MATERIALS AND METHODSLeaves of Aloe

MATERIALS AND METHODS
Leaves of Aloe vera, Bacopa monniera, Moringa oleifera and
rhizome of Zingiber officinale were collected from Loni and
adjoining areas, Maharashtra. These four individual plants
were identified and authenticated by a Professor of Botany,
Loni. The four medicinal plants were shade dried and
powdered. The selected part of the medicinal plants was
individually extracted in 80% ethanol by hot extraction in
Soxhlet apparatus till colourless solvent was obtained.
Individual extracts obtained were allowed to dry till constant
weight was obtained. The percentage yield of extract of each
plant was Aloe vera 28.62%, Bacopa monniera 16.18%,
Moringa oleifera 14.90% and Zingiber officinale 12.69%.
Concentration of combination of herbal preparation
Combination of plant extracts was prepared by mixing 25
mg each of individual extract and dissolved in 10 ml
methanol (that is 100mg/10ml), boiled and cooled. It was,
then centrifuged at 2500 rpm for 10 minutes. The supernatant
thus obtained was named as “Herbal Preparation” (HP-4) and
this combination was used in further experiments.
Phytochemical Analysis
The herbal preparation was subjected to preliminary
phytochemical analysis using standard procedures to estimate
the phytochemicals present.
Estimation of total phenolic compounds
Total phenolic content was determined by the Folin Ciocalteu
method by Folin et al 1927. [14] To 0.5 ml of 1-5 mg/ml of
herbal preparation made up with 0.5 ml of distilled water, 0.5
ml of Folin Ciocalteu reagent was added and gently mixed.
After 2 minutes 0.5 ml of 100mg/ml sodium carbonate was
added. The contents were mixed and allowed to stand for 2
hours. The optical density of the blue coloured samples was
measured at 765 nm spectrophotometrically. Standard gallic
acid of concentration 100-500μg/ml was used. The
concentration of total phenolics is expressed as milligram of
gallic acid /g of mixture. All determinations were carried out
in triplicate.
Estimation of flavonoids
The method used by Chang et al 2002 [15] with slight
modifications in total volume of reagents used; was followed
for estimation of flavonoids. 0.5 ml of concentration 100-
500μg/ml of herbal preparation was mixed with 1 ml
aluminium trichloride in ethanol (20g/l) and diluted with
ethanol to 25 ml. The absorbance was read after 40 minutes
incubation at 37°C spectrophotometrically at 415nm. Rutin (a
citrus flavonoids glycoside) of concentration 0.5mg/ml, 1.0
mg/ml, 1.5 mg/ml, 2.0 mg/ml and 2.5 mg/ml was used as a
reference compound and absorbance was measured under the
same conditions. All determinations were carried in
triplicate. The amount of flavonoids in herbal preparation
was calculated as milligram of rutin/g of mixture.
Estimation of flavonols
The content of flavonols was determined by the method of
Yermakov et al 1987 [16] with slight modifications like
reduction in total volume of reagents used. 0.05 ml of various
concentrations (100-500μg) was treated with 1ml of 2%
aluminium trichloride in ethanol and 1ml of 5% sodium
acetate. The absorption was read at 400nm was read after 2.5
hours at 37°C. The same procedure was carried out for 2ml
of reference compound rutin for concentration 0.2mg/ml, 0.4
mg/ml, 0.6 mg/ml, 0.8 mg/ml and 1.0 mg/ml. All
determinations were carried out in triplicate .The content of
flavonols was calculated in terms of milligram of rutin /g of
mixture.
Method for DPPH radical scavenging assay
Radical scavenging activity of plant extracts against stable 2,
2 diphenyl 2 picryl hydrazyl hydrate (DPPH) was determined
by the slightly modified method of Brand-Williams et al
1995. [17] DPPH reacts with an antioxidant compound, which
can donate hydrogen, and reduce DPPH. The change in
colour (from deep violet to light yellow) was measured at
517 nm on a UV visible light spectrophotometer. The
solution of DPPH in methanol 6 × 10-5 M was prepared fresh
daily before UV measurements. Three ml of this solution was
mixed with 100 microgram/ml concentration of individual
plant extracts as well as herbal preparation. The samples
were kept in the dark for 15 minutes at room temperature and
the decrease in absorbance was measured. The experiment
was carried out in triplicate. Radical scavenging activity was
calculated by the following formula.
% Inhibition = [(A B –A A)/A B] × 100
Where A B = absorption of blank sample (t= 0 min)
A A = absorption of test extract solution (t=15 mins) [18]

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการใบของว่านหางจระเข้ Bacopa monniera, oleifera มะรุม และเหง้าของไพล officinale ถูกเก็บรวบรวมจาก Loni และพื้นที่ติด มหาราษฎระ พืชเหล่านี้แต่ละสี่ระบุ และรับรองความถูกต้อง โดยมีศาสตราจารย์พฤกษศาสตร์Loni พืชสมุนไพร 4 มีสีแห้ง และผง ส่วนที่เลือกของพืชสมุนไพรได้แต่ละรายการในเอทานอล 80% สกัดโดยวิธีบีบสกัดร้อนในเครื่อง Soxhlet จนถึงตัวทำละลายสีใสได้รับได้รับสารสกัดแต่ละได้รับอนุญาตให้แห้งจนถึงค่าคงน้ำหนักที่รับ พิมพ์เปอร์เซ็นต์ของสารสกัดแต่ละพืชมีว่าน 28.62%, Bacopa monniera 16.18%Oleifera มะรุม 14.90% และไพล officinale 12.69%ความเข้มข้นของทั้งการเตรียมสมุนไพรผสมสารสกัดจากพืชเตรียมไว้ โดยผสม 25มก.แต่ละบุคคลแยก และละลายใน 10 mlเมทานอล (ที่ 100mg / 10ml), ต้ม และระบายความร้อนด้วย มันเป็นแล้ว centrifuged ที่ 2500 rpm 10 นาที Supernatantจึง ได้ชื่อว่าเป็น "สมุนไพรเตรียม" (HP-4) และชุดนี้ถูกใช้ในการทดลองต่อไปสารพฤกษเคมีวิเคราะห์การเตรียมสมุนไพรถูกต้องเบื้องต้นสารพฤกษเคมีวิเคราะห์โดยใช้กระบวนการมาตรฐานในการประเมินphytochemicals ที่ปัจจุบันประเมินรวมม่อฮ่อมฟีนอเนื้อหาทั้งหมดถูกกำหนด โดย Folin Ciocalteuวิธีโดย Folin et al 1927 [14] ให้ 0.5 ml 1-5 mg/ml ของเตรียมสมุนไพรที่มี 0.5 ml ของน้ำกลั่น 0.5ml ของรีเอเจนต์ Folin Ciocalteu เพิ่ม และค่อย ๆ ผสมหลังจาก 2 นาทีมล. 0.5 ของ 100 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร มีโซเดียมคาร์บอเนตเพิ่ม เนื้อหาถูกผสม และอนุญาตให้ยืน 2ชั่วโมง มีความหนาแน่นออปติคอลสีอย่างสีน้ำเงินวัดที่ 765 nm spectrophotometrically มาตรฐาน gallicใช้กรดเข้มข้น 100-500μg/ml ที่แสดงความเข้มข้นของรวม phenolics เป็น milligram ของกรด gallic /g ส่วนผสม Determinations ทั้งหมดได้ดำเนินการใน triplicateการประเมินของ flavonoidsวิธีการใช้โดยช้าง et al 2002 [15] ด้วยเล็กน้อยในปริมาณรวมของ reagents ใช้ ถูกตามสำหรับการประเมินของ flavonoids 0.5 ml ของความเข้มข้น 100-500μg/ml การเตรียมสมุนไพรที่ผสมกับ 1 mltrichloride อะลูมิเนียมในเอทานอล (20g/l) และแตกออกด้วยเอทานอล 25 ml Absorbance ที่ถูกอ่านหลังจาก 40 นาทีบ่มที่ 37° C ที่ 415nm spectrophotometrically Rutin (aส้ม flavonoids glycoside) ของความเข้มข้น 0.5 mg/ml, 1.0mg/ml, 1.5 mg/ml, 2.0 mg/ml และ 2.5 mg/ml ถูกใช้เป็นอ้างอิงผสม และมีวัด absorbance ภายใต้การเงื่อนไขเดียวกัน Determinations ทั้งหมดได้ดำเนินการในtriplicate ยอดของ flavonoids ในการเตรียมสมุนไพรมีคำนวณเป็น milligram rutin/g ของส่วนผสมประเมิน flavonolsเนื้อหาของ flavonols ถูกกำหนด โดยวิธีการYermakov et al 1987 [16] มีปรับเปลี่ยนเล็กน้อยเช่นลดปริมาณรวมของ reagents ใช้ 0.05 ml ของต่าง ๆความเข้มข้น (100-500μg) ได้รับมล 1% 2trichloride อะลูมิเนียมในเอทานอล 1 มิลลิลิตรของ 5% โซเดียมacetate ดูดซึมได้อ่านที่ 400nm ถูกอ่านหลัง 2.5ชั่วโมงที่ 37 องศาเซลเซียส กระบวนการเดียวกันถูกดำเนินการใน 2mlอ้างอิงผสม rutin สำหรับความเข้มข้น 0.2 mg/ml, 0.4mg/ml, 0.6 mg/ml, 0.8 mg/ml และ 1.0 mg / ml. ทั้งหมดdeterminations ได้ดำเนินการใน triplicate เนื้อหาของคำนวณใน milligram /g rutin ของ flavonolsส่วนผสมของวิธี DPPH รุนแรง scavenging assayกิจกรรม scavenging รุนแรงพืชสารสกัดจากมั่นคง 2กำหนด 2 ฟีนิลได 2 picryl hydrazyl ผับ/เลาจน์ (DPPH)โดยวิธีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยของแบรนด์วิลเลียมส์ et al1995 [DPPH 17] ทำปฏิกิริยากับสารต้านผสม ที่สามารถบริจาคไฮโดรเจน และลด DPPH การเปลี่ยนแปลงสี (จากลึกม่วงกับสีเหลืองอ่อน) เป็นวัดที่517 nm ในการ UV เห็นแสงเครื่องทดสอบกรดด่าง ที่โซลูชันของ DPPH ในเมทานอล 6 × 10-5 M ที่เตรียมสดทุกวันก่อนที่วัดรังสียูวี 3 ml ของโซลูชันนี้ได้ผสมกับสมาธิระดับ 100 microgram/ml ของแต่ละบุคคลโรงงานผลิตสารสกัดและเตรียมสมุนไพร ตัวอย่างถูกเก็บไว้ในมืดใน 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง และมีวัด absorbance ที่ลดลงนี้ ทดลองได้ดำเนินการใน triplicate กิจกรรมรุนแรง scavenging ได้คำนวณตามสูตรต่อไปนี้ยับยั้งการ% = [(แบบ B – A A) /A B] × 100A B =การดูดซึมของตัวอย่างว่างเปล่า (t = 0 นาที)A =ดูดซึมสารสกัดของทดสอบ (t = 15 นาที) [18]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการใบว่านหางจระเข้, Bacopa monniera, มะรุมและเหง้าขิงที่ถูกเก็บรวบรวมจากLoni และพื้นที่ที่อยู่ติดกันมหาราษฎ สี่เหล่านี้พืชแต่ละบุคคลที่ถูกระบุและรับรองความถูกต้องโดยศาสตราจารย์พฤกษศาสตร์เป็นLoni เฉดสีที่ได้รับสี่พืชสมุนไพรแห้งและผง ส่วนที่เลือกของพืชสมุนไพรที่ถูกสกัดเป็นรายบุคคลในเอทานอล 80% โดยการสกัดร้อนในอุปกรณ์จนถึงวิธีการสกัดแบบตัวทำละลายสีที่ได้รับ. สารสกัดจากบุคคลที่ได้รับอนุญาตให้แห้งจนคงน้ำหนักที่ได้รับ อัตราผลตอบแทนร้อยละของสารสกัดจากแต่ละโรงงานเป็นว่านหางจระเข้ 28.62% Bacopa monniera 16.18% มะรุม 14.90% และขิง 12.69%. ความเข้มข้นของการรวมกันของการเตรียมสมุนไพรรวมกันของสารสกัดจากพืชถูกจัดทำขึ้นโดยการผสม 25 มก. แต่ละของสารสกัดจากบุคคลและ ละลายใน 10 มล. เมธานอล (นั่นคือ 100mg / 10ml) ต้มและระบายความร้อน มันถูก, ปั่นแล้วที่ 2,500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาที สารละลายที่ได้รับจึงได้ชื่อว่าเป็น "การเตรียมสมุนไพร" (HP-4) และชุดนี้ถูกนำมาใช้ในการทดลองต่อไป. พฤกษเคมีวิเคราะห์การเตรียมสมุนไพรได้ภายใต้การเบื้องต้นวิเคราะห์พฤกษเคมีโดยใช้วิธีการมาตรฐานในการประเมินสารอาหารจากพืชที่มีอยู่. การประมาณค่าของสารประกอบฟีนอลรวมเนื้อหาฟีนอลทั้งหมดถูกกำหนดโดย Folin Ciocalteu วิธี Folin โดย et al, 1927 [14] เพื่อ 0.5 มิลลิลิตร 1-5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรเตรียมสมุนไพรขึ้น0.5 มิลลิลิตรของน้ำกลั่น, 0.5 มลสาร Folin Ciocalteu ถูกเพิ่มเข้ามาและ ผสมเบา ๆ . หลังจากนั้น 2 นาที 0.5 มิลลิลิตร 100mg / โซเดียมคาร์บอเนตมลถูกเพิ่ม เนื้อหาถูกผสมและได้รับอนุญาตที่จะยืนเป็นเวลา 2 ชั่วโมง ความหนาแน่นของแสงของตัวอย่างสีฟ้าได้รับการวัดที่ 765 นาโนเมตร spectrophotometrically มาตรฐานฝรั่งเศสกรดความเข้มข้นของ100-500μg / ml ถูกนำมาใช้ ความเข้มข้นของฟีนอลรวมจะแสดงเป็นมิลลิกรัมกรดฝรั่งเศส / g ผสม พิจารณาทั้งหมดได้รับการดำเนินการในการเพิ่มขึ้นสามเท่า. การประมาณค่าของ flavonoids วิธีการที่ใช้โดยช้าง et al, 2002 [15] เล็กน้อยกับการปรับเปลี่ยนในปริมาณรวมของสารเคมีที่ใช้ ตามการประมาณการของ flavonoids 0.5 มล. ของความเข้มข้น 100 500μg / ml ของการเตรียมสมุนไพรผสมกับ 1 มล. ไตรคลอไรด์อลูมิเนียมในเอทานอล (20 กรัม / ลิตร) และเจือจางด้วยเอทานอล25 มล. การดูดกลืนแสงได้อ่านหลังจาก 40 นาทีบ่มที่อุณหภูมิ37 องศาเซลเซียส spectrophotometrically ที่ 415nm รูติน (กส้มflavonoids glycoside) ของ 0.5mg ความเข้มข้น / ml 1.0 มก. / มล., 1.5 มก. / มล., 2.0 มก. / มล. และ 2.5 มก. / มล. ใช้เป็นสารประกอบอ้างอิงและการดูดกลืนแสงวัดภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน พิจารณาทั้งหมดได้รับการดำเนินการในการเพิ่มขึ้นสามเท่า จำนวนของ flavonoids ในการเตรียมสมุนไพรที่คำนวณได้เป็นมิลลิกรัมรูติน/ g ผสม. ประมาณ flavonols เนื้อหาของ flavonols ถูกกำหนดโดยวิธีการของYermakov et al, 1987 [16] มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยเช่นการลดลงของปริมาณรวมของสารเคมีที่ใช้ 0.05 มลต่างๆความเข้มข้น(100-500μg) ได้รับการรักษาด้วย 1ml 2% ไตรคลอไรด์อลูมิเนียมในเอทานอลและ 1ml ของโซเดียม 5% อะซิเตท การดูดซึมได้อ่านที่ 400nm ได้อ่านหลังจาก 2.5 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ขั้นตอนเดียวกันได้ดำเนินการสำหรับ 2ml ของรูตินสารอ้างอิงความเข้มข้น 0.2 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร 0.4 มก. / มล., 0.6 มก. / มล., 0.8 มก. / มล. และ 1.0 มก. / มล. ทั้งหมดหาความได้ดำเนินการเพิ่มขึ้นสามเท่าในเนื้อหาได้โดยเริ่มต้นของflavonols ที่คำนวณได้ในแง่ของการมิลลิกรัมรูติน / กรัมผสม. วิธีการทดสอบการต้านอนุมูล DPPH ต้านหัวรุนแรงของสารสกัดจากพืชที่มีเสถียรภาพกับ 2 2 2 diphenyl picryl hydrazyl ไฮเดรต (DPPH) ถูกกำหนดโดยวิธีการแก้ไขเล็กน้อยของแบรนด์วิลเลียมส์et al, 1995 [17] DPPH ทำปฏิกิริยากับสารต้านอนุมูลอิสระซึ่งสามารถบริจาคไฮโดรเจนและลดDPPH การเปลี่ยนแปลงสี (จากสีม่วงลึกกับแสงสีเหลือง) วัดที่ 517 นาโนเมตรใน spectrophotometer แสงที่มองเห็นยูวี แก้ปัญหาของ DPPH ในเมทานอล 6 × 10-5 M ถูกจัดทำสดใหม่ทุกวันก่อนที่วัดรังสียูวี สามมล. ของการแก้ปัญหานี้ได้รับการผสมกับ100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรความเข้มข้นของแต่ละสารสกัดจากพืชเช่นเดียวกับการเตรียมสมุนไพร กลุ่มตัวอย่างที่ถูกเก็บไว้ในที่มืดเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้องและการลดลงของการดูดกลืนแสงที่ถูกวัด การทดลองที่ได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า ต้านอนุมูลอิสระได้รับการคำนวณโดยใช้สูตรต่อไปนี้.% ยับยั้ง = [(AB -AA) / AB] × 100 ที่ไหน AB = การดูดซึมของกลุ่มตัวอย่างที่ว่างเปล่า (t = 0 นาที) AA = การดูดซึมของสารสกัดจากวิธีการแก้ปัญหาการทดสอบ (t = 15 นาที) [18]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ
ใบว่านหางจระเข้มะรุมและ
monniera บาโคบา , แง่งของขิง ศึกษาจากโลนี่และ
พื้นที่ติดกัน มหาราช เหล่านี้สี่แต่ละพืช
ถูกระบุและรับรองความถูกต้องโดยศาสตราจารย์ด้านพฤกษศาสตร์
โลนี่ พืชสมุนไพร เป็นสี่สีแห้งและ
ผง ส่วนที่เลือกของพืชสมุนไพรคือ
เครื่องปรับอากาศแบบแยกใน 80% เอทานอลโดยการสกัดร้อน
1 เครื่องมือ จนละลายสีได้ .
บุคคลสารสกัดได้รับอนุญาตให้แห้งจนน้ำหนักคงที่
ได้ . ร้อยละของผลผลิตจากแต่ละ
พืชว่านหางจระเข้ 28.62 % บาโคบา monniera 16.18 %
มะรุม 14.90 % และขิง 12.69 %

เตรียมสมุนไพรที่ความเข้มข้นของการรวมกันของการรวมกันของพืชถูกเตรียมโดยการผสม 25
มิลลิกรัมแต่ละบุคคลและสารละลายใน 10 ml
เมทานอล ( นั่นคือ 100 มก. / 10 ) , ต้มและระบายความร้อนด้วย . มันเป็น
แล้วระดับที่ 2500 รอบต่อนาที เป็นเวลา 10 นาที และน่าน
จึงได้รับชื่อเป็น " การเตรียมสมุนไพร " ( hp-4 ) และการรวมกันนี้ถูกใช้ในการทดลอง


การวิเคราะห์ไฟเพิ่มเติมการเตรียมสมุนไพรภายใต้การวิเคราะห์ไฟโดยใช้มาตรฐานการประเมินเบื้องต้น


ขอบอก ปัจจุบัน ประมาณรวมสารประกอบฟีนอล
รวมฟีโนลิก เนื้อหาถูกกำหนดจาก folin ciocalteu
วิธี folin et al 1927 . [ 14 ] 0.5 มิลลิลิตร 1-5 มก. / มล.
เตรียมสมุนไพรที่สร้างขึ้นด้วย 0.5 มิลลิลิตรของน้ำ 0.5
มิลลิลิตร folin ciocalteu รีเอเจนต์ถูกเพิ่มและผสมเบา ๆ .
หลังจาก 2 นาที 0.5 มล. 100 มก. / มล. โซเดียมคาร์บอเนตถูก
เพิ่ม เนื้อหาถูกผสมและอนุญาตให้ยืนสำหรับ 2
ชั่วโมง ความหนาแน่นของแสงของฟ้าสีจำนวน
วัดที่ 765 nm นี้ . กรดแกลลิค
มาตรฐานของความเข้มข้น 100-500 μ g / ml พบว่า
ปริมาณฟีนอลิกทั้งหมดแสดงเป็นมิลลิกรัมของกรดแกลลิค
/ g ของส่วนผสม ทั้งหมดข้างต้น พบว่าทั้งสามใบค่า
.
ของ flavonoids
วิธีการที่ใช้โดยช้าง et al , 2002 [ 15 ] ด้วยการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย
ในปริมาณรวมของสารเคมีที่ใช้ ได้แก่ การประมาณค่าของ flavonoids
. 0.5 มล. ความเข้มข้น 100 - 500 μ
g / ml การเตรียมสมุนไพรผสมกับ 1 ml
อลูมิเนียมคลอไรด์ในเอทานอล ( 20 กรัม / ลิตร ) และเจือจางด้วยแอลกอฮอล์ 25 ml ค่า

ได้อ่านหลังจาก 40 นาทีที่ 37 ° C ที่ 1 นี้ 415nm . รูติน (
ฟลาโวนอยด์ ไกลโคไซด์ ส้ม ) ความเข้มข้น 1.0
0.5mg/ml mg / ml 1.5 มก. / มล. 2.0 มก. / มล. และ 2.5 มก. / มล. และถูกใช้เป็นสารอ้างอิงค่า

เป็นวัดที่อยู่ภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน