyrhizus erosus L.) tuber and mung (Vigna radiata)beans have been demonstrated to be completely inhibited in thepresence of EDTA, even at a low concentration (Noman, Hoquea,Sen, & Karim, 2006; Tripathi, Leggio, Mansfield, Ulbrich-Hofmann, & Kayastha, 2007). The present results may be due tothe structural rigidity of amylase and the tight bounding of calciumions and other divalent cations to the enzyme such that removal byEDTA treatment of cations from the enzyme is difficult. There havebeen similar observations reported by Savchenko, Vieille, Kang,and Zeikus (2002), who reported the difficulty of removing calciumions from the extracellular amylase from Pyrococcus furiosus usingEDTA at below 70 C due to tight bounding of the enzyme. Theenzyme was completely inhibited in the presence of other inhibitors,i.e., DTAB, DTNB and p-hydroxymercuribenzoate except PMSF.The stability of the enzyme was also investigated in the presence ofsurfactants (SDS, Triton X-100, and Tween-80). The enzyme wasมีเสถียรภาพสูงในต่อหน้าของ surfactants ionic ไม่เช่นไตรตั้น X 100 และ Tween 80 (ตารางที่ 2) เอนไซม์นี้จะ แสดงขึ้นความมั่นคงดีในต่อหน้าของแข็ง ionic surfactant (SDS)เอนไซม์ที่สะสม 82% ของกิจกรรมเริ่มต้นของเมื่อเอนไซม์นี้เป็น incubated ปฏิกิริยาส่วนผสมกับ 5% SDS เอนไซม์ยังแสดงความมั่นคงดีในต่อหน้าของตัวแทน oxidising(H2O2), รักษา 53% ของกิจกรรมเริ่มต้นหลังจากการ incubated ด้วย2 เมตร (v/v) ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ใน 60 นาที (ตารางที่ 2) การขาดเอนไซม์ความใว reagents อาจบ่งชี้ว่า โปรตีนมีโครงสร้างที่บรรจุและยืนยันแข็งดั้งเดิม(Chakraborty et al., 2011 วัง เฉิน Jeng และ สูง 2011)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.5 . ผลของการใช้ oxidising ตัวแทนและตัวแทนใน

ตามบริสุทธิ์จากผลที่แสดงในตารางที่ 2 , สารคีเลตและ EDTA
b-mercaptoethanol ไม่แสดงใด ๆอย่างมีนัยสำคัญ ( p < 0.05 ) ผลต่อกิจกรรมของเอนไซม์อะไมเลส จึงแสดงให้เห็นว่าเอนไซม์อะไมเลสคือ
ไม่ใช่เมทัลโลเ ไซม์ หรือ ไดซัลไฟต์ผสมโปรตีน มันควรจะ
จะสังเกตได้ว่าบางส่วนของเอนไซม์อะไมเลสจากแหล่งพืช
เช่นยำ ( มันแกวหัวเขียว ( L . ) และถั่วเขียว )
ถั่วมีการแสดงถูกยับยั้งใน
ตนของ EDTA , แม้ในความเข้มข้นต่ำ ( โนเมิน hoquea
, , &เซ็น คาริม , 2006 ; ทริปาธิ Leggio , แมนส์ฟิลด์ -
, , ulbrich ฮอฟมันน์ , & kayastha , 2007 ) ผลอาจจะเกิดจาก
ความแข็งแกร่งของโครงสร้างของอะไมเลสและแน่นวิ่งของแคลเซียมอิออนและขนาดอื่น ๆแคต
เอนไซม์ที่กำจัดโดย
EDTA รักษาแคตจากเอนไซม์ คือ ยาก มีการรายงานโดย savchenko สังเกตเหมือนกัน

วีย์เย คัง , และ , zeikus ( 2002 ) ที่รายงานว่า ความยากของการเอาแคลเซียม
ไอออนจากภายนอก pyrococcus อะไมเลสจาก furiosus ใช้
EDTA ที่ด้านล่าง  C 70 คับ วิ่ง เนื่องจากการทำงานของเอนไซม์
เอนไซม์ถูกยับยั้งในการแสดงตนของโปรตีนอื่น ๆ ,
( DTAB dtnb p-hydroxymercuribenzoate , และยกเว้น PMSF .
เสถียรภาพของเอนไซม์ที่ใช้ในการแสดงตนของ
( SDS , สารลดแรงตึงผิว Triton X-100 และ tween-80 ) เอนไซม์คือ
มีเสถียรภาพสูงในการปรากฏตัวของสารลดแรงตึงผิว Triton X-100 และ ไม่เช่น
tween-80 ( ตารางที่ 2 ) เอนไซม์ยังแสดง
เสถียรภาพที่ดีในการแสดงตนของแรงไอออนสารลดแรงตึงผิว ( SDS )
82% ของกิจกรรมเอนไซม์รักษาเบื้องต้นเมื่อถูกบ่มเอนไซม์
ในปฏิกิริยาผสมกับ 5 % SDS . เอนไซม์ยัง
แสดงเสถียรภาพที่ดีในการแสดงตนของเจ้าหน้าที่ oxidising
( H2O2 )