Alu PCR is conducted using two primers, R12A/267 labelled
with the “Tet” fluorochrome, and R14B/264 labelled with the
“6-Fam” fluorochrome. PCR is carried out in a total volume of
50 ml with 20–200 ng of genomic DNA (see Note 5), 1× Expand
Tm High Fidelity PCR buffer, 100 mM each deoxynucleotide
triphosphate, 0.8 mM R12A/267 primer, 1.2 mM R14B/264
primer, 2.1 units of Expand Tm High Fidelity polymerase mix
(see Note 6). PCR running conditions are the following: initial
denaturation 5 min 94°C; 27 cycles at 94°C 30 s denaturation,
53.5°C 45 s annealing, 72°C 2 min extension; 7 min 72°C final
extension. Samples should be stored at −20°C if not immediately
analysed.
Alu pcr จะดำเนินการโดยใช้สอง primers , R 12 / 267 ป้าย
พร้อมด้วย" TET " fluorochrome ,และ R 14 B / 264 มีป้ายที่มีที่
" 6 - fam " fluorochrome . pcr เป็นไปในจำนวนของ
50 มล.พร้อมด้วย 20 - 200 ไนจีเรียของ genomic ดีเอ็นเอ(ดูที่หมายเหตุ 5 ), 1 ×ขยาย
TM High Fidelity pcr buffer , 100 มม.แต่ละ deoxynucleotide
triphosphate , 0.8 มม. R 12 / 267 เชื้อปะทุ, 1.2 มม. R 14 B / 264
เชื้อปะทุ, 2 .1 หน่วยขยาย TM High Fidelity ผสม polymerase
(ดูที่หมายเหตุ 6 ) pcr ใช้เงื่อนไขต่อไปนี้:นาที C 94 °
denaturation 5 ครั้งแรก 27 รอบที่ 94 ° C 30 S denaturation
53.5 ° C 45 S annealing 72 ° C 2 นาทีต่อ 7 นาที 72 ° C สุดท้าย
ต่อ. ตัวอย่างควรจะจัดเก็บไว้ที่ 20 ° C หากไม่ใช่ในทันที
ซึ่งจะช่วยวิเคราะห์
การแปล กรุณารอสักครู่..