2.2.2. Determination of Bioactive C

2.2.2. Determination of Bioactive Compounds

z Preparation of Crude Extract: The test method was modified from [24] soaking powders of rice formulas accepted by consumers (before and after cooking) in 95%-methanol solvent to dissolve in distilled water at a ratio of 1:5 (w/v) for 24 hr. The mixture was then spun with a centrifuge machine at 2,500 rpm for 20 min and filtered with Whatman No.1 filtering paper. Next, the mixture was dried under vacuum conditions with a rotary evaporator at 45°C. The rough extracts obtained were used for further experimentation.

z Determination of Total Phenolic Compounds: TPC amounts were determined by the Folin-Ciocalteu method, an experimentation method modified from [24] and [25]. Rough extracts from rice at a volume of 200 μl were mixed with 1 ml of Folin-Ciocalteu reagents (diluted with disinfected distilled water at a ratio of 1:100) and 800 μl of a 10% Na2CO3 solution was added. Next, the disinfected distilled water was added to adjust the total volume to 5 ml. The mixture was blended and left to react for 2 hr before being measured for light absorption values at a wavelength of 760 nm. The standard antioxidant used to compare with the experiment results was Gallic acid.

z Extraction and Determination of γ-oryzanol and α-tocopherol: The experimentation method modified from [24] and [26] involved 1 g of soaking powder of rice formulas accepted by consumers (before and after cooking) in acetone at a ratio of 1:10 (w/v). The mixture was then spun with a centrifuge machine at maximum speed for 1 min and at 2,500 rpm for 20 min. Supernatants will be obtained after the solvent has been separated. Supernatants were then dehydrated under nitrogen.

Measurement of γ-oryzanol and α-tocopherol levels by the HPLC method was performed by dissolving rough extracts in the mobile phase and filtering by using a syringe-driven filter with a diameter of 0.45 μm. Analysis was performed using a RP-HPLC system machine (Shimadzu). 20 μl of the sample were injected through the security guard-column. Column size was 4.60 × 250 mm, 4 μl. Column temperature was controlled at 45°C. The mobile phase solvent, acetonitrile/methanol (25:75, v/v), was used at a flow rate of 1.5 ml/min. The wavelength was detected at 292 nm for measuring α-tocopherol levels and 325 nm for measuring γ-oryzanol levels.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2.2 การกำหนดสารกรรมการกเตรียมของดิบแยก z: วิธีทดสอบการถูกปรับเปลี่ยนจาก [24] ผงแบบสูตรข้าวที่ยอมรับของผู้บริโภค (ก่อน และ หลังอาหาร) ในตัวทำละลายเมทานอล 95% การละลายในน้ำกลั่นในอัตราส่วน 1:5 (w/v) ใน 24 ชั่วโมง ส่วนผสมที่ปั่นกับเครื่องเครื่องหมุนเหวี่ยงที่ 2500 รอบต่อนาทีในนาทีที่ 20 แล้ว และกรอง ด้วยกระดาษกรอง Whatman No.1 ถัดไป ส่วนผสมที่แห้งภายใต้สภาพสุญญากาศกับ evaporator โรตารี่ที่ 45 องศาเซลเซียส สารสกัดหยาบที่ได้ถูกใช้สำหรับการทดลองต่อไปz ความมุ่งมั่นของรวมม่อฮ่อม: สิ่งทอเงินถูกกำหนด โดยวิธี Folin-Ciocalteu วิธีการทดลองปรับเปลี่ยนจาก [24] [25] สารสกัดหยาบจากข้าวที่ไดรฟ์ข้อมูลของ 200 μl ถูกผสมกับ ml 1 ของ reagents Folin-Ciocalteu (ผสมกับน้ำกลั่นฆ่าเชื้อในอัตราส่วน 1: 100) และเพิ่ม μl 800 ของโซลูชัน 10% Na2CO3 ถัดไป มีเพิ่มน้ำกลั่นฆ่าเชื้อปรับปริมาตรรวมให้ 5 ml ส่วนผสมผสม และจากการตอบสนองใน 2 ชั่วโมงก่อนการวัดค่าการดูดซับแสงที่ความยาวคลื่นของ 760 nm สารต้านอนุมูลอิสระมาตรฐานที่ใช้เปรียบเทียบกับผลการทดลองเป็นน้ำกรด Gallicz สกัดและมุ่งมั่นของγ-oryzanol และα-tocopherol: วิธีทดลองปรับเปลี่ยนจาก [24] และ [26] g 1 ของแช่ผงข้าวสูตรที่ยอมรับของผู้บริโภค (ก่อน และ หลังอาหาร) ในอะซีโตนที่อัตราส่วน 1:10 (w/v) ที่เกี่ยวข้องกับการ ส่วนผสมที่ปั่นแล้วกับเครื่องเครื่องหมุนเหวี่ยงที่ความเร็วสูงสุดใน 1 นาที และที่ 2500 รอบต่อนาทีสำหรับ 20 นาที Supernatants จะได้รับหลังจากมีการแยกตัวทำละลาย Supernatants ได้แล้วอบแห้งภายใต้ไนโตรเจนวัดระดับγ-oryzanol และα-tocopherol โดยวิธี HPLC ที่ดำเนินการ โดยยุบสารสกัดหยาบในขั้นตอนการเคลื่อน และการกรอง โดยใช้ตัวขับเคลื่อนเข็มมีเส้นผ่าศูนย์กลางของ 0.45 μm วิเคราะห์ที่ดำเนินการโดยใช้เครื่องจักรระบบ RP HPLC (Shimadzu) Μl 20 ของตัวอย่างถูกฉีดผ่านคอลัมน์ยามรักษาความปลอดภัย ขนาดคอลัมน์ 4.60 × 250 มม. 4 μl มีควบคุมอุณหภูมิของคอลัมน์ที่ 45 องศาเซลเซียส ใช้ตัวทำละลายเคลื่อนระยะ acetonitrile/เม ทานอล (25:75, v/v), ที่อัตราการไหลของ 1.5 ml/min ความยาวคลื่นตรวจพบที่ 292 nm สำหรับวัดระดับα-tocopherol และ 325 nm สำหรับวัดระดับγ-oryzanol

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2.2 การวิเคราะห์หาปริมาณสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพZ การเตรียมสารสกัดหยาบ: วิธีการทดสอบได้รับการดัดแปลงมาจาก [24] ผงแช่สูตรข้าวได้รับการยอมรับจากผู้บริโภค (ก่อนและหลังการทำอาหาร) ใน 95% -methanol ตัวทำละลายในการละลายในน้ำกลั่นในอัตราส่วน 1: 5 (w / v) เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ส่วนผสมก็หมุนตัวแล้วด้วยเครื่องหมุนเหวี่ยงที่ 2500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาทีและกรองด้วยกระดาษกรอง Whatman No.1 ถัดไปผสมแห้งภายใต้เงื่อนไขที่สูญญากาศด้วยเครื่องระเหยแบบหมุน 45 องศาเซลเซียส สารสกัดหยาบที่ได้ถูกนำมาใช้สำหรับการทดลองต่อไป. Z การวิเคราะห์ปริมาณสารประกอบฟีนอลิ: จำนวนเงิน TPC ได้รับการพิจารณาโดยวิธี Folin-Ciocalteu วิธีการทดลองดัดแปลงมาจาก [24] และ [25] สารสกัดหยาบจากข้าวในปริมาณ 200 ไมโครลิตรถูกผสมกับ 1 มิลลิลิตรของสารเคมี Folin-Ciocalteu (เจือจางด้วยฆ่าเชื้อน้ำกลั่นในอัตราส่วน 1: 100) และ 800 ไมโครลิตรของ 10% วิธีการแก้ปัญหา Na2CO3 ถูกเพิ่มเข้ามา ถัดไปฆ่าเชื้อน้ำกลั่นถูกเพิ่มเข้ามาในการปรับปริมาณรวมถึง 5 มล ส่วนผสมที่ถูกผสมและซ้ายที่จะตอบสนองเป็นเวลา 2 ชั่วโมงก่อนที่จะถูกวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 760 นาโนเมตร สารต้านอนุมูลอิสระมาตรฐานใช้ในการเปรียบเทียบกับผลการทดลองเป็นกรดฝรั่งเศส. Z การสกัดและการกำหนดγ-Oryzanol และαโทโคฟีรอ: วิธีการทดลองดัดแปลงมาจาก [24] และ [26] ที่เกี่ยวข้อง 1 กรัมของผงแช่สูตรข้าวรับการยอมรับจาก ผู้บริโภค (ก่อนและหลังการทำอาหาร) ในอะซีโตนในอัตราส่วน 01:10 (w / v) ส่วนผสมก็หมุนตัวแล้วด้วยเครื่องหมุนเหวี่ยงที่ความเร็วสูงสุดเป็นเวลา 1 นาทีและ 2,500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที supernatants จะได้รับหลังจากทำละลายได้รับการแยกออกจากกัน supernatants ถูกแห้งแล้วภายใต้ไนโตรเจน. วัดγ-Oryzanol และระดับαโทโคฟีรอโดยวิธี HPLC ได้ดำเนินการโดยการละลายสารสกัดหยาบในเฟสเคลื่อนที่และการกรองโดยใช้ตัวกรองที่ขับเคลื่อนด้วยเข็มฉีดยาที่มีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 0.45 ไมโครเมตร วิเคราะห์ได้รับการดำเนินการโดยใช้เครื่องระบบ RP-HPLC (Shimadzu) 20 ไมโครลิตรของกลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการฉีดผ่านคอลัมน์ยามรักษาความปลอดภัย ขนาดคอลัมน์เป็น 4.60 × 250 มม 4 ไมโครลิตร อุณหภูมิคอลัมน์ถูกควบคุมที่ 45 องศาเซลเซียส เฟสเคลื่อนที่ตัวทำละลาย acetonitrile / เมทานอล (25:75, v / v) ถูกนำมาใช้ในอัตราการไหล 1.5 มิลลิลิตร / นาที ความยาวคลื่นถูกตรวจพบที่ 292 นาโนเมตรสำหรับการวัดระดับαโทโคฟีรอและ 325 นาโนเมตรสำหรับการวัดระดับγ-Oryzanol

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2.2 . การหาปริมาณสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ

Z การเตรียมสารสกัด : วิธีการทดสอบมีการดัดแปลงจาก [ 24 ] แช่ผงข้าวสูตรที่ได้รับการยอมรับจากผู้บริโภค ( ก่อนและหลังอาหาร ) ในตัวทำละลายเมทานอล 95% - ละลายในน้ำกลั่นในอัตราส่วน 1 : 5 ( w / v ) 24 ชั่วโมง ผสมส่วนผสมแล้วปั่นด้วยเครื่องปั่นเหวี่ยง เครื่อง 2500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาทีและกรองด้วย whatman ไม่1 กรองกระดาษ ต่อไปส่วนผสมแห้งภายใต้สภาวะสุญญากาศ เครื่องระเหยแบบหมุนกับที่ 45 องศา ที่ใช้สารสกัดหยาบที่ได้มีการทดลองเพิ่มเติม

Z วิเคราะห์ปริมาณสารประกอบฟีนอล : TPC ถูกกำหนดโดยปริมาณ folin ciocalteu วิธี การทดลองหาวิธีดัดแปลงจาก [ 24 ] และ [ 25 ]สารสกัดหยาบจากข้าวที่ปริมาณ 200 μผมผสม 1 มิลลิลิตร ( folin ciocalteu สารเคมีฆ่าเชื้อเจือจางด้วยน้ำกลั่นในอัตราส่วน 1 : 100 ) และ 800 μ L ของสารละลาย Na2CO3 10 % เพิ่ม ถัดไป , ฆ่าเชื้อน้ำกลั่นเพิ่มการปรับปริมาตร 5 มิลลิลิตรผสมผสมและซ้ายเพื่อตอบสนองสำหรับ 2 ชั่วโมงก่อนที่จะถูกวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 760 นาโนเมตร สารต้านอนุมูลอิสระ มาตรฐานที่ใช้เปรียบเทียบกับผลการทดลองคือเพิ่มขึ้น

Z การสกัดและการหาγแอลฟาโทโคเฟอรอล และ แกมมา - โอไรซานอล :การทดลองวิธีที่ดัดแปลงจาก [ 24 ] และ [ 26 ] เกี่ยวข้อง 1 กรัมของผงข้าวสูตรที่ได้รับการยอมรับจากผู้บริโภคเปียก ( ก่อนและหลังอาหาร ) ) ในอัตราส่วน 1 : 10 ( w / v ) ผสมส่วนผสมแล้วปั่นด้วยเครื่องปั่นเหวี่ยงเครื่องความเร็วสูงสุดนาน 1 นาที และ ที่ 2500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที supernatants จะได้หลังละลายได้ถูกแยกออกจากกันsupernatants แล้วอบแห้งภายใต้ไนโตรเจน

วัดγแอลฟาโทโคเฟอรอล และ แกมมา - โอไรซานอลระดับ โดย HPLC วิธีทำโดยการละลายสารสกัดหยาบในเฟสเคลื่อนที่และการกรองโดยใช้เข็มที่ขับเคลื่อนตัวกรองที่มีเส้นผ่าศูนย์กลาง 0.45 μม. วิเคราะห์เป็นระบบๆ เครื่อง ( Shimadzu ) 20 μลิตรจำนวนฉีดผ่านยามรักษาความปลอดภัยของคอลัมน์ขนาดคอลัมน์ 4.60 × 250 มม. , 4 μล. คอลัมน์อุณหภูมิถูกควบคุมไว้ที่ 45 องศา เฟสเคลื่อนที่ตัวทำละลายเมทานอล ( 25:75 ไนไตรล์ / V / V ) ถูกใช้ที่อัตราการไหล 2 มล. / นาที พบว่าความยาวคลื่นที่ 292 nm สำหรับการวัดระดับแอลฟาโทโคฟีรอลและโท 325 nm . γแกมมา - โอไรซานอลระดับ