The BrdU Proliferation AssayLactoba

The BrdU Proliferation Assay
Lactobacilli were added (multiplicity of infection 50) to nonconfluent
ME-180 cells. ME-180 cells with no bacteria added were
used as a control and were normalized to 100% bromodeoxyuridine
(BrdU) uptake. To determine if pH changes could influence
cell proliferation, DMEM in which the pH had been reduced with
lactic acid (Sigma-Aldrich) was added to the cells. In addition, the
supernatants of lactobacilli after 24 hours of incubation with ME-
180 cells was sterile filtered, measured for their pH changes, and
added to new cells. The supernatant from cells that were
incubated without the addition of bacteria was used as a control
for this assay. The cells that had experienced the addition of
bacteria, supernatant, or pH-reduced DMEM were all incubated
for 24 hours. Two hours prior to the termination of the assay,
BrdU was added, allowing the dye to be incorporated into the
replicating DNA of the cells that were in S phase. To quantify the

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขยาย BrdU Assay
Lactobacilli ถูกเพิ่ม (หลายหลากของการติดเชื้อ 50) เพื่อ nonconfluent
ME-180 เซลล์ ME-180 เซลล์ที่มีเชื้อแบคทีเรียเพิ่มไม่ถูก
นำมาใช้เป็นตัวควบคุมและปกติถึง 100% bromodeoxyuridine
(BrdU) การดูดซึม การตรวจสอบหากมีการเปลี่ยนแปลงค่า pH อาจมีผลต่อ
การเพิ่มจำนวนเซลล์, DMEM ที่พีเอชที่ได้รับการลดลงด้วย
กรดแลคติก (Sigma-Aldrich) ถูกบันทึกอยู่ในเซลล์ นอกจากนี้
supernatants ของแลคโตหลังจาก 24 ชั่วโมงของการบ่มด้วยชั่ง
180 เซลล์ได้รับการฆ่าเชื้อกรองวัดการเปลี่ยนแปลงค่า pH ของพวกเขาและ
เพิ่มการสร้างเซลล์ใหม่ ใสจากเซลล์ที่ถูก
บ่มโดยไม่มีการเติมเชื้อแบคทีเรียที่ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม
สำหรับการทดสอบนี้ เซลล์ที่มีประสบการณ์นอกเหนือจาก
แบคทีเรียใสหรือ DMEM ค่า pH ลดลงถูกบ่ม
24 ชั่วโมง สองชั่วโมงก่อนที่จะสิ้นสุดของการทดสอบ,
BrdU ถูกเพิ่มเข้ามาช่วยให้สีย้อมจะรวมอยู่ใน
ดีเอ็นเอจำลองของเซลล์ที่อยู่ในขั้นตอนการ S ปริมาณ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โดยการใช้ brdu
Lactobacilli เพิ่ม ( ความหลากหลายของการติดเชื้อ 50 ) nonconfluent
me-180 เซลล์ เซลล์ me-180 ไม่มีแบคทีเรียเพิ่มจำนวน
ใช้เป็นตัวควบคุมและเป็นปกติ 100% bromodeoxyuridine
( brdu ) การใช้ . เพื่อตรวจสอบว่า การเปลี่ยนแปลง pH สามารถมีอิทธิพลต่อ
เซลล์ proliferation dmem ที่ pH ได้ถูกลดลงด้วย
กรดแลคติก ( ซิกม่า Aldrich ) คือการเพิ่มเซลล์นอกจากนี้ ,
supernatants ของแลคโตบาซิลัสหลังจาก 24 ชั่วโมงของการบ่มด้วย -
180 เซลล์คือปลอดเชื้อกรองวัด pH ของการเปลี่ยนแปลงและ
เพิ่มเซลล์ใหม่ และน่าน จากเซลล์ที่บ่ม โดยนอกจากแบคทีเรีย

ถูกใช้เป็นตัวควบคุมสำหรับการทดสอบนี้ เซลล์ที่ได้รับนอกเหนือจาก
แบคทีเรียสูง หรือ pH ลดลง dmem ถูกบ่ม
ตลอด 24 ชั่วโมง สองชั่วโมงก่อนจะยกเลิกการตรวจสอบ
brdu เพิ่ม ให้ย้อมให้รวมเข้า
คำตอบดีเอ็นเอของเซลล์ที่ถูกในเฟส ช่วง